[發明專利]基于miRNA特征標記的肝癌早期檢測

在審

• 申請號: 202210178482.4
• 申請日: 2022-02-25
• 公開（公告）號: CN114410795A
• 公開（公告）日: 2022-04-29
• 發明（設計）人: 張建勛;張茜;馬劉敏;黃龍妹;呂寧;陳一友
• 申請（專利權）人: 杭州諾輝健康科技有限公司
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886;C12Q1/6851;C12N15/11
• 代理公司: 北京坤瑞律師事務所 11494
• 代理人: 封新琴

一種用于肝癌早篩的miRNA特征標記檢測方法以及相應的用于肝癌檢測的試劑盒。其檢測的miRNA包括選自hsa?miR?33B?3p，hsa?miR?92B?3p，hsa?miR?205?5p，hsa?miR?374C?5p，hsa?miR?4516?3p，和hsa?miR?6803?3p的一種或多種miRNA，檢測的樣本包括組織樣本和血漿樣本。

技術領域

本發明涉及一種基于miRNA特征標記的肝癌檢測方法，以及相應的用于肝癌檢測的試劑盒，可用于肝癌的篩查。

背景技術

肝癌被譽為“癌中之王”，是最常見的惡性腫瘤之一。中國每年新發肝癌患者約占全球一半以上，死亡率在所有惡性腫瘤中位列第二位，嚴重威脅人民的生命和健康。肝癌起病非常隱匿，早期無明顯癥狀。約80％的肝癌患者首診就已進入中晚期，5年生存率幾乎為零，而早期肝癌患者經過治療，5年生存率可達60％以上。因此，早診早治是對抗肝癌的重要手段。甲胎蛋白(Alpha fetoprotein，AFP)作為一種血清標志物，是診斷肝癌的常用指標。然而，AFP檢測的靈敏度較低，僅有60％-70％的早期肝癌患者AFP值呈陽性。同時，常規的影像學檢查，如B超和CT難以發現腫瘤直徑小于2cm或密度近似肝實質的早期肝癌。因此，早期肝癌診斷仍面臨較高的假陰性率及漏診率。

因此，各國學者們從來沒有停止過尋找新的更好的肝癌標志物的腳步。理想的腫瘤標志物需要有較高的特異性，能夠將肝癌與肝硬化、肝炎、肝臟再生結節等區別開來；同時還需較高的敏感性，能夠在肝癌早期提示診斷，且有易檢測、可重復、侵入少的特點。

隨著科學的發展和進步，以液體活檢(Liquid biopsy)這種侵入式小、靈敏度高的腫瘤診斷技術應運而生。其中，循環miRNA分子標志物檢測己被寫入2019版《原發性肝癌診療規范》，并被納入肝癌早期檢測和診斷臨床應用。

微小核糖核酸(microRNA，miRNA)是一種單鏈的、長度較短的內源性非編碼RNA，己被確認可以廣泛參與調節細胞生長和發育、分化、凋亡等生命活動，并能積極影響腫瘤的發生和發展。研究表明，約1/3以上的人類基因直接受到miRNA的調控作用，其生物學效應是阻遏或降解mRNA靶標轉錄和翻譯成相應的蛋白質，進而參與生命活動的進程。其中，外周血中循環的、游離的miRNAs常以核酸.蛋白質復合物等形式穩定地存在于血液中，并可耐受反復凍融和極端pH環境。因此，這些因素決定了其不易降解的生物學特性。miRNAs在消化系統中的作用涉及發育、老化、分泌、代謝、病毒感染、免疫反應、腫瘤等等方面。

發明內容

具體地，本發明通過如下各項技術方案解決現有技術中存在的技術問題。

1.一種用于肝癌檢測的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包含用于檢測選自hsa-miR-33B-3p，hsa-miR-92B-3p，hsa-miR-205-5p，hsa-miR-374C-5p，hsa-miR-4516-3p，和hsa-miR-6803-3p的一個或多個miRNA的檢測試劑。

2.根據項1所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包含用于檢測選自hsa-miR-33B-3p，hsa-miR-92B-3p，hsa-miR-205-5p，hsa-miR-374C-5p，hsa-miR-4516-3p，和hsa-miR-6803-3p的至少兩個miRNA的檢測試劑。

3.根據項1所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包含用于檢測選自hsa-miR-33B-3p，hsa-miR-92B-3p，hsa-miR-205-5p，hsa-miR-374C-5p，hsa-miR-4516-3p，和hsa-miR-6803-3p的至少三個miRNA的檢測試劑。

4.根據項1所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包含用于檢測選自hsa-miR-33B-3p，hsa-miR-92B-3p，hsa-miR-205-5p，hsa-miR-374C-5p，hsa-miR-4516-3p，和hsa-miR-6803-3p的至少四個miRNA的檢測試劑。