[發明專利]一種新型無血清細胞凍存液配方

在審

• 申請號: 202210171965.1
• 申請日: 2022-02-24
• 公開（公告）號: CN114467924A
• 公開（公告）日: 2022-05-13
• 發明（設計）人: 曹哲厚;韋俊;吳立前;馬悅悅
• 申請（專利權）人: 杭州原生生物科技有限公司
• 主分類號: A01N1/02
• 分類號: A01N1/02
• 代理公司: 武漢菲翔知識產權代理有限公司 42284
• 代理人: 賈雙明

本發明公開了一種新型無血清細胞凍存液配方，其組成包括以人血清白蛋白為主體，添加10％的DMSO、13.3％的復方電解質注射液和16.70％的右旋糖苷。本發明通過優化凍存液配方，顯著提高了細胞的存活率，降低了污染源，提供了新型無血清細胞凍存液,易制備、易保存、復蘇后的細胞活性極高且避免了血清存在的潛在危險。

技術領域

本發明涉及細胞及生物工程學領域，特別涉及一種新型無血清細胞凍存液配方。

背景技術

細胞凍存是將細胞放在低溫環境，減少細胞代謝，以便長期儲存的一種技術。細胞凍存是細胞保存的主要方法之一，起到了細胞保種的作用。利用凍存技術將細胞置于-196℃液氮中低溫保存，可以使細胞暫時脫離生長狀態而將其細胞特性保存起來，這樣在需要的時候再復蘇細胞用于實驗。而且適度地保存一定量的細胞，可以防止因正在培養的細胞被污染或其他意外事件而使細胞丟種，起到了細胞保種的作用。除此之外，還可以利用細胞凍存的形式來購買、寄贈、交換和運送某些細胞。

目前市面上的凍存液有很多種，其主要保存手段通常含有血清，血清作為一種細胞的營養物質，為細胞提供基本營養物質、提供激素和各種生長因子、提供結合蛋白、提供促接觸和生長因子使細胞貼壁免受機械損傷、并且對培養中的細胞起到某些保護作用。因此，血清作為細胞凍存液的一種成分，廣泛受到大家的喜愛。但是由于血清的使用是存在一定的批次性，并且，血清的使用并不能滿足如胚胎干細胞，間充質干細胞等細胞的凍存。其存在會對細胞具有一定的誘導性。因此，進一步研究一種無血清、耗時短、易制備的細胞凍存液十分必要。

發明內容

本發明要解決的技術問題是克服現有技術的缺陷，提供一種新型無血清細胞凍存液配方。

為了解決上述技術問題，本發明提供了如下的技術方案：

本發明一種新型無血清細胞凍存液配方，其組成包括以人血清白蛋白為主體，添加10％的DMSO、13.3％的復方電解質注射液和16.70％的右旋糖苷。

作為本發明的一種優選技術方案，所述DMSO、復方電解質注射液、右旋糖苷這三種物質作為添加劑。

作為本發明的一種優選技術方案，所述DMSO的濃度范圍在8％-10％，復方電解質注射液的度范圍在13-50％，右旋糖苷的度范圍在10-60％。

作為本發明的一種優選技術方案，所述DMSO、復方電解質注射液和右旋糖苷的濃度比為(0.8-1)：(1.3-5)∶(1-6)。

作為本發明的一種優選技術方案，所述DMSO、復方電解質注射液、右旋糖苷的濃度比為1：1.33：1.67。

作為本發明的一種優選技術方案，所述DMSO的為濃度10％為最優選擇；復方電解質注射液的濃度13.3％的為最優選擇，右旋糖苷的濃度16.7％為最優選擇。

與現有技術相比，本發明的有益效果如下：

本發明通過優化凍存液配方，顯著提高了細胞的存活率，降低了污染源，提供了新型無血清細胞凍存液,易制備、易保存、復蘇后的細胞活性極高且避免了血清存在的潛在危險。

附圖說明

圖1為實施例1、對比例1-3的細胞復蘇活率數據結果圖；

圖2為實施例、對比例1-3的細胞復蘇活率細胞結果圖及培養三天后的細胞數；

圖3為實施例、對比例1-3細胞的增殖狀態變化。

具體實施方式

以下本發明的優選實施例進行說明，應當理解，此處所描述的優選實施例僅用于說明和解釋本發明，并不用于限定本發明。

實施例1