[發明專利]嵌合的免疫球蛋白

有效

• 申請號: 202210208147.4
• 申請日: 2022-03-03
• 公開（公告）號: CN114621350B
• 公開（公告）日: 2023-04-25
• 發明（設計）人: 孟媛;鐘冬梅
• 申請（專利權）人: 東莞市朋志生物科技有限公司
• 主分類號: C07K16/46
• 分類號: C07K16/46;G01N33/577;G01N33/558;G01N33/548;G01N33/58
• 代理公司: 華進聯合專利商標代理有限公司 44224
• 代理人: 董洪榮

本申請涉及抗體工程領域，具體而言，涉及一種嵌合的免疫球蛋白。其由第一多肽和第二多肽融合得到：所述第一多肽包括位于N端的IgG可變區；以及所述第二多肽包括位于C端的IgA?CH2?CH3區，或IgM?CH3?CH4區。該免疫球蛋白具有更高的效價，且包被于固相時相比于價態相同的IgG單體仍然具有更高的效價，因此可廣泛應用于檢測領域。

技術領域

本申請涉及抗體工程領域，具體而言，涉及一種嵌合的免疫球蛋白。

背景技術

免疫球蛋白(immunoglobulin，Ig)由四條多肽鏈組成，各多肽鏈之間由數量不等的鏈間二硫鍵連接。Ig可呈“Y”字型結構，稱為Ig單體，是構成抗體的基本單位。天然Ig分子含有四條異源性多肽鏈，其中，分子量較大的兩條鏈稱為重鏈(heavy?chain，H)，而分子量較小的兩條鏈稱為輕鏈(light?chain，L)。同一Ig分子中的兩條重鏈和兩條輕鏈的氨基酸組成完全相同。重鏈分子量為50?000～75?000，由450～550個氨基酸殘基組成。由于重鏈恒定(CH)區的氨基酸組成和排列順序不同，其抗原性也不同。據此，可將Ig分為五類(class)，即IgM、IgD、IgG、IgA和IgE。在這五類中，IgG、IgD、IgE均為單體結構。IgM是由B細胞分泌的一種基本抗體，在分泌形態中則是由五個Y型單體構成的五聚體形式，具有極高的親和力。IgM的分子量極大，因此在抗原凝集反應中非常有效。IgM是一種多價態抗體。IgA可以單體或二聚體、三聚體或四聚體形式存在。分泌型IgA多以二聚體、三聚體形式存在，也是一種多價態抗體。由于一個單體抗體具有2個抗原結合位點，因此，IgA通常具有4個或6個抗原結合位點，而IgM則具有10或12個抗原結合位點，均為多價態抗體。

抗體主要由B淋巴細胞合成。每個B淋巴細胞有合成一種抗體的遺傳基因。當機體受抗原刺激時，抗原分子上的許多決定簇分別激活各個具有不同基因的B細胞。被激活的B細胞分裂增殖形成多克隆，并合成多種抗體。1975年，英國的科學家Kohler和Milstein合作將已適應于體外培養的小鼠骨髓瘤細胞與綿羊紅細胞免疫小鼠脾細胞(B淋巴細胞)進行融合，發現形成的雜交細胞既能在體外無限增殖，又能持續的分泌特異性的抗體，通過克隆化的培養可獲得的純的細胞可以產生單克隆抗體，由此發明了單克隆抗體技術。單克隆抗體技術的出現，是免疫學領域的重大突破。到二十世紀八十年代中期，單克隆抗體技術已日臻完善，開始廣泛應用于生物醫學研究和生物技術以及臨床檢測和治療等許多領域。

隨著科學技術進步，體外診斷已經成為臨床醫學診斷的重要幫手，扮演著醫生眼睛的角色。單克隆抗體作為臨床醫學體外診斷試劑中的核心原材料之一充分發揮其優勢。單克隆抗體的特異性強，大大提高了抗原—抗體反應的特異性，減少了和其它物質發生交叉反應的可能性，使試驗結果可信度更大。單克隆抗體的均一性和生物活性的單一性，使抗原—抗體反應結果便于控制，利于標準化和規范化。

免疫診斷試劑是體外診斷試劑的細分領域。免疫診斷(immunodiagnosis)是應用免疫學的理論、技術和方法診斷各種疾病和測定免疫狀態。免疫診斷的方法包括放射免疫、酶聯免疫、化學發光、熒光層析或膠體金層析等。這些方法的基本原理如下描述。使抗原或抗體結合到某種固相載體表面，并保持其免疫活性，選擇合適的標記物與抗原或抗體通過化學法形成抗原或抗體標記復合物。在測定時，把受檢標本(測定其中的抗體或抗原)和抗原或抗體標記復合物按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與其他物質分開，最終結合在固相載體上的標記復合物與標本中受檢物質的量成一定的比例。加入與標記復合物反應的底物后，底物被催化變為有色產物。因為有色產物的量與標本中受檢物質的量直接相關，故可根據顏色反應的深淺來進行定性或定量分析。然而，目前對免疫檢測用抗體效價的提升還多依賴于抗體免疫及篩選過程的改進，其效果具有很大的隨機性，不能很好地滿足檢測需要。

發明內容

本申請的第一方面涉及一種免疫球蛋白，其由第一多肽和第二多肽融合得到，其中

所述第一多肽包括位于N端的IgG可變區；以及