[發明專利]一種防治果蔬真菌病害的復合微生物菌劑及其制備方法和應用

在審

• 申請號: 202210174943.0
• 申請日: 2022-02-25
• 公開（公告）號: CN114606136A
• 公開（公告）日: 2022-06-10
• 發明（設計）人: 祝春華;余冬冬;賈朋朋;李迎鋒;何孟夏
• 申請（專利權）人: 赤天化科技集團有限公司
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12N1/20;C12N11/14;C12N1/04;A01N63/38;A01N63/22;A01N63/20;A01P3/00;C12R1/07;C12R1/885;C12R1/01
• 代理公司: 鄭州銘晟知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 41134
• 代理人: 張鵬

1.一種防治果蔬真菌病害的復合微生物菌劑，其特征在于，各組分按重量份數包括：長枝木霉菌液12-18份、側孢短芽孢桿菌液10-15份、解淀粉芽孢桿菌液8-12份、載體20-25份、壁材25-35份、保護劑9-18份；

所述載體為高嶺土；所述壁材為木薯淀粉與改性瓜爾膠的混合物；所述保護劑為β-環糊精、海藻酸鈉和棕櫚酸的混合物；所述長枝木霉菌液、側孢短芽孢桿菌液、解淀粉芽孢桿菌液中有效活菌數分別不少于1.0×10¹⁰cfu/g。

2.根據權利要求1所述的防治果蔬真菌病害的復合微生物菌劑，其特征在于，所述復合微生物菌劑由以下步驟制備：(1)將長枝木霉菌、側孢短芽孢桿菌、解淀粉芽孢桿菌分別接種于對應的種子培養基中，25-32℃、180-250r/min搖床培養10-16h，得種子液；(2)將種子液分別用對應的發酵培養基中發酵培養，至各自菌液中有效活菌數不少于在1.0×10¹⁰cfu/g時，停止發酵，得菌液；(3)將菌液與載體混合均勻，使載體充分吸附菌體，得囊芯；(4)囊芯中加入壁材和保護劑，攪拌30-40min使其糊化，然后真空噴霧冷凍干燥，真空噴霧冷凍干燥結束后收集所得產物，得復合微生物菌劑。

3.根據權利要求2所述的防治果蔬真菌病害的復合微生物菌劑，其特征在于，所述長枝木霉菌的種子培養基為PDA培養基；所述側孢短芽孢桿菌的種子培養基為LB培養基；所述解淀粉芽孢桿菌的種子培養基為NA培養基。

4.根據權利要求2所述的防治果蔬真菌病害的復合微生物菌劑，其特征在于，所述長枝木霉菌的發酵培養基配方為：馬鈴薯10g/L、葡萄糖12g/L、酵母浸膏2g/L、KH₂PO₄1g/L、FeSO₄0.6g/L、蒸餾水1L，PH為6.8-7.2、接種量4％；所述側孢短芽孢桿菌的發酵培養基配方為：蛋白胨12g/L、葡萄糖8g/L、CaCl₂0.2g/L、MnSO₄0.2g/L、PH為7.0-7.2、接種量4％；所述解淀粉芽孢桿菌的發酵培養基配方為：豆粕12g/L；蛋白胨5g/L、葡萄糖3g/L、Na₂HPO₄·12H₂O0.4g/L、KH₂PO₄0.03g/L、CaCl₂0.1g/L、蒸餾水1L，PH為7.2-7.4、接種量3％。

5.根據權利要求1所述的防治果蔬真菌病害的復合微生物菌劑，其特征在于，所述木薯淀粉與改性瓜爾膠的質量比為5-7:8-10；所述保護劑中β-環糊精、海藻酸鈉和棕櫚酸的質量比為：4-7:15-18:3-5。

6.根據權利要求1所述的防治果蔬真菌病害的復合微生物菌劑，其特征在于，所述改性瓜爾膠由以下步驟制備：(1)將10g三聚氯氰和50g水，攪拌均勻，然后在0℃下滴加濃度10.5％的對氨基苯磺酸鈉溶液100克，調節保持pH值為8.5，30min內，pH值無變化，反應結束，抽濾、洗滌、干燥后得瓜爾膠改性劑；(2)將瓜爾膠改性劑40g、異丙醇60g和重量濃度為35％的氫氧化鈉溶液30mL混合均勻，然后噴灑在200g的瓜爾膠原粉上，55℃下攪拌反應3h，冷卻至室溫，調節pH值調至6.0，用氣流干燥法干燥，獲得陰離子瓜爾膠，所述陰離子取代度為0.42，1％水溶液25％粘度為6000cps，水不溶物含量為3.21％。

7.根據權利要求1-6所述的的防治果蔬真菌病害的復合微生物菌劑，其特征在于，所述復合微生物菌劑用于防治果蔬立枯病。

8.根據權利要求1-6所述的的防治果蔬真菌病害的復合微生物菌劑，其特征在于，其特征在于，所述復合微生物菌劑直接應用于果蔬的根和種子，具體應用方法為：將所述復合微生物菌劑與水混合制成漿液，將果蔬種子或幼苗根系沾取漿液，然后種植。