[發明專利]一種蛋白分布及尺寸可控的蛋白-無機納米花、制備方法及其應用

有效

• 申請號: 202210185247.X
• 申請日: 2022-02-28
• 公開（公告）號: CN114544935B
• 公開（公告）日: 2023-06-06
• 發明（設計）人: 盧革宇;閆旭;蘇丹丹;孫鵬;劉方猛;王晨光;劉曉敏;賈曉騰
• 申請（專利權）人: 吉林大學
• 主分類號: G01N33/535
• 分類號: G01N33/535;G01N33/543;G01N33/53;G01N33/58;G01N21/31;G01N21/78
• 代理公司: 長春吉大專利代理有限責任公司 22201
• 代理人: 劉世純;王恩遠

1.一種蛋白分布及尺寸可控的蛋白-無機納米花的制備方法，其步驟如下：

(1)將1mL辣根過氧化物酶的磷酸鹽緩沖溶液加入到30μL、200mmoL^-1硫酸銅水溶液中，渦旋振蕩5～10分鐘，然后靜置于4℃反應10～15小時；辣根過氧化物酶的磷酸鹽緩沖溶液中，辣根過氧化物酶的濃度為0.1～5.0mg?mL^-1；

(2)將步驟(1)的反應產物在800～1200r?min^-1下離心1～5分鐘，用去離子水定容至1mL，再在800～1200r?min^-1下離心1～5分鐘，去除上清液；然后，加入1mL含有山羊抗小鼠IgG的磷酸鹽緩沖溶液，渦旋振蕩5～10分鐘，再靜置于4℃反應20～30小時；山羊抗小鼠IgG的磷酸鹽緩沖溶液中，山羊抗小鼠IgG的濃度為0.2～0.3mg?mL^-1；最后，將反應產物在800～1200r?min^-1下離心2～3次，每次1～5分鐘；再用去離子水定容至1mL，得到蛋白分布及尺寸可控的蛋白-無機納米花溶液，即HRP@Ab₂?PIHN溶液；其中，含有山羊抗小鼠IgG的磷酸鹽緩沖溶液的濃度為0.01mmoL^-1，pH為5.0～10.0；HRP@Ab₂?PIHN尺寸范圍為4.26μm～7.48μm。

2.如權利要求1所述的一種蛋白分布及尺寸可控的蛋白-無機納米花的制備方法，其特征在于：步驟(1)中磷酸鹽緩沖溶液的濃度為0.01mmoL^-1，pH為7.4。

3.一種蛋白分布及尺寸可控的蛋白-無機納米花，其特征在于：是由權利要求1或2所述的方法制備得到。

4.權利要求3所述的一種蛋白分布及尺寸可控的蛋白-無機納米花作為檢測試劑在吡蟲啉免疫分析中的應用，其特征在于：吡蟲啉的檢測范圍為0.005～430ng?mL^-1，半抑制濃度為0.2ng?mL^-1。