[發(fā)明專利]TET2作為靶標(biāo)在治療缺血性血管疾病中的應(yīng)用

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• 申請?zhí)枺?/td>: 202210121023.2
• 申請日: 2022-02-09
• 公開（公告）號: CN114404592A
• 公開（公告）日: 2022-04-29
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 孫愛軍;葛均波;洪文軒
• 申請（專利權(quán)）人: 復(fù)旦大學(xué)附屬中山醫(yī)院
• 主分類號: A61K45/00
• 分類號: A61K45/00;A61K31/7088;A61P9/10
• 代理公司: 上海申匯專利代理有限公司 31001
• 代理人: 翁若瑩

本發(fā)明公開了TET2作為靶標(biāo)在治療缺血性血管疾病中的應(yīng)用。本發(fā)明在細胞水平通過成管以及Transwell實驗，驗證了TET2在內(nèi)皮細胞成管以及侵襲中的作用。本發(fā)明在動物水平用內(nèi)皮細胞特異性TET2敲除鼠驗證了TET2在血流恢復(fù)中的作用，組織特異性敲除TET2可實現(xiàn)顯著改善下肢缺血模型中的血流恢復(fù)。本發(fā)明為臨床上治療缺血性血管疾病特別是外周動脈疾病尋找到了新的治療靶點，靶向內(nèi)皮細胞缺失TET2，有望實現(xiàn)缺血性血管疾病特別是外周動脈疾病的精準(zhǔn)治療。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及TET2作為靶標(biāo)在治療缺血性血管疾病中的應(yīng)用，屬于生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

在創(chuàng)傷愈合、肌肉和骨骼修復(fù)、缺氧和慢性缺血等情況下，血管生成對組織再生或修復(fù)至關(guān)重要。肢體缺血是最常見的外周動脈疾病之一，與包括中風(fēng)和心肌梗死在內(nèi)的心血管事件的發(fā)生有關(guān)。20世紀90年代末，人類首次嘗試用基因療法來治療嚴重的肢體缺血性疾病。到目前為止，除了血管內(nèi)治療外，幾乎沒有其他的治療方法來恢復(fù)缺血組織的血流。因此，尋找血管生成的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子作為治療靶點，對促進活體血流恢復(fù)具有重要意義。

TET(Ten-eleven translocation)蛋白是新近發(fā)現(xiàn)的一類DNA去甲基酶，其催化活性依賴于α-酮戊二酸(α-KG)和Fe²⁺。TET家族包括TET1、TET2和TET3三位成員。TET蛋白可以氧化5-甲基胞嘧啶(5mC)生成5-羥甲基胞嘧啶從而啟動DNA的去甲基化過程。TET2蛋白最早在白血病患者體內(nèi)發(fā)現(xiàn)，因其在造血過程中具有重要作用，早期的研究結(jié)果主要集中在TET2與血液系統(tǒng)惡性腫瘤的關(guān)系上。隨著研究的不斷深入，研究者們發(fā)現(xiàn)TET2在其他疾病發(fā)生中也具有不可替代的作用。心血管方面，Martin,K.A團隊發(fā)現(xiàn)DNA去甲基酶TET2通過維持平滑肌特異基因啟動子區(qū)的DNA低甲基化水平，參與調(diào)控動脈粥樣硬化等血管損傷過程。Sano S團隊發(fā)現(xiàn)TET2通過影響髓系單核巨噬細胞M1與M2表型的分化，參與調(diào)控急性心肌缺血損傷過程。由此提示TET2在心血管疾病的發(fā)生發(fā)展中具有重要作用。然而，迄今為止尚沒有研究揭示內(nèi)皮細胞中TET2在缺血性血管疾病的血管新生中是否發(fā)揮調(diào)控作用及其具體機制。

血管新生發(fā)生于機體多種生理病理過程中，已成為諸多病理過程的標(biāo)志之一。該過程中會有大量駐留細胞以及動員細胞細胞積極參與，其中內(nèi)皮細胞發(fā)揮了重要作用。毛細血管壁中的內(nèi)皮細胞會以“出芽”的方式獲得侵襲和動員能力，并在VEGF的引導(dǎo)下內(nèi)皮細胞不斷遷移與增殖，促進“芽”的不斷伸長。內(nèi)皮細胞以這種方式逐漸融合，形成連續(xù)的管腔，進而血管新生。缺血性血管疾病中，靶向內(nèi)皮細胞，增強內(nèi)皮細胞功能，將有望成為臨床治療的有效靶點。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是：如何通過血管生成的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子促進活體血流恢復(fù)，從而實現(xiàn)治療缺血性血管疾病特別是外周動脈疾病的目的。

為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供了抑制TET2表達和/或活性的試劑在制備治療缺血性血管疾病的藥物中的應(yīng)用。

優(yōu)選地，所述的抑制TET2表達和/或活性的試劑包括TET2的特異性siRNA。

優(yōu)選地，所述TET2的特異性siRNA的序列為：GGGUAAGCCAAGAAAGAAATT或AGAAAGAAAUCCAGGUGAATT。

本發(fā)明還提供了一種用于治療缺血性血管疾病的藥物或藥物組合物，所述的藥物或藥物組合物包括藥學(xué)上可接受的載體和有效量的活性成分，所述活性成分包括抑制TET2表達和/或活性的試劑。

優(yōu)選地，所述的抑制TET2表達和/或活性的試劑包括TET2的特異性siRNA。

優(yōu)選地，所述TET2的特異性siRNA的序列為：GGGUAAGCCAAGAAAGAAATT或AGAAAGAAAUCCAGGUGAATT。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果在于：