[發明專利]一種地錢聯芐和二氫查爾酮糖基轉移酶編碼基因及其應用在審
| 申請號: | 202210133727.1 | 申請日: | 2022-02-14 |
| 公開(公告)號: | CN114457053A | 公開(公告)日: | 2022-05-10 |
| 發明(設計)人: | 程愛霞;熊睿琳;張教真;朱婷婷;婁紅祥 | 申請(專利權)人: | 山東大學 |
| 主分類號: | C12N9/10 | 分類號: | C12N9/10;C12N15/54;C12N15/70;C12N1/21;C12P19/44;C12R1/19 |
| 代理公司: | 濟南圣達知識產權代理有限公司 37221 | 代理人: | 李箏 |
| 地址: | 250061 山*** | 國省代碼: | 山東;37 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 種地 錢聯芐 二氫查爾酮 糖基轉移酶 編碼 基因 及其 應用 | ||
1.SEQ ID No.1所示序列的蛋白作為糖基轉移酶的應用。
2.如權利要求1所述蛋白作為糖基轉移酶的應用,其特征在于,SEQ ID No.1所示蛋白的獲取方式包括提取分離方式、基因工程表達或化學合成方式。
3.如權利要求1所述蛋白作為糖基轉移酶的應用,其特征在于,所述蛋白作為糖基轉移酶的應用包括以下任意一個方面:
(1)催化聯芐類、二氫查爾酮類、苯丙素類化合物糖苷化;
(2)制備聯芐糖苷類、二氫查爾酮糖苷類和苯丙素糖苷類化合物。
4.如權利要求3所述蛋白作為糖基轉移酶的應用,其特征在于,所述糖基轉移酶MpUGT737B1應用于聯芐類、二氫查爾酮類及苯丙素類化合物的催化。
5.如權利要求4所述蛋白作為糖基轉移酶的應用,其特征在于,所述聯芐類化合物為二氫白藜蘆醇或半月苔素;
或,所述二氫查爾酮類化合物為根皮素;
或,所述苯丙素類化合物為咖啡醛、松柏醇、松柏醛、5-OH松柏醛或芥子醛。
6.如權利要求3所述蛋白作為糖基轉移酶的應用,其特征在于,所述(1)方面的應用中,所述糖苷類化合物的催化反應方式如下:將糖苷轉移酶與底物加入緩沖液中反應,加入乙酸乙酯終止反應。
7.如權利要求6所述蛋白作為糖基轉移酶的應用,其特征在于,所述催化反應溫度為25~35℃;所述反應時間為酶加入后8~12min。
8.如權利要求3所述蛋白作為糖基轉移酶的應用,其特征在于,所述(2)方面的應用中,催化方式為通過表達糖基轉移酶MpUGT737B1的微生物體內飼喂底物進行產物合成,步驟如下:
向表達糖基轉移酶MpUGT737B1的菌株中加入濃度為80~120μM的底物,并放在15~20℃培養16~20h后加入乙酸乙酯終止反應。
9.編碼糖基轉移酶MpUGT737B1的基因,其特征在于,所述基因的核苷酸序列如下:
(1)所述核苷酸序列具有SEQ ID No.2所示序列;
(2)由于密碼子簡并性能夠翻譯得到SEQ ID No.1所示氨基酸序列的核酸序列;
(3)SEQ ID No.2所示序列的互補序列。
10.包含權利要求9所述基因的開放閱讀框、重組載體、重組細胞、轉化體或工程菌。
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