[發(fā)明專利]脫蠟液及其應(yīng)用

在審

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• 申請日: 2022-02-28
• 公開（公告）號: CN114624078A
• 公開（公告）日: 2022-06-14
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 劉新宇;梁伊靈;張斌;范例;李雨艷;孫配龍;王雙閣;周婷婷
• 申請（專利權(quán)）人: 吉林金域醫(yī)學(xué)檢驗所有限公司
• 主分類號: G01N1/28
• 分類號: G01N1/28;G01N1/30
• 代理公司: 廣州新諾專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司 44100
• 代理人: 李海恬

本發(fā)明涉及一種脫蠟液及其應(yīng)用，所述脫蠟液包括脫蠟液I和脫蠟液II，其中脫蠟液I由質(zhì)量份比為2～4:7的油酸甲酯：礦物油組成，脫蠟液II由質(zhì)量份比為2～4:1的乙醇：環(huán)己酮組成。本發(fā)明的脫蠟液，由環(huán)保安全成分組成，既能與乙醇相溶，又能溶解石蠟，脫蠟效果與二甲苯相當(dāng)。更進一步地，上述脫蠟液應(yīng)用于病理檢測組織脫蠟時，可以避免技術(shù)人員身體受到傷害、減輕環(huán)境污染和節(jié)約二甲苯凈化成本。本發(fā)明制備的病理切片染色后在顯微鏡下能夠觀察到染色鮮明、結(jié)構(gòu)清晰的細(xì)胞結(jié)構(gòu)，與二甲苯脫蠟處理得到的結(jié)果基本一致，對醫(yī)生閱片及診斷結(jié)果無影響。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及病理學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種脫蠟液及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

蘇木素(hematoxylin)和伊紅(eosin)聯(lián)合主要用于對細(xì)胞組織進行染色，簡稱HE染色法，其為石蠟切片技術(shù)里常用的染色法之一。細(xì)胞中的細(xì)胞核是由酸性物質(zhì)組成，它與堿性染料(蘇木素)的親和力較強；細(xì)胞漿則相反，它所含的堿性物質(zhì)與酸性染料(伊紅)的親和力較大，因此細(xì)胞或組織切片經(jīng)蘇木素-伊紅染色液染色后，細(xì)胞核被蘇木素染成鮮明的藍紫色，細(xì)胞漿、肌纖維、膠元纖維等呈不同程度的紅色。HE染色法是組織學(xué)、胚胎學(xué)、病理學(xué)教學(xué)與科研中最基本的染色方法，應(yīng)用及其廣泛。

蘇木素-伊紅染色法中的操作步驟，常見主要包括：脫蠟---水化---蘇木素染色---分化---藍化---伊紅染色---脫水---透明---封片；待染色石蠟切片必須把切片上支撐組織的石蠟去除，這個過程稱為脫蠟，脫蠟必須干凈，否則會導(dǎo)致切片著色不均，點狀或片狀不著色，核漿對比不清。目前最常用的石蠟切片的脫蠟液主要是二甲苯，二甲苯也是病理制片過程中傳統(tǒng)的組織透明劑，透明效果好，但易使組織收縮變脆、變硬，進而使切片困難。另外，二甲苯是一種高毒揮發(fā)性溶液，具有強烈刺激性氣味的神經(jīng)毒素，對長期接觸的人員生理系統(tǒng)具有特殊傷害，產(chǎn)生靶器官效應(yīng)，可出現(xiàn)眼及上呼吸道明顯的刺激癥狀、眼結(jié)膜及咽充血、頭暈、惡心、四肢無力、意識模糊等癥狀，對病理工作人員的身體健康產(chǎn)生嚴(yán)重危害；二甲苯揮發(fā)到空氣中還易造成環(huán)境污染，且苯系物分解難度大，治理成本也更高。為此，尋找二甲苯的替代品已經(jīng)成為當(dāng)前亟待解決的問題。

發(fā)明內(nèi)容

基于此，有必要針對上述問題，提供一種脫蠟液，采用該脫蠟液進行組織脫蠟，可以完全避免使用二甲苯，從而避免技術(shù)人員身體受到傷害、減輕環(huán)境污染和節(jié)省后續(xù)清理二甲苯的開支。

一種脫蠟液，包括脫蠟液I和脫蠟液II，所述脫蠟液I由質(zhì)量份比為2～4:7的油酸甲酯：礦物油組成，所述脫蠟液II由質(zhì)量份比為2～4:1的乙醇：環(huán)己酮組成。

上述脫蠟液，由環(huán)保安全的成分組成，既能與乙醇相溶，又能溶解石蠟，其中油酸甲酯和礦物油組成的脫蠟液I，能夠較好的溶解組織切片中的石蠟，具有較佳的脫蠟效果，且同時兼顧了殘留成分能夠較好的與脫蠟液II中的環(huán)已酮和乙醇相溶，從而能夠在不影響組織形態(tài)的前提下，被脫蠟液II進行置換，而脫蠟液II由乙醇和環(huán)已酮組成，其中的環(huán)己酮，一方面可避免乙醇對組織產(chǎn)生過度脫水的作用，另一方也能夠與脫蠟液I的成分更為融合，而乙醇的存在增加了脫蠟液II的極性，提高了脫蠟液II整體成分與后續(xù)染色過程中的各成分的相融性，避免溶劑物化性質(zhì)變化過快導(dǎo)致對組織的不利影響。最終，通過脫蠟液I和脫蠟液II的配合，達到既環(huán)保，脫蠟效果與二甲苯相當(dāng)、甚至更好的目的。

在其中一個實施例中，所述脫蠟液I由質(zhì)量份比為3:7的油酸甲酯：礦物油組成，所述脫蠟液II由質(zhì)量份比為3:1的乙醇：環(huán)己酮組成。

本發(fā)明還提供一種脫蠟液在病理學(xué)組織脫蠟染色中的應(yīng)用。

在其中一個實施例中，所述染色為蘇木素-伊紅染色。

本發(fā)明還提供一種蘇木素-伊紅染色方法，包括以下步驟：

(1)取組織切片，采用上述的脫蠟液Ⅰ和脫蠟液Ⅱ，依次分別脫蠟，沖洗；

(2)蘇木素染色，沖洗；

(3)鹽酸酒精分化，沖洗；