[發明專利]無血清培養基及其制備方法和用其培養2BS細胞的方法

有效

• 申請號: 202210151336.2
• 申請日: 2022-02-17
• 公開（公告）號: CN114540274B
• 公開（公告）日: 2023-10-20
• 發明（設計）人: 趙志欣;孫建萍;張業炘;蔡仕君
• 申請（專利權）人: 上海健士拜生物科技有限公司;澳斯康生物（南通）股份有限公司;甘肅健順生物科技有限公司;健順生物科技（南通）有限公司
• 主分類號: C12N5/071
• 分類號: C12N5/071
• 代理公司: 華進聯合專利商標代理有限公司 44224
• 代理人: 王秉麗

本發明提供一種無血清培養基及其制備方法和用其培養2BS細胞的方法。該無血清培養基包含水以及氨基酸、維生素、鹽類、脂類、微量元素和其他添加成分。采用該無血清培養基培養2BS細胞，能突破2BS細胞傳代極限、增加2BS細胞傳代的代次。并且，發明人還發現，所得2BS細胞形態更好、生長密度更高、活率高。同時，本發明提供的無血清培養基配方成分明確，配方簡單，低成本，低蛋白，易于配制，利于2BS細胞后續生產病毒的下游純化，提高產品品質。本發明提供的無血清培養基，適用范圍廣，不僅適用于細胞工廠、微載體工藝上的無血清傳代、擴增和放大，還可支持傳統培養基中10％血清用量的2BS細胞在低血清或無血清條件下生產疫苗。

技術領域

本發明涉及細胞培養技術領域，更具體地說，尤其涉及一種無血清培養基及其制備方法和用其培養2BS細胞的方法。

背景技術

2BS細胞株(人胚肺細胞、二倍體細胞)是世界衛生組織推薦的可以用于人用疫苗生產的標準人二倍體細胞株，其免疫原性好，具有良好的耐受性，無異種移植致癌性，無外源因子污染，可規模化生產多種病毒性疫苗。到目前為止，使用2BS細胞制備的疫苗已被廣泛使用，如人狂犬疫苗、麻疹病毒疫苗、腮腺炎病毒疫苗、甲肝病毒疫苗、脊髓灰質炎病毒疫苗、風疹病毒疫苗等。

傳統的2BS細胞株均采用貼壁培養，貼壁培養所采用的培養基為基礎培養基添加高比例血清或者人血白蛋白得到的培養液。但是，血清及人血白蛋白成分不明、價格昂貴、批次穩定性差、來源困難，并且存在可能引入外源污染的風險。而無血清培養既可以降低產品成本，又可以降低人為引入的外源污染風險，保證了終產品的質量和安全性，已成為包括疫苗在內的生物技術藥物生產的總趨勢。傳統的無血清培養基例如CN 106754634 A公開的無血清培養基。

然而人們逐漸意識到，2BS細胞具有一個普遍的缺陷，采用傳統的無血清培養基對2BS細胞進行培養的過程中，其生命周期及使用代次是非常有限的，這也使得該細胞資源彌足珍貴。因此，如何延長2BS細胞的生命代次，是亟待解決的技術問題。

發明內容

基于上述技術問題，本發明的目的之一是提供一種無血清培養基，采用該無血清培養基培養2BS細胞，能突破2BS細胞傳代極限、增加2BS細胞傳代的代次。

本發明的目的可以通過以下技術方案實現：