[發明專利]一種基于NMR波譜法對三七有效成分快速鑒別的方法

在審

• 申請號: 202210229234.8
• 申請日: 2022-03-10
• 公開（公告）號: CN114646655A
• 公開（公告）日: 2022-06-21
• 發明（設計）人: 冉國俠;宋啟軍;王嬋;陳小芬
• 申請（專利權）人: 江南大學
• 主分類號: G01N24/08
• 分類號: G01N24/08
• 代理公司: 哈爾濱市陽光惠遠知識產權代理有限公司 23211
• 代理人: 裴閃閃

1.一種三七有效成分快速鑒別的方法，其特征在于，所述方法包括：取一定量的待測樣品用氘代試劑萃取，將所得萃取物復溶于氘代試劑，采集HSQC-TOCSY核磁共振譜并進行譜圖分析，通過比對HSQC-TOCSY譜圖是否顯示有三七皂苷特征自旋共振信號群，即可鑒定待測樣品中是否存在三七有效成分，其中，三七皂苷特征自旋共振信號群包括：峰系1為¹³Cδ125.8-δ36.1-δ22.8；峰系2為¹³Cδ88.8-δ39.0-δ26.5，或δ78.8-δ39.1-δ27.4；峰系3為¹³Cδ70.0-δ49.5-δ30.6，或δ70.0-δ48.9-δ31.5；峰系4為¹³Cδ56.2-δ34.9-δ18.3，或δ77.8-δ61.2-δ44.7。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，HSQC-TOCSY譜數據采集脈沖序列為hsqcdietgpsis.2；自旋鎖定時間D9為50～80ms。

3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，HSQC-TOCSY譜數據采集時，設譜寬(6393.9Hz，24038.4Hz)，弛豫時間2s，采樣時間0.16s。

4.根據權利要求1～3任一項所述的方法，其特征在于，HSQC-TOCSY譜圖數據采用軟件Bruker Topspin 3.6.2和MestReNova 11進行處理。

5.根據權利要求1～4任一項所述的方法，其特征在于，所述待測樣品萃取前需要進行純化。

6.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，當待測樣品為三七根提取液時，純化方法包括：將三七提取液滴加至已活化的固相萃取小柱上，再用甲醇淋洗固相萃取小柱數次以洗脫tPNS，收集洗脫液，再冷凍干燥獲得三七根提取液的凈化富集產物。

7.根據權利要求6所述的方法，其特征在于，甲醇的洗脫次數為2～5次，洗脫體積為6～8mL。

8.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，當待測樣品為三七根時，需先將其粉碎，然后用60％～80％的乙醇溶液超聲波提取三七粗粉中有效成分，再將提取液濃縮后上大孔吸附樹脂柱，水洗除去雜質，再以60％～80％的乙醇洗脫，洗脫液經減壓濃縮、真空干燥得凈化富集產物。

9.根據權利要求8所述的方法，其特征在于，所述大孔吸附樹脂柱為D3520或D101。

10.權利要求1～9任一項所述的方法在檢測領域的應用。