[發(fā)明專利]一種用液晶傳感器實現(xiàn)一步法核酸檢測的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202210183213.7
• 申請日: 2022-02-28
• 公開（公告）號: CN114235714B
• 公開（公告）日: 2022-05-27
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 瞿瑞祥;李國強(qiáng)
• 申請（專利權(quán)）人: 之江實驗室
• 主分類號: G01N21/23
• 分類號: G01N21/23;G02F1/13
• 代理公司: 北京志霖恒遠(yuǎn)知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11435
• 代理人: 奚麗萍

本發(fā)明提出了本申請公開了一種用液晶傳感器實現(xiàn)一步法核酸檢測的方法，包括如下步驟：S1、制備若干個液晶核酸傳感器；S2、確定檢測所需的表面活性劑溶液的特定體積分?jǐn)?shù)；S3、向核酸適配體溶液中加入待測核酸溶液，并加入步驟S2中得出的特定體積分?jǐn)?shù)的表面活性劑溶液，得到待測液；S4、將待測液加入液晶核酸傳感器中，觀察光學(xué)圖像，記錄檢測結(jié)果。本發(fā)明可以解決目前“三步法”檢測過程中面臨的檢測時間長，光學(xué)圖像不穩(wěn)定的問題，可以實現(xiàn)瞬時檢測，且具有檢測速率快、穩(wěn)定性好、靈敏度高、普適性強(qiáng)的優(yōu)勢。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及傳感器技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種用液晶傳感器實現(xiàn)一步法核酸檢測的方法。

背景技術(shù)

液晶核酸傳感器的主要原理是利用液晶分子-表面活性劑-核酸適配體-待測核酸四者相互作用影響液晶分子排布，進(jìn)而影響其在偏光顯微鏡下的光學(xué)圖像。當(dāng)檢測到待測核酸時，待測核酸和核酸適配體以氫鍵相互作用連接，表面活性劑游離并驅(qū)動液晶分子呈垂直排布；當(dāng)未檢測到待測核酸時，核酸適配體與表面活性劑以靜電相互作用連接，液晶分子呈混亂排布。

現(xiàn)有的液晶核酸傳感器采用“三步法”的方法進(jìn)行核酸檢測。其步驟包括：1）添加表面活性劑，表面活性劑驅(qū)動液晶排布；2）添加核酸適配體溶液，核酸適配體通過靜電相互作用與表面活性劑結(jié)合，打亂液晶排布；3）添加待測物溶液，待測物通過氫鍵相互作用與表面活性劑競爭結(jié)合核酸適配體，驅(qū)動液晶排布。該三步法中，靜電相互作用和氫鍵相互作用的競爭耗時較長，一方面降低了液晶核酸傳感器的檢測效率，另一方面由于液相揮發(fā)改變了傳感器的光學(xué)圖像，影響了其穩(wěn)定性。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種用液晶傳感器實現(xiàn)一步法核酸檢測的方法，以克服現(xiàn)有技術(shù)中的不足。

為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供如下技術(shù)方案：

本申請公開了一種用液晶傳感器實現(xiàn)一步法核酸檢測的方法，其特征在于：包括如下步驟：

S1、制備若干個液晶核酸傳感器；

S2、確定檢測所需的表面活性劑溶液的體積分?jǐn)?shù)；

S3、向核酸適配體溶液中加入待測核酸溶液，并加入步驟S2中確定的體積分?jǐn)?shù)的表面活性劑溶液，得到待測液；

S4、取一個步驟S1中制備的液晶核酸傳感器作為檢測傳感器，將待測液加入檢測傳感器中，觀察光學(xué)圖像，記錄檢測結(jié)果。

作為優(yōu)選，所述步驟S1具體包括如下子步驟：

S11、將玻璃片基底置于取向劑溶液中浸泡，進(jìn)行取向?qū)有揎棧〕霾Ａ祝靡掖紱_洗并且烘干，得到取向?qū)有揎椇蟮牟Ａ?/p>

S12、在取向?qū)有揎椇蟮牟Ａ砻娣胖梦啪W(wǎng)膜；

S13、向微柵網(wǎng)膜中灌注液晶，并在加熱條件下靜置，得到液晶核酸傳感器。

作為優(yōu)選，所述步驟S2具體包括如下子步驟：

S21、取另一個步驟S1中制備的液晶核酸傳感器作為預(yù)備傳感器，將表面活性劑溶液加入預(yù)備傳感器，直到預(yù)備傳感器的光學(xué)圖像變?yōu)榘祱?；記錄加入表面活性劑溶液的體積；

S22、將核酸適配體溶液逐滴加入步驟S21中的預(yù)備傳感器，直至預(yù)備傳感器的光學(xué)圖像變?yōu)榱翀?；記錄加入核酸適配體溶液的體積；

S23、將步驟S21中加入表面活性劑溶液的體積與步驟S22中加入核酸適配體溶液的體積的比值記為所需表面活性劑溶液的體積分?jǐn)?shù)。

作為優(yōu)選，所述步驟S11取向劑溶液為二甲基十八烷基[3-(三甲氧基硅基)丙基]氯化銨的水溶液，或十八烷基三氯硅烷的正庚烷溶液中的任意一種，所述取向劑溶液中，溶質(zhì)的重量百分比可為1.0～2.5wt%。