[發明專利]一種用于膠質瘤預后的基因標志物及其應用

在審

• 申請號: 202210243318.7
• 申請日: 2022-03-11
• 公開（公告）號: CN114480658A
• 公開（公告）日: 2022-05-13
• 發明（設計）人: 楊飛城;王巖;覃艷
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍陸軍軍醫大學第一附屬醫院
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886;G01N33/574
• 代理公司: 重慶志合專利事務所(普通合伙) 50210
• 代理人: 胡榮琿

本發明提供一種用于檢測膠質瘤預后或替莫唑胺耐藥性的生物標志物，所述生物標志物包括用于顯示鐵蛋白輕鏈(FTL)表達水平的第一標志物和用于顯示鐵蛋白重鏈1(FTH1)表達水平的第二標志物。本發明還提供了其在制備診斷試劑中的應用。本發明提供了可用于膠質瘤的預后的十分明確的指示指標，成功的為患者臨床預后預測及治療方式提供指導性參考。

技術領域

本發明涉及分子生物學技術領域，特別是指一種用于膠質瘤預后的基因標志物及其應用。

背景技術

鐵死亡(ferroptosis)是一種新的細胞死亡模式，是一種鐵離子依賴性的非凋亡性細胞死亡模式。2003年由Dolma等在研究小分子藥物Erastin對Ras基因突變的腫瘤細胞的作用機制時首次發現，直至2012年Dixon報道這種細胞死亡模式依賴鐵離子及活性氧誘導脂質過氧化從而導致調節性的細胞壞死，并命名為ferroptosis或鐵死亡。該細胞死亡模式在形態學、生物學及基因水平上均明顯不同于凋亡、壞死、自噬等其他形式，不能被凋亡或壞死抑制劑阻止，但細胞鐵死亡可以被小分子鐵螯合劑去鐵胺(ferrostatin-1)和抗氧化劑(liproxstatin-1)抑制。鐵死亡在腫瘤治療中非常有意義，已知腎癌與白血病對鐵死亡非常敏感，在腦卒中、肝臟損傷中也具有非常密切的聯系。研究證明鐵死亡的本質是細胞內脂質過氧化物的代謝障礙，可能是由GSH-GPX4抗氧化系統的破壞引起的。此外，鐵的正常代謝和穩態可保護細胞免受鐵死亡損傷。鐵有兩種氧化態:亞鐵(Fe²⁺)或鐵(Fe³⁺),鐵氧化還原循環可能影響細胞對鐵死亡的敏感性。Fe³⁺在血清中與轉鐵蛋白(TF)結合，然后通過細胞膜上的轉鐵蛋白受體(TFRC和TFR2)被細胞吸收。胞質鐵儲存在鐵儲存蛋白復合物-鐵蛋白中，鐵蛋白復合物由鐵蛋白輕鏈(FTL)和鐵蛋白重鏈1(FTH1)組成。

誘導腫瘤鐵死亡是一個非常有前景的抗癌方式，但是如何誘導膠質瘤發生鐵死亡，鐵死亡誘導劑是否會影響膠質母細胞瘤細胞的侵襲性生長，以及哪些鐵死亡相關的調節因子參與了替莫唑胺耐藥等問題尚不清楚。因此，現有技術中尚未見到有關利用鐵蛋白輕鏈(FTL)和鐵蛋白重鏈1(FTH1)作為預后指標，尤其是將其作為膠質瘤的預后指標，或者作為相關化療藥物的抗性指標等的應用性報道。

發明內容

針對上述現有技術中存在的不足，本發明通過對利用FTH1和FTL預測膠質瘤患者的放療后預后效果的驗證，以及對于MGMT mRNA水平和替莫唑胺耐藥相關性的研究，提供了將FTH1和FTL作為預測膠質瘤患者預后和替莫唑胺耐藥的生物標志物的技術方案。

一種用于檢測膠質瘤預后或替莫唑胺耐藥性的生物標志物，所述生物標志物包括用于顯示鐵蛋白輕鏈(FTL)表達水平的第一標志物和用于顯示鐵蛋白重鏈1(FTH1)表達水平的第二標志物；

所述第一標志物選自用于翻譯為鐵蛋白輕鏈的FTL-mRNA、鐵蛋白輕鏈的全部肽段或具其特征性的部分肽段中的一種；

所述第二標志物選自用于翻譯為鐵蛋白重鏈1的FTH1-mRNA、鐵蛋白重鏈1的全部肽段或具其特征性的部分肽段中的一種。

在根據本發明的一個實施方案中，所述FTL-mRNA序列為SEQ ID NO:1

在根據本發明的一個實施方案中，所述鐵蛋白輕鏈的全部肽段的序列為SEQ IDNO:2。

在根據本發明的一個實施方案中，所述FTH1-mRNA序列為SEQ ID NO:3。

在根據本發明的一個實施方案中，所述鐵蛋白重鏈1的全部肽段的序列為SEQ IDNO:4。

本發明還提供了上述的生物標志物在制備用于檢測膠質瘤預后或替莫唑胺耐藥性的診斷試劑中的應用。

本發明進一步提供了一種用于膠質瘤預后或替莫唑胺耐藥性的診斷試劑盒，其包含用于檢測如上述的第一標志物的第一組分，以及用于檢測上述的第二標志物的第二組分；