[發明專利]一種具有抗炎藥效作用的西紅花花瓣多糖CSP1、制備方法及其應用

在審

• 申請號: 202210191655.6
• 申請日: 2022-02-28
• 公開（公告）號: CN114751995A
• 公開（公告）日: 2022-07-15
• 發明（設計）人: 開國銀;鄭優優;馮岳;許琦偉;陳瑩;李坤倫
• 申請（專利權）人: 浙江中醫藥大學
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00;A61K31/715;A61K36/88;A61P29/00
• 代理公司: 杭州求是專利事務所有限公司 33200
• 代理人: 邱啟旺

本發明提供了一種具有抗炎藥效作用的西紅花花瓣多糖CSP1、制備方法及其應用，本發明所獲西紅花多糖CSP1分子量為110KDa，其主要組成包括甘露糖、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖、葡萄糖醛酸等，各組分的摩爾比為8.52：35.69：22.37：5.77：13.56：10.65：3.44。與現有的藏紅花花瓣總多糖相比，其具有分子量單一，組成固定，純度更高等特點。本發明所獲多糖為西紅花花瓣中獲得的首個純多糖。本發明所用提取分離方法較其他提取方法提取率高，花瓣多糖的純度高，提取時間短。本發明的多糖具有一定的抗炎活性，且分化減輕程度與多糖濃度呈現一定的正相關，提示西紅花花瓣純化多糖具有進一步開發的價值。

技術領域

本發明涉及天然產物提取技術領域，尤其涉及一種制備西紅花花瓣多糖、提取方法及其用途。

背景技術

炎癥是機體對外來物質侵犯的一種防御反應。一般而論，炎癥是以防御為主的天然局部反應，對機體是有利的。但炎癥反應又是一些疾病的發病基礎，如嚴重的超敏炎癥反應可威脅病人的生命。此外，特殊部位或器官所發生的炎癥可造成嚴重后果。目前，以抗生素為代表的抗炎類藥物被證實具有較大毒副作用，其使用在一定程度上受到限制。因而，挖掘天然、無毒的植物源抗炎制劑已成為研究熱點。

西紅花(Crocus sativus L.)為鳶尾科(Iridaceae)番紅花屬(crocus)植物，以其柱頭入藥，具有極高的藥用和經濟價值。西紅花是“新浙八味之一”，是建德市的地理標志性農作物。研究表明，在西紅花柱頭采收過程中，需采集超過17萬朵花才能收集1kg番紅花柱頭，而花瓣等剩余部位則被作為廢棄物而拋棄。這造成了極大的資源浪費，同時也限制了西紅花的市場價值。現代科學研究表明，西紅花花瓣中包含了黃酮、多糖、酚酸等多種生物活性物質，其具有抗氧化、抗炎、抗抑郁、抗腫瘤等多種藥效作用。這些研究主要以黃酮或多糖的抗氧化性與抗腫瘤研究為主，其中花瓣多糖的藥理活性研究鮮有報道。因此，如何挖掘西紅花花瓣中多糖的藥效作用目前亟待解決的問題。

發明內容

針對現有技術存在的不足，本發明通過分離提取，從西紅花花瓣中獲得了一種西紅花多糖CSP1，藥理活性評價實驗證實該多糖具有較好的抗炎作用。

本發明提供了一種西紅花花瓣多糖的提取方法，該方法提取率高，花瓣多糖的純度高，提取時間短，而且能耗低，原料資源豐富，有利于工業化生產。該方法具體包括以下步驟：

(1)將西紅花花瓣加入蒸餾水中，油浴提取，得到提取液；

(2)將步驟(1)獲得的提取液旋蒸濃縮，加入無水乙醇，靜置，離心，得多糖沉淀；

(3)將步驟(2)獲得的多糖沉淀復溶，加入Sevage試劑，振搖，離心，保留最上層溶液；

(4)在步驟(3)獲得的最上層溶液中加入活性炭，振蕩，離心，保留上清液；

(5)將步驟(4)獲得的上清液透析過夜，將透析液上樣于DEAE陰離子層析柱中，用洗脫液洗脫純化柱，收集洗脫樣。

(6)將步驟(5)獲得的洗脫樣透析過夜并濃縮，將透析液上樣于Sephadex G-200凝膠層析柱中，用洗脫液洗脫純化柱，收集洗脫樣，濃縮，真空冷凍干燥獲得西紅花花瓣多糖CSP1。

優選地，步驟(1)中所述西紅花花瓣與蒸餾水的質量體積比為1：60，提取溫度為100℃，提取次數為3次，提取時間為2h；油浴中的油為甘油。

優選地，步驟(2)中所述的旋蒸條件為水溫55℃，轉速30r/min。

優選地，步驟(2)中加入無水乙醇，使其終濃度為70％。

優選地，步驟(2)中靜置溫度為4℃，時間為24h；離心的轉速為5000-7000r/min，時間為5-10min。