[發明專利]一種芳香基硫酸酯酶校準品及其應用

有效

• 申請號: 202210244351.1
• 申請日: 2022-03-14
• 公開（公告）號: CN114350743B
• 公開（公告）日: 2022-05-31
• 發明（設計）人: 宋小慶;劉玉忠;陳釗
• 申請（專利權）人: 北京雅康博生物科技有限公司
• 主分類號: C12Q1/44
• 分類號: C12Q1/44;G01N1/28;G01N21/31
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002
• 代理人: 王文君

本發明涉及醫學檢驗技術領域，尤其涉及一種芳香基硫酸酯酶校準品及其應用。所述芳香基硫酸酯酶校準品包括：緩沖液、穩定劑、激活劑、表面活性劑和芳香基硫酸酯酶；所述緩沖液包括磷酸氫二鈉、磷酸二氫鉀、檸檬酸鈉或醋酸鈉的一種或多種；所述穩定劑包括甘氨酸、甘油或AES中的一種或多種；所述激活劑包括氯化鈣和/或氯化鉀；所述表面活性劑包括N?月桂酰基肌氨酸鈉、N?月桂酰基谷氨酸鈉或N?月桂酰基丙氨酸鈉中的一種或多種。本發明提供了一種穩定性強、均勻性好的液體校準品，對于芳香基硫酸酯酶的檢測有重要意義。

技術領域

本發明涉及醫學檢驗技術領域，尤其涉及一種芳香基硫酸酯酶校準品及其應用。

背景技術

芳基硫酸酯酶（Arylsulphatase，ARS，EC.3.1.6.3）是一種催化芳香基硫酸酯水解成酚類和硫酸鹽的酶，其含量是一種能夠反應多種疾病狀況的酶，例如乳腺癌、宮頸癌和前列腺癌等疾病中，芳香基硫酸酯酶都表現出增高的情形；其還在非淋巴細胞白血病、腦白質營養不良、脂肪軟骨營養不良、膀胱炎、睪丸炎等病癥中含量出現異常。

周長邵等在《一種新的血清芳香基硫酸酯酶活性檢測方法的建立及其應用》中采用發色產物4-羥基-3-甲氧基-w-硝基苯乙烯作為標準液，結果還需換算，計算繁瑣。陳鐵河等在《沉淀法分離尿中芳香基硫酸酯酶及其活性測定》中ARS活性的計算采用4-硝基兒茶酚（NC）標準液或標準曲線按照每升尿液生成5-硝基-α羥基酚的μmol/min為活性單位（U/L）計算獲得，但是不能直接給出結果。

為了保證檢測結果的準確性，芳香基硫酸酯酶校準品發揮了重要作用，而校準品中最重要的性能就是穩定性，穩定性受貯存溫度、時間和光照等多種因素影響。目前市場上沒有芳香基硫酸酯酶校準品，而大部分酶的校準品均是凍干品，凍干工藝繁瑣、不能保證較小的批間差異，且凍干品還需復溶，水質差異和人為操作誤差可能導致臨床檢測結果不準確，復溶后的校準品保存時間短。

發明內容

為了解決現有技術存在的技術問題，本發明提供一種芳香基硫酸酯酶校準品及其應用，具備較高的穩定性和均勻性。

第一方面，本發明提供一種穩定性強、均勻性好的芳香基硫酸酯酶液體校準品，包括：緩沖液、穩定劑、激活劑、表面活性劑和芳香基硫酸酯酶；

所述緩沖液包括磷酸氫二鈉、磷酸二氫鉀、檸檬酸鈉或醋酸鈉；

所述穩定劑包括甘氨酸、甘油和AES；

所述激活劑包括氯化鈣和/或氯化鉀；

所述表面活性劑包括N-月桂酰基肌氨酸鈉、N-月桂酰基谷氨酸鈉或N-月桂酰基丙氨酸鈉中的一種或多種。

本發明采用了甘氨酸、甘油和AES組成的復合穩定劑，對于芳香基硫酸酯酶具有較好的協同保護作用，同時表面活性劑采用的是氨基酸類表面活性劑，親水性強，形成囊泡結構，包裹在其中的蛋白質的構像就越穩定；同時降低了溶液表面張力，促溶效果更好，從而體系更均一分散，提高了校準品的均勻性。表面活性劑與穩定劑協同保護芳香基硫酸酯酶，提高穩定性。

進一步地，以重量份計，包括：

緩沖液0.5-25份、穩定劑27.5~81份、激活劑1-10份和表面活性劑0.05-10份；還包括芳香基硫酸酯酶0~2U/L。

進一步地，以重量份計，所述穩定劑包括：

甘油25~75份、甘氨酸2~5份和AES 0.5~1份。

甘油屬于多羥基物質，能和蛋白表面氨基酸形成氫鍵，增加ARS穩定性。甘氨酸可以和ARS的氨基酸基團形成鹽橋，增加結構的穩定性。按照一定配比的甘油、甘氨酸、AES，協同保護校準品中的芳香基硫酸酯酶的穩定性。

進一步地，還包括防腐劑1~3份，所述防腐劑為疊氮鈉、ProClin 300或鏈霉素中的任意一種或多種。