[發明專利]一種鼠單抗包被的磁珠、制備方法及測定高敏心肌肌鈣蛋白Ⅰ的試劑盒

在審

• 申請號: 202210134207.2
• 申請日: 2022-02-14
• 公開（公告）號: CN114487442A
• 公開（公告）日: 2022-05-13
• 發明（設計）人: 肖平凡;方麗
• 申請（專利權）人: 四川沃文特生物技術有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/577;G01N33/543;G01N33/535
• 代理公司: 成都行之智信知識產權代理有限公司 51256
• 代理人: 李林

1.一種鼠單抗包被的磁珠，其特征在于，為混合磁珠，所述混合磁珠采用兩種針對不同cTnI抗原表位的鼠抗人cTnI單克隆抗體包被的磁珠，用于制備測定高敏心肌肌鈣蛋白Ⅰ的試劑盒。

2.一種鼠單抗包被的磁珠的制備方法，包括以下步驟：將鼠抗人cTnI單克隆抗體經稀釋、生物素標記后進行裸磁珠包被，獲得鼠抗人cTnI單克隆抗體包被的磁珠，其特征在于，

稀釋濃度為0.1mg/mL～0.6mg/mL；

采用兩種針對不同cTnI抗原表位的鼠抗人cTnI單克隆抗體，制備獲得兩種鼠抗人cTnI單克隆抗體包被的磁珠，將兩種磁珠混合用于制備用于測定高敏心肌肌鈣蛋白Ⅰ的試劑盒。

3.根據權利要求2所述的一種鼠單抗包被的磁珠的制備方法，其特征在于，生物素標記采用如下方法：采用PBS透析液對鼠抗人cTnI單克隆抗體進行透析，將透析后的鼠抗人cTnI單克隆抗體與交聯劑BNHS反應，獲得生物素抗體；采用PBS透析液對生物素抗體進行透析；向透析后的生物素抗體加入丙三醇保存。

4.根據權利要求2所述的一種鼠單抗包被的磁珠的制備方法，其特征在于，包被采用如下方法：將生物素標記后的鼠抗人cTnI單克隆抗體按相應的的包被量去包被鏈霉親和素磁珠；用0.08～0.12％BSA的緩沖液將鼠抗人cTnI單克隆抗體包被的磁珠稀釋到設定濃度。

5.一種用于測定高敏心肌肌鈣蛋白Ⅰ的試劑盒，其特征在于，包括混合磁珠，所述混合磁珠采用兩種針對不同cTnI抗原表位的鼠抗人cTnI單克隆抗體包被的磁珠。

6.根據權利要求5所述的一種用于測定高敏心肌肌鈣蛋白Ⅰ的試劑盒，其特征在于，還包括酶工作液和分析緩沖液。

7.根據權利要求5所述的一種用于測定高敏心肌肌鈣蛋白Ⅰ的試劑盒，其特征在于，所述分析緩沖液采用小牛血清稀釋液，所述酶工作液采用羊抗人cTnI單克隆抗體標記的酶工作液。

8.根據權利要求6或7所述的一種用于測定高敏心肌肌鈣蛋白Ⅰ的試劑盒，其特征在于，所述混合磁珠、酶工作液和分析緩沖液的體積比為1:1:1。

9.根據權利要求7所述的一種用于測定高敏心肌肌鈣蛋白Ⅰ的試劑盒，其特征在于，所述羊抗人cTnI單克隆抗體標記的酶工作液采用兩種針對cTnI不同表位的堿性磷酸酶標記的抗cTnI羊單克隆抗體制備獲得。

10.根據權利要求9所述的一種用于測定高敏心肌肌鈣蛋白Ⅰ的試劑盒，其特征在于，所述羊抗人cTnI單克隆抗體標記的酶工作液制備方法包括：用兩種針對cTnI不同表位的堿性磷酸酶標記的抗cTnI羊單克隆抗體，按質量1:1混合后，稀釋到設定濃度。