[發明專利]一種鼠抗MPT32蛋白雜交瘤細胞株13B12、基于其的單克隆抗體及其應用

有效

• 申請號: 202210152434.8
• 申請日: 2022-02-18
• 公開（公告）號: CN114591427B
• 公開（公告）日: 2023-01-31
• 發明（設計）人: 胡雪姣;顧兵;李靖;孫萬陽;何皓;孟玥;肖云菊;凌勇;周典蓉;劉偉江;廖建楓;李智椋;翟文康
• 申請（專利權）人: 深圳市光與生物科技有限公司;廣東省人民醫院
• 主分類號: C07K16/12
• 分類號: C07K16/12;C07K16/18;C12N15/13;G01N33/577;G01N33/569;G01N33/68
• 代理公司: 廣州三環專利商標代理有限公司 44202
• 代理人: 徐李娜

本發明提供一種鼠抗MPT32蛋白雜交瘤細胞株13B12、基于其的單克隆抗體及其應用。該鼠抗MPT32蛋白雜交瘤細胞株13B12，于2022年1月9日保藏于中國典型培養物保藏中心，保藏編號為CCTCC NO:C2021305。該細胞株分泌的鼠抗MPT32蛋白單克隆抗體與MPT32蛋白反應效價高，使得鼠抗MPT32蛋白單克隆抗體適合作為免疫診斷試劑以用于MPT32蛋白抗原的體外診斷。利用該鼠抗MPT32蛋白單克隆抗體制備得到用于檢測MPT32蛋白的試劑盒或微流體芯片，能夠有效識別臨床樣本中的MPT32蛋白，并且具有較高的特異性，檢測靈敏度高。本發明提供的鼠抗MPT32蛋白單克隆抗體為結核病的體外診斷試劑提供了關鍵的原材料，以該單克隆抗體為原料開發的檢測試劑盒或微流體芯片具備良好的臨床應用價值。

技術領域

本發明涉及抗體制備技術領域，具體涉及一種鼠抗MPT32蛋白雜交瘤細胞株13B12、基于其的單克隆抗體及其應用。

背景技術

結核病是由結核桿菌感染引起的慢性傳染病，仍是當今全球范圍內對人類最具威脅性的感染性疾病之一。結核病的病原體是結核分枝桿菌，簡稱結合桿菌。1882年，德國細菌學家郭霍首先發現并證明了結核分枝桿菌是結核病的病原菌。該病原菌可侵入人體全身各種組織器官，但主要侵犯肺臟，因此結核病也稱被為肺結核病。結核病嚴重影響人類的健康和生命，人類與之已經進行了幾個世紀的斗爭。隨著抗結核藥物的不斷發展和衛生生活狀況的改善，結核病的發病率和死亡率曾出現大幅度下降。20世紀90年代以來，由于艾滋病和結核分枝桿菌耐藥菌株的出現、免疫抑制劑的應用、吸毒、貧困及人口流動等因素，全球范圍內結核病的疫情驟然惡化。目前，結核病成為首要的再現傳染病，也成為了全球尤其是發展中國家最為嚴重的全球性衛生問題。全世界約有1/3的人感染結核分枝桿菌，每年有900萬的新病例出現，有200萬人死于該疾病。

早期發現和早期診斷結核病病人，及時給予有效的治療，是降低結核病發病率，減少傳播機會、控制結核病疫情的關鍵環節。目前結核病的主要實驗診斷手段包括結核菌素試驗、結核菌γ干擾素釋放試驗、直接涂片鏡檢、分離培養、動物試驗等。然而，這些檢測方法均存在耗時長、檢測靈敏性低、特異性不高、成本高和操作復雜等問題。

感染結核桿菌后，在感染階段如結核桿菌的生長階段會釋放或分泌MPT32蛋白，并且MPT32蛋白的免疫原性強。由此可見，MPT32蛋白可作為結核桿菌診斷的特異性診斷靶點，因此亟需一種以MPT32蛋白為靶點的抗體為體外診斷試劑提供關鍵原材料。

發明內容

本發明的目的在于提供一種鼠抗MPT32蛋白雜交瘤細胞株13B12、基于其的單克隆抗體及其應用，該鼠抗MPT32蛋白雜交瘤細胞株13B12分泌的鼠抗MPT32蛋白單克隆抗體能夠與MPT32蛋白特異性結合，能夠特異性檢測MPT32蛋白，為結核病的體外診斷試劑提供了關鍵的原材料。

根據本發明的第一個方面，提供一種鼠抗MPT32蛋白雜交瘤細胞株13B12，該雜交瘤細胞株于2022年1月9日保藏于中國典型培養物保藏中心，保藏編號為CCTCC NO:C2021305。

根據本發明的第二個方面，提供一種鼠抗MPT32蛋白單克隆抗體，該單克隆抗體由上述鼠抗MPT32蛋白雜交瘤細胞株13B12分泌產生。

優選地，上述鼠抗MPT32蛋白單克隆抗體包括輕鏈可變區和重鏈可變區，輕鏈可變區的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示，重鏈可變區的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。

SEQ ID NO:1

DIVMTQTPLTLSVTIGQPASISCKSSQSLLDSDGKTYLNWLLQRPGQSPKRLIYLVSKLGSGVPDRFTGSGSGTDFTLKINRVEAEDLGVYYCWQGTHLPRTFGGGTKLEIK

SEQ ID NO:2