[發(fā)明專利]基于F12基因甲基化的肝癌早期檢測

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• 申請日: 2022-02-11
• 公開（公告）號(hào): CN114438211A
• 公開（公告）日: 2022-05-06
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李德強(qiáng);張茜;陳卓君;黃龍妹;呂寧;陳一友
• 申請（專利權(quán)）人: 杭州諾輝健康科技有限公司
• 主分類號(hào): C12Q1/6886
• 分類號(hào): C12Q1/6886;C12Q1/6851;C12N15/11
• 代理公司: 北京坤瑞律師事務(wù)所 11494
• 代理人: 封新琴

1.一種用于肝癌檢測的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包含核酸甲基化檢測試劑，所述核酸甲基化檢測試劑檢測的甲基化基因包含F(xiàn)12(Coagulation factor XII)基因。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述核酸甲基化檢測試劑為血漿游離核酸甲基化檢測試劑，且所述F12基因是由F12基因產(chǎn)生的血漿游離核酸。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的試劑盒，其特征在于，在對(duì)甲基化基因進(jìn)行檢測之前，將核酸進(jìn)行亞硫酸鹽轉(zhuǎn)化。

4.根據(jù)權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述的試劑盒，其特征在于，所述F12基因甲基化檢測試劑所檢測的甲基化序列區(qū)段包含與SEQ ID NO:4序列有至少80％，至少85％，至少90％，至少95％，至少96％，至少97％，至少98％，至少99％，至少99.5％，或100％相同性的序列。

5.根據(jù)權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述的試劑盒，其特征在于，所述F12基因甲基化檢測試劑包含至少一個(gè)正向引物，至少一個(gè)反向引物，和/或至少一個(gè)探針。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的試劑盒，其特征在于，所述至少一個(gè)探針包含選自含SEQ IDNO:3,13-15任一個(gè)的探針。

7.根據(jù)權(quán)利要求5或6所述的試劑盒，其特征在于，所述至少一個(gè)正向引物和/或至少一個(gè)反向引物包含選自含SEQ ID NO:1-2,7-12任一個(gè)的引物。

8.根據(jù)權(quán)利要求1-7任一項(xiàng)所述的試劑盒，其特征在于，所述F12基因甲基化檢測試劑包含選自含SEQ ID NO:7-9任一個(gè)的正向引物，選自含SEQ ID NO:10-12任一個(gè)的反向引物，和/或選自含SEQ ID NO:13-15任一個(gè)的探針。

9.根據(jù)權(quán)利要求1-8任一項(xiàng)所述的試劑盒，其特征在于，所述F12基因甲基化檢測試劑包含引物探針組合1：含SEQ ID NO:7的正向引物，含SEQ ID NO:10的反向引物，和含SEQ IDNO:13的探針。

10.根據(jù)權(quán)利要求1-8任一項(xiàng)所述的試劑盒，其特征在于，所述F12基因甲基化檢測試劑包含引物探針組合2：含SEQ ID NO:8的正向引物，含SEQ ID NO:11的反向引物，和含SEQ IDNO:14的探針。

11.根據(jù)權(quán)利要求1-8任一項(xiàng)所述的試劑盒，其特征在于，所述F12基因甲基化檢測試劑包含引物探針組合3：含SEQ ID NO:9的正向引物，含SEQ ID NO:12的反向引物，和含SEQ IDNO:15的探針。

12.根據(jù)權(quán)利要求1-7任一項(xiàng)所述的試劑盒，其特征在于，所述F12基因甲基化檢測試劑包含引物探針組合4：含SEQ ID NO:1的正向引物，含SEQ ID NO:2的反向引物，和含SEQ IDNO:3的探針。

13.根據(jù)權(quán)利要求2-12任一項(xiàng)所述的試劑盒，其特征在于，所述血漿游離核酸為血漿游離DNA。

14.根據(jù)權(quán)利要求1-13任一項(xiàng)所述的試劑盒，其特征在于，用B2M基因作為內(nèi)參基因。

15.根據(jù)權(quán)利要求1-14任一項(xiàng)所述的試劑盒，其特征在于，所述肝癌為早期肝癌。

16.根據(jù)權(quán)利要求2-15任一項(xiàng)所述的試劑盒，其特征在于，還包含游離核酸提取試劑，所述游離核酸提取試劑通過磁珠法提取并純化血漿游離核酸。

17.一種檢測肝癌的方法，其特征在于，所述方法包含對(duì)樣本中F12基因甲基化的檢測。