[發(fā)明專利]基于熔解曲線檢測結(jié)核分枝桿菌復(fù)合菌群的方法及試劑盒

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202210198175.2
• 申請日: 2022-03-02
• 公開（公告）號: CN114480691A
• 公開（公告）日: 2022-05-13
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 申洪杰;劉浩
• 申請（專利權(quán)）人: 廣州迪澳基因科技有限公司
• 主分類號: C12Q1/689
• 分類號: C12Q1/689;C12Q1/686;C12N15/11;C12R1/32
• 代理公司: 廣州博聯(lián)知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 44663
• 代理人: 宋佳

1.一種檢測結(jié)核分枝桿菌復(fù)合菌群的多重引物，其特征在于，所述多重引物包括插入序列IS6110、MPB64基因、rpoB基因、katG基因、inhA基因和gyrA基因的特異性引物對；所述特異性引物對的序列為：

F-IS6110：CTCAGCGGATTCTTCGGTCGTGGTC(SEQ ID NO：1)；

R-IS6110：TGAGGTCGCCCGTCTACTTGGTGTT(SEQ ID NO：2)；

F-MPB64：ACATCAGCCTGCCCAGTTACTACCC(SEQ ID NO：3)；

R-MPB64：TCAGCCTGCCACAGCGTGTCATA(SEQ ID NO：4)；

F-rpoB：TGGAGGCGATCACACCGCAGAC(SEQ ID NO：5)；

R-rpoB：GTGCACGTCGCGGACCTCCAGCC(SEQ ID NO：6)；

F-katG：TGGAGCAGATGGGCTTGGG(SEQ ID NO：7)；

R-katG：CCAGCAGGGCTCTTCGTCA(SEQ ID NO：8)；

F-inhA：CGGAAATCGCAGCCACGTTAC(SEQ ID NO：9)；

R-inhA：ACGGGATACGAATGGGGGTTTG(SEQ ID NO：10)；

F-gyrA：GCAATGTTCGATTCCGGCTTCC(SEQ ID NO：11)；

R-gyrA：CGGGCTTCGGTGTACCTCAT(SEQ ID NO：12)。

2.如權(quán)利要求1所述的多重引物，其特征在于，所述多重引物還包括插入序列IS6110、MPB64基因、rpoB基因、katG基因、inhA基因和gyrA基因的特異性探針；

優(yōu)選地，所述特異性探針的序列為：

P-IS6110：CGGCGCACCCACTTACGCCG(SEQ ID NO：13)；

P-MPB64：CTGGAAAATTACATCGCCCAG(SEQ ID NO：14)；

P1-rpoB：CATTGGCACCAGCCAGCTGAGCCAATG(SEQ ID NO：15)；

P2-rpoB：CCTGCTTCATGGACCAGAACAACCCGCTGGCAGG(SEQ ID NO：16)；

P3-rpoB：CCTGCTCGGGGTTGACCCACAAGCGCGCAGG(SEQ ID NO：17)；

P4-rpoB：CCATGGCGACTGTCGGCGCTGCCATGG(SEQ ID NO：18)；

P-katG：CCTGCGGACGCGATCACCAGCGGCAGCAGG(SEQ ID NO：19)；

P-inhA：CCTGCCCCGACAACCTATCGTCTCGCCGCAGG(SEQ ID NO：20)；

P1-gyrA：CGACCGCAGCCACGCCAAGTCGGTC(SEQ ID NO：21)；

P2-gyrA：CCCCGTTCAGTTGCCGAGACCATGGGG(SEQ ID NO：22)；

P3-gyrA：CCTGCCAACTACCACCCGCACGGCGACGCGGCAGG(SEQ ID NO：23)；

P4-gyrA：CCTGCTCGATCTACGACAGCCTGGTGCGGCAGG(SEQ ID NO：24)；

P5-gyrA：CATGGCCCTGCCCTGGTCGCTGCGCCATG(SEQ ID NO：25)。

3.如權(quán)利要求2所述的多重引物，其特征在于，所述特異性探針的5’端修飾有熒光基團，選自下組FAM、HEX、ROX、CY5、Cy3、TET、JOE、VIC；所述特異性探針的3’端修飾有淬滅基團，選自下組BHQ、Dabcy1、TAMRA、MGB。