[發明專利]再生蛋白REG1A單克隆抗體及其應用

在審

• 申請號: 202210122652.7
• 申請日: 2022-02-09
• 公開（公告）號: CN114395040A
• 公開（公告）日: 2022-04-26
• 發明（設計）人: 李玲;金亮;王慧;劉得辰;李國慶;黃楠
• 申請（專利權）人: 東南大學附屬中大醫院
• 主分類號: C07K16/18
• 分類號: C07K16/18;C12N15/13;G01N33/577;G01N33/68
• 代理公司: 南京艾普利德知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 32297
• 代理人: 周海斌

本發明涉及再生蛋白REG1A單克隆抗體及其應用。該抗體包括重鏈和輕鏈，至少具有以下技術特征之一：i、重鏈包括重鏈CDR1，序列為VKQSH；ii、重鏈包括重鏈CDR2，序列為GGNVYNQKFKIKATLT；iii、重鏈包括重鏈CDR3，序列為PGTGYFDV；iv、輕鏈包括輕鏈CDR1，序列為RASQDISNYLN；v、輕鏈包括輕鏈CDR2，序列為YTSRLHS；vi、輕鏈包括輕鏈CDR3，序列為QQGHTLPRT。本發明的再生蛋白REG1A單克隆抗體能夠有效檢測再生蛋白REG1A水平，從而可以用以輔助診斷和治療，以及預測疾病的發生和發展。

技術領域

本發明涉及一種再生蛋白REG1A單克隆抗體及其應用，屬于生物醫藥技術領域。

背景技術

再生基因(regenerating gene,Reg)是從再生胰島中分離出來的一種基因，近年來，越來越多的研究表明再生基因家族蛋白的異常表達與炎癥反應及腫瘤等多種疾病密切相關。其中再生蛋白(REG1)最早在大鼠再生胰島中發現，后被證實與一種能夠抑制胰腺結石形成的胰石蛋白(PSP)為同一種蛋白質，統稱為PSP/reg。REG1A位于2p12染色體上，編碼166個氨基酸，屬于鈣依賴性凝集素超家族。REG1A蛋白主要由胰腺腺泡細胞合成、分泌，是胰腺外分泌產物，生理狀態下REG1A以可溶性形式主要分布于胰腺、消化道組織、胰液及血液中。REG1A具有促進增殖，誘導再生等作用，主要參與炎癥、糖尿病、胰腺炎、腫瘤等疾病的發生。已有多項研究表明，REG1A的水平變化與這些疾病的進展密切相關，其在疾病的早期診斷及治療中的作用越來越受到人們的重視。

經檢索發現，申請號CN202010856716.7、申請公布號CN111909266A的發明專利申請公開了及一種再生基因蛋白REG1A單克隆抗體的制備方法，包括以下步驟：⑴制備免疫接種的小鼠；⑵骨髓瘤細胞培養3-4天，得到培養后的小鼠骨髓瘤細胞；⑶將REG1A蛋白溶解向免疫接種的小鼠腹腔接種免疫，并且獲得脾細胞，經分散脾細胞得到脾細胞沉淀物；⑷培養后的小鼠骨髓瘤細胞離心得到骨髓瘤細胞沉淀物；⑸用DMEM高糖培養液分別懸浮脾細胞沉淀物、骨髓瘤細胞沉淀物并混合，經離心得到沉淀物；⑹沉淀物離心、懸浮，即得融合細胞；⑺將融合細胞進行培養、測定，確定雜交瘤細胞；⑻單抗的篩選分離；⑼大量制備單克隆抗體：將雜交瘤細胞系按常規方法進行單克隆抗體生產即得。然而，該技術方案并未能提供明確的單克隆抗體序列。

發明內容

本發明的主要目的是：克服現有技術存在的問題，提供一種再生蛋白REG1A單克隆抗體，能有效檢測血清和組織中的REG1A；同時還提供該抗體的應用。

本發明解決其技術問題的技術方案如下：

一種再生蛋白REG1A單克隆抗體，所述抗體包括重鏈和輕鏈，其特征是，所述抗體至少具有以下技術特征之一：

i、所述重鏈包括重鏈CDR1，其氨基酸序列為VKQSH；

ii、所述重鏈包括重鏈CDR2，其氨基酸序列為GGNVYNQKFKIKATLT；

iii、所述重鏈包括重鏈CDR3，其氨基酸序列為PGTGYFDV；

iv、所述輕鏈包括輕鏈CDR1，其氨基酸序列為RASQDISNYLN；

v、所述輕鏈包括輕鏈CDR2，其氨基酸序列為YTSRLHS；

vi、所述輕鏈包括輕鏈CDR3，其氨基酸序列為QQGHTLPRT。

優選地，所述抗體至少具有以下技術特征之一：

i、所述重鏈包括重鏈CDR1，其氨基酸序列為VKQSH；所述重鏈包括重鏈CDR2，其氨基酸序列為GGNVYNQKFKIKATLT；所述重鏈包括重鏈CDR3，其氨基酸序列為PGTGYFDV；