[發明專利]一種具有緩解壓力和改善睡眠功能的益生菌

在審

• 申請號: 202210142163.8
• 申請日: 2022-02-16
• 公開（公告）號: CN115521883A
• 公開（公告）日: 2022-12-27
• 發明（設計）人: 花鐵果;金庭飛;莫靜;黎旭;張文朋;魏俊斌;孫姣
• 申請（專利權）人: 廣東益可維生物技術有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N1/04;A23L33/135;A61K35/747;A61P25/20;A61P25/00;C12R1/01;C12R1/25;C12R1/23;A61K35/741
• 代理公司: 北京子焱知識產權代理事務所(普通合伙) 11932
• 代理人: 王倩

1.一種具有緩解壓力和改善睡眠功能的益生菌的制備方法，其特征在于，包括以下步驟，所述份數均為重量份：

步驟1、將10～18份蛋白胨、5～10份葡萄糖、3-7份檸檬酸氫二銨、6～10份磷酸氫二鉀、3～6份羧甲基淀粉鈉、1～3份硫酸鎂、4～8份麥芽糊精、1～3份甜味劑和70～100份水混合，混合均勻后采用20～40wt％酸度調節劑調節pH值為6.2～6.8，配制成混合溶液，將混合溶液在800～900W超聲功率下超聲處理10～20min，向混合溶液中加入25～40份功能濾液，攪拌混合均勻，然后進行預處理，得到培養基；

步驟2、將5～8份動物雙歧桿菌、10～15份植物乳桿菌和3～6份嗜酸乳桿菌，接種到70～90份步驟1制備的培養基中進行混合培養，先在35～37℃下培養4～8h，再在37～40℃下厭氧培養10～15h，得到培養液；

步驟3、將40～60份步驟2制備的培養液在8000～12000r/min離心分離20～30min，分離后收集菌泥，將菌泥加入緩沖液中，控制緩沖液的量，調整菌數到4×10⁹～6×10⁹CFU/mL，制備成菌泥溶液；然后將菌泥溶液在10000～13000r/min離心分離20～40min，再次收集菌泥；在菌泥中添加保護劑，添加量為菌泥量重量的1～2倍；然后進行冷凍干燥，即得到緩解壓力和改善睡眠功能的益生菌。

2.根據權利要求1所述的一種具有緩解壓力和改善睡眠功能的益生菌的制備方法，其特征在于：所述步驟1中的甜味劑為甜菜糖、白砂糖、麥芽糖、葡萄糖、果糖、乳糖和阿斯巴甜中的一種或兩種及兩種以上組合而成。

3.根據權利要求1所述的一種具有緩解壓力和改善睡眠功能的益生菌的制備方法，其特征在于，所述步驟1中的酸度調節劑為檸檬酸鈉和三聚磷酸鈉中的一種或兩種。

4.根據權利要求1所述的一種具有緩解壓力和改善睡眠功能的益生菌的制備方法，其特征在于，所述步驟1中的功能濾液的制備步驟如下，所述份數均為重量份：

S1、將15～25份大馬士革玫瑰、10～20份藏紅花、5～10份毛葉藜蘆采用水進行清洗2～3遍，后置于50～70℃烘干3～4h；然后研磨成粉末，過50～200目篩，得到大馬士革玫瑰粉、藏紅花粉、毛葉藜蘆粉，混合均勻，制備成混合粉料；

S2、將25～35份混合粉料加入200～400份85～95wt％的乙醇水溶液中混合，在80～90℃下回流提取2～3次，每次回流時間2～3h，回流結束后將提取液用200～400目濾布過濾，在40～50℃下蒸發除去溶劑，然后加入50～100份水，得功能濾液。

5.根據權利要求1所述的一種具有緩解壓力和改善睡眠功能的益生菌的制備方法，其特征在于：所述步驟1的預處理是指均質、殺菌及冷卻工藝；所述均質的溫度為60～70℃，均質的壓力為22～35MPa；所述殺菌的溫度為90～97℃，殺菌的時間為5～120min；所述冷卻工藝為在室溫下冷卻至20～28℃。

6.根據權利要求1所述的一種具有緩解壓力和改善睡眠功能的益生菌的制備方法，其特征在于：所述步驟3中緩沖液為1～3wt％醋酸鈉水溶液和6～8wt％醋酸水溶液按照質量比1：1混合而成。

7.根據權利要求1所述的一種具有緩解壓力和改善睡眠功能的益生菌的制備方法，其特征在于，所述步驟3中冷凍干燥參數如下：在-42～-50℃的條件下預凍3～5h，凍結后進行抽真空干燥，干燥條件為：真空度為2～5Pa，干燥溫度為-40℃逐步升溫至26℃，干燥時間40～50h。

8.根據權利要求1所述的一種具有緩解壓力和改善睡眠功能的益生菌的制備方法，其特征在于：所述步驟3中保護劑為脫脂乳、蔗糖、海藻糖、麥芽糊精、蛋白胨、明膠中的一種或兩種及兩種以上組合而成。

9.一種具有緩解壓力和改善睡眠功能的益生菌，其特征在于：采用如權利要求1～8任一項所述的一種具有緩解壓力和改善睡眠功能的益生菌的制備方法制備而成。