[發明專利]一種酶生物傳感器及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 202210154628.1
• 申請日: 2022-02-21
• 公開（公告）號: CN114636738B
• 公開（公告）日: 2023-01-06
• 發明（設計）人: 樸金花;閆彩云
• 申請（專利權）人: 華南理工大學
• 主分類號: G01N27/26
• 分類號: G01N27/26;G01N27/30;G01N27/327
• 代理公司: 廣州嘉權專利商標事務所有限公司 44205
• 代理人: 齊鍵

1.一種酶生物傳感器的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

1) 將基底電極浸入鍍金液中進行電沉積，得到納米多孔金修飾的基底電極；

2) 將納米多孔金修飾的基底電極浸入硫辛酸溶液中進行自組裝，得到自組裝膜修飾的基底電極；

3) 將自組裝膜修飾的基底電極浸入含1-乙基-3-(3-二甲氨丙基)碳二亞胺鹽酸鹽和N-羥基琥珀酰亞胺的溶液中進行活化，得到活化的基底電極；

4) 將含甘油激酶、甘油三磷酸氧化酶和殼聚糖的溶液涂覆在活化的基底電極表面，干燥，得到酶修飾的基底電極；

5) 將酶修飾的基底電極、參比電極和對電極組成三電極體系，即得酶生物傳感器；

步驟1）所述鍍金液為HAuCl₄-H₂SO₄溶液，HAuCl₄的濃度為1mmol/L～100mmol/L，H₂SO₄的濃度為1mol/L～5mol/L；

步驟1）所述電沉積采用恒電位法，沉積電壓為-1V～-4V，沉積時間為10s～90s；

所述酶生物傳感器為由酶修飾的基底電極、參比電極和對電極組成的三電極體系；所述酶修飾的基底電極的組成包括依次設置的基底電極、納米多孔金修飾層、活化的硫辛酸自組裝膜層和酶修飾層；所述酶修飾層的組成包括甘油激酶、甘油三磷酸氧化酶和殼聚糖；所述活化的硫辛酸自組裝膜層由硫辛酸自組裝膜經過1-乙基-3-(3-二甲氨丙基)碳二亞胺鹽酸鹽和N-羥基琥珀酰亞胺活化制成。

2.根據權利要求1所述的酶生物傳感器的制備方法，其特征在于：所述參比電極為飽和甘汞電極；所述對電極為鉑電極；所述基底電極為金盤電極。

3.根據權利要求1所述的酶生物傳感器的制備方法，其特征在于：步驟2）所述自組裝的時間為1h～5h。

4.根據權利要求1所述的酶生物傳感器的制備方法，其特征在于：步驟3）所述含1-乙基-3-(3-二甲氨丙基)碳二亞胺鹽酸鹽和N-羥基琥珀酰亞胺的溶液中1-乙基-3-(3-二甲氨丙基)碳二亞胺鹽酸鹽、N-羥基琥珀酰亞胺的摩爾比為2.8～3.2:1。

5.根據權利要求1、3和4中任意一項所述的酶生物傳感器的制備方法，其特征在于：步驟3）所述活化的時間為40min～80min。

6.權利要求1～5中任意一項所述的制備方法制得的酶生物傳感器在甘油檢測中的應用。