[發(fā)明專利]miRNA分子作為早期肺癌檢測標(biāo)志物的應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202210202632.0
• 申請日: 2022-03-03
• 公開（公告）號: CN114457160A
• 公開（公告）日: 2022-05-10
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉洋;林婷婷;王賽賽;宋治鵬;董靜;呂霞麗;潘麗萍;張宗德
• 申請（專利權(quán)）人: 首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京胸科醫(yī)院;北京市結(jié)核病胸部腫瘤研究所
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886
• 代理公司: 北京超凡宏宇專利代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 11463
• 代理人: 王闖

本發(fā)明提供了miRNA分子標(biāo)志物在制備早期肺癌檢測試劑中的應(yīng)用，涉及生物醫(yī)學(xué)技術(shù)領(lǐng)域。所述miRNA分子標(biāo)志物包括miR?99a?5p。本發(fā)明對肺癌新發(fā)病例(早期肺癌)發(fā)病前的血漿中miRNA表達(dá)水平與肺癌發(fā)病之間的關(guān)系進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)miR?99a?5p對肺癌早期診斷有較強(qiáng)的鑒別和預(yù)測能力，可以作為肺癌早期篩查和/或診斷的標(biāo)志物。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，尤其是涉及miRNA分子標(biāo)志物在制備早期肺癌檢測試劑中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

早期篩查及診斷是降低肺癌死亡率的關(guān)鍵手段之一，而早期篩查的敏感性是評判篩查效果的一個(gè)重要方面。低劑量螺旋計(jì)算機(jī)斷層掃描(low-dose spiral CT，LDCT)是目前常用的肺癌篩查手段之一，已被證明能顯著降低肺癌的死亡率，但存在一定的假陽性率，甚至還有可能產(chǎn)生潛在的輻射誘發(fā)癌變和增加醫(yī)療衛(wèi)生費(fèi)用等問題，并且對檢測儀器有一定的要求，因此臨床應(yīng)用受限。其他常用的影像學(xué)檢查盡管在肺癌篩查上發(fā)揮了重要的作用，但仍然存在漏診或過度診斷等問題，難以作為肺癌早期篩查的有效方法，因此需要其他篩查手段加以補(bǔ)充。

近些年來，基于表觀遺傳學(xué)、液體活檢和生物標(biāo)志物等肺癌檢測技術(shù)層出不窮，為肺癌早期篩查與診斷奠定了良好的基礎(chǔ)。盡管多種血液腫瘤標(biāo)志物已被廣泛應(yīng)用，但由于它們在檢測癌細(xì)胞方面仍存在敏感性和特異性相對較低的情況，在肺癌早期診斷中均不能令人滿意，因此必須探索新的潛在腫瘤標(biāo)志物來提高篩查和診斷水平。

微小核糖核苷酸(microRNA、miRNA)是一類高度保守的、長度約22個(gè)核苷酸的內(nèi)源性非編碼RNA分子，參與發(fā)育、分化、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和宿主感染應(yīng)答等生物過程，與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。miRNA由于在肺癌患者的腫瘤組織、血液、痰液和胸腔積液等體液中穩(wěn)定性高，能夠快速定量，單獨(dú)或聯(lián)合聯(lián)測有較好的靈敏度和特異度，目前在肺癌早篩早診中有一定的應(yīng)用價(jià)值。

鑒于此，特提出本發(fā)明。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種微小RNA標(biāo)志物(miRNA分子標(biāo)志物)在制備早期肺癌檢測試劑中的應(yīng)用。

為了實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的上述目的，特采用以下技術(shù)方案：

在一個(gè)方面，本發(fā)明提供了miRNA分子標(biāo)志物在制備早期肺癌檢測試劑中的應(yīng)用，所述miRNA分子標(biāo)志物包括miR-99a-5p。

微小RNA(miRNA)選自以下組：初始miRNA、前體miRNA、成熟miRNA；初始miRNA能在人細(xì)胞內(nèi)被剪切并表達(dá)成成熟miRNA；前體miRNA能在人細(xì)胞內(nèi)被剪切并表達(dá)成成熟miRNA。在一個(gè)具體優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述miRNA分子標(biāo)志物為成熟miR-99a-5p。

在本發(fā)明中，微小RNA還包括組成型核酸分子的功能等同物(即變體)，其顯示完整微小RNA核酸分子相同的功能，盡管它們通過核苷酸殘基的缺失、置換或者插入而突變。所述變體與對應(yīng)野生型miRNA基因產(chǎn)物具有少于100％(例如90％以上，包括但不限于91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％、99.1％、99.2％、99.3％、99.4％、99.5％、99.6％、99.7％、99.8％、99.9％)的同一性且具有對應(yīng)野生型miRNA基因產(chǎn)物的一個(gè)或多個(gè)生物活性的miRNA。

在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，所述早期肺癌為I期和II期的非小細(xì)胞肺癌。所述肺癌早期指臨床上確診為I期和II期的非小細(xì)胞肺癌，所述miRNA標(biāo)志物能夠區(qū)分肺癌早期患者與健康人；在肺癌早期患者與健康人之間的表達(dá)水平具有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著差異。

在本發(fā)明中，當(dāng)測定樣本中所述miRNA分子的表達(dá)水平時(shí)，與健康對照相比，如待測樣品中所述miRNA分子標(biāo)志物的表達(dá)水平顯著改變(顯著更高)，則顯示其患有早期肺癌或罹患早期肺癌的風(fēng)險(xiǎn)很高。