[發(fā)明專利]一種空心磁性磷酸鈣細(xì)胞微載體及其制備方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202210153116.3
• 申請日: 2022-02-18
• 公開（公告）號: CN114395521A
• 公開（公告）日: 2022-04-26
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 肖東琴;李立斯;李小龍;匙峰;楊在君;羅栩偉
• 申請（專利權(quán)）人: 南充市中心醫(yī)院
• 主分類號: C12N5/00
• 分類號: C12N5/00
• 代理公司: 成都正德明志知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 51360
• 代理人: 楊木梅

本發(fā)明提供了一種空心磁性磷酸鈣細(xì)胞微載體及其制備方法，該制備方法包括以下步驟：向鈣鹽溶液中加入有機(jī)模板劑，得改性鈣鹽溶液，將改性鈣鹽溶液和磷酸鹽溶液混合，得乳濁液，依次向乳濁液中加入尿素和鹽酸，調(diào)節(jié)乳濁液為透明溶液，然后對體系進(jìn)行水熱反應(yīng)，冷卻后收集沉淀、洗滌，制得磷酸鈣微球；將磷酸鈣粉體加水溶解，得磷酸鈣溶液，然后向其中加入四氧化三鐵粉末，超聲分散處理，最后水熱反應(yīng)，制得。該磁性磷酸鈣微球可用作細(xì)胞微載體用于骨微組織構(gòu)建，同時(shí)有利于微組織的高效組裝，可有效解決現(xiàn)有支架材料存在的細(xì)胞分布不均勻的問題。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于醫(yī)療材料技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種空心磁性磷酸鈣細(xì)胞微載體及其制備方法。

背景技術(shù)

近年來，自下而上的組織工程方法逐漸興起，即從微納米尺度上進(jìn)行模塊組織結(jié)構(gòu)與功能的仿生設(shè)計(jì)，通過制備微載體與細(xì)胞復(fù)合，構(gòu)建模塊化組織，再進(jìn)一步組裝實(shí)現(xiàn)大塊組織的功能重建。微載體一方面作為細(xì)胞生長的載體，能夠加速細(xì)胞擴(kuò)增，從而減少來源于病人的細(xì)胞數(shù)量；另一方面，微載體的表面結(jié)構(gòu)、硬度及化學(xué)性質(zhì)等對細(xì)胞表型均有重要影響。因此，根據(jù)不同組織的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)，選擇適用于模塊單元組裝成型的生物材料是自下而上組織工程研究面臨的主要問題。磷酸鈣作為人體硬組織的主要無機(jī)成分，因具有良好的生物相容性和生物活性，被廣泛應(yīng)用于骨缺損修復(fù)，而具有納米結(jié)構(gòu)的磷酸鈣微球在藥物釋放、功能吸附和骨缺損填充等領(lǐng)域具有廣闊的應(yīng)用前景。但是卻極少研究開發(fā)針對硬組織修復(fù)的磷酸鈣微載體材料。影響自下而上組織工程構(gòu)建的另一個(gè)主要問題是如何將具有特定結(jié)構(gòu)的模塊單元組裝成為宏觀組織工程復(fù)合體。鑒于磁性顆粒在外界磁場作用下，能夠?qū)崿F(xiàn)顆粒在空間的準(zhǔn)確定位和高效富集，制備磁性磷酸鈣微載體，有望實(shí)現(xiàn)對模塊單元的高效組裝。

發(fā)明內(nèi)容

針對現(xiàn)有技術(shù)中存在的上述問題，本發(fā)明提供一種空心磁性磷酸鈣細(xì)胞微載體及其制備方法，該空心磁性磷酸鈣細(xì)胞微載體可有效解決現(xiàn)有支架材料存在的細(xì)胞分布不均勻的問題。

為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明解決其技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案是：

一種空心磁性磷酸鈣細(xì)胞微載體的制備方法，包括以下步驟：

(1)向鈣鹽溶液中加入有機(jī)模板劑，得改性鈣鹽溶液，將改性鈣鹽溶液和磷酸鹽溶液混合，得乳濁液，依次向乳濁液中加入尿素和鹽酸，調(diào)節(jié)乳濁液為透明溶液，然后對體系進(jìn)行水熱處理，冷卻后收集沉淀、洗滌，制得磷酸鈣微球；

(2)將步驟(1)中的磷酸鈣粉體和四氧化三鐵粉末超聲分散于水中，然后進(jìn)行水熱反應(yīng)，制得。

進(jìn)一步地，步驟(1)中鈣鹽為氯化鈣，磷酸鹽為磷酸氫二鈉，有機(jī)模板劑為EDTA、植酸或環(huán)己烷六羧酸。

進(jìn)一步地，步驟(1)尿素添加量等于鈣鹽的使用量，有機(jī)模板劑在鈣鹽溶液中的濃度為16-18g/L。

進(jìn)一步地，步驟(1)中體系于160-200℃條件下反應(yīng)4-7h。

進(jìn)一步地，步驟(2)中磷酸鈣粉體與四氧化三鐵的質(zhì)量比為0.9-1.0:0.04-0.06。

進(jìn)一步地，步驟(2)中于160-200℃條件下反應(yīng)20-28h。

進(jìn)一步地，步驟(2)四氧化三鐵粉末通過如下方法制得：將二價(jià)鐵鹽和三價(jià)鐵鹽溶解于水中，得含鐵溶液，于含鐵溶液表層滴加無毒有機(jī)溶劑，然后調(diào)節(jié)含鐵溶液pH值為堿性，再對溶液進(jìn)行水熱處理，冷卻后收集沉淀、洗滌、干燥，得四氧化三鐵粉體。

進(jìn)一步地，無毒有機(jī)溶劑為松節(jié)油。

進(jìn)一步地，二價(jià)鐵鹽和三價(jià)鐵鹽分別為FeCl₂·4H₂O和FeCl₃·6H₂O，含鐵溶液中二價(jià)鐵離子與三價(jià)鐵離子的摩爾比為1:1.5-2。

進(jìn)一步地，調(diào)節(jié)含鐵溶液pH值為10-11，然后于110-130℃條件下反應(yīng)18-24h，制得。