[發明專利]一種保健酒羥基自由基清除率的快速檢測方法

在審

• 申請號: 202210173031.1
• 申請日: 2022-02-24
• 公開（公告）號: CN114577786A
• 公開（公告）日: 2022-06-03
• 發明（設計）人: 王英特;張媛媛;吳蓉蓉;王麗蘋;王云霞
• 申請（專利權）人: 山西大學
• 主分類號: G01N21/78
• 分類號: G01N21/78;G01N21/01
• 代理公司: 太原申立德知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 14115
• 代理人: 孫樂

1.一種保健酒羥基自由基清除率的快速檢測方法，其特征在于：包括如下步驟：

步驟1：配制羅丹明B溶液、FeSO₄溶液、H₂O₂溶液和抗壞血酸溶液；

步驟2：將羅丹明B溶液、FeSO₄溶液與去離子水按比例混合均勻得到溶液Ⅰ，將定量濾紙浸潤到溶液Ⅰ中20-30s，取出室溫下晾干，得到羥基自由基清除率為100％的顯色卡；

步驟3：將羅丹明B溶液、FeSO₄溶液、H₂O₂溶液與去離子水按比例混合均勻得到溶液Ⅱ，將定量濾紙浸潤到溶液Ⅱ中20-30s，取出室溫下晾干，得到羥基自由基清除率為0％的顯色卡；

步驟4：將羅丹明B溶液、FeSO₄溶液與去離子水按比例混合均勻，取等體積的上述混合液置于若干支比色管中，分別加入不同體積的抗壞血酸溶液，再加入H₂O₂溶液，充分搖勻，反應1-2min后，將定量濾紙分別浸潤到上述不同反應液中20-30s，取出室溫下晾干，得到一系列顏色由淺至深的標準顯色卡；

步驟5：用紫外可見分光光度計分別測定溶液Ⅰ、溶液Ⅱ以及步驟4中不同反應液的吸光度值，并用以下公式計算不同反應液對應的標準羥基自由基清除率：

其中，Inhibition為標準羥基自由基清除率，A₀為溶液Ⅰ的吸光度，A為溶液Ⅱ的吸光度，As為步驟4中不同顏色的標準顯色卡所對應的反應液的吸光度值；

步驟6：將待測保健酒樣品滴于羥基自由基清除率為100％的顯色卡上，再滴加步驟1配制的H₂O₂溶液，反應1-2min后，取出試紙并晾干，將試紙的顏色與由步驟4制作的標準顯色卡對比，找出接近的顏色，讀取標準顯色卡上對應的羥基自由基清除率值，即為保健酒的羥基自由基清除率值。

2.根據權利要求1所述的一種保健酒羥基自由基清除率的快速檢測方法，其特征在于：所述羅丹明B溶液的濃度為7.00×10^-3mol/L，FeSO₄溶液的濃度為0.1mol/L，H₂O₂溶液的濃度為0.1mol/L，抗壞血酸溶液的濃度為1.0mol/L。

3.根據權利要求1所述的一種保健酒羥基自由基清除率的快速檢測方法，其特征在于：所述步驟2中羅丹明B溶液、FeSO₄溶液與去離子水的體積比為1:3:6。

4.根據權利要求1所述的一種保健酒羥基自由基清除率的快速檢測方法，其特征在于：所述步驟3中羅丹明B溶液、FeSO₄溶液、H₂O₂溶液與去離子水的體積比為1:3:3:3。

5.根據權利要求1所述的一種保健酒羥基自由基清除率的快速檢測方法，其特征在于：所述步驟4中將羅丹明B溶液、FeSO₄溶液、去離子水以及后續加入的H₂O₂溶液的體積比為1:3:3:3。