[發(fā)明專利]一種淋巴結(jié)來(lái)源淋巴瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞腫瘤細(xì)胞株及其應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202210119975.0
• 申請(qǐng)日: 2022-02-09
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN114703138B
• 公開(kāi)（公告）日: 2023-07-07
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 顧玲;徐郡;李圓圓;劉瀚旻
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 四川大學(xué)華西第二醫(yī)院
• 主分類號(hào): C12N5/09
• 分類號(hào): C12N5/09;C12N5/071;A01K67/027
• 代理公司: 成都天嘉專利事務(wù)所(普通合伙) 51211
• 代理人: 向丹

本發(fā)明公開(kāi)了一種淋巴結(jié)來(lái)源淋巴瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞腫瘤細(xì)胞株，來(lái)源于人淋巴瘤細(xì)胞裸鼠移植瘤模型中的淋巴結(jié)微環(huán)境，其細(xì)胞名稱為小鼠淋巴瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞腫瘤細(xì)胞HXLyAF?KLN，保藏編號(hào)為CCTCC?NO：C2021107，保藏日期為2021年12月09日，保藏單位為中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心。該細(xì)胞株為國(guó)內(nèi)外首次建立的淋巴結(jié)來(lái)源淋巴瘤相關(guān)小鼠成纖維細(xì)胞腫瘤細(xì)胞株，可在構(gòu)建小鼠成纖維細(xì)胞腫瘤動(dòng)物模型、惡性淋巴結(jié)微環(huán)境模型、3D腫瘤培養(yǎng)體系和類器官體系模型、淋巴結(jié)微環(huán)境與淋巴瘤進(jìn)展和耐藥的關(guān)系模型中應(yīng)用。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物醫(yī)學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，具體的說(shuō)，是一種淋巴結(jié)來(lái)源淋巴瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞腫瘤細(xì)胞株及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

淋巴瘤是一組起源于淋巴造血系統(tǒng)的惡性腫瘤，屬于常見(jiàn)腫瘤之一，近年來(lái)發(fā)病率逐漸上升，主要表現(xiàn)為無(wú)痛性淋巴結(jié)腫大，肝脾腫大，全身各組織器官均可受累，伴發(fā)熱、盜汗、消瘦、瘙癢等全身癥狀。根據(jù)瘤細(xì)胞分為霍奇金淋巴瘤（Hodgkin?lymphoma,簡(jiǎn)稱HL）和非霍奇金淋巴瘤（non?Hodgkin?lymphoma?,簡(jiǎn)稱NHL）兩類。

腫瘤的發(fā)生、生長(zhǎng)及轉(zhuǎn)移與腫瘤細(xì)胞所處的內(nèi)外環(huán)境有著密切關(guān)系，稱為腫瘤微環(huán)境，它不僅包括腫瘤所在組織的結(jié)構(gòu)、功能和代謝，亦與腫瘤細(xì)胞自身的（核和胞質(zhì)）內(nèi)在環(huán)境有關(guān)。腫瘤微環(huán)境與腫瘤細(xì)胞相互作用，影響腫瘤的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)歸。

癌相關(guān)成纖維細(xì)胞（cancer-associated?fibroblasts,?CAFs）是構(gòu)成實(shí)體腫瘤微環(huán)境的主要細(xì)胞成分，具有高度異質(zhì)性、可塑性和多向分化潛能，通過(guò)重塑腫瘤微環(huán)境，在實(shí)體瘤的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移、化療耐藥及惡性轉(zhuǎn)歸中起著復(fù)雜而重要的作用。目前認(rèn)為，CAFs的前體細(xì)胞主要有7種來(lái)源：骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞、組織中固有成纖維細(xì)胞、星形細(xì)胞、上皮細(xì)胞間質(zhì)轉(zhuǎn)化、內(nèi)皮細(xì)胞間質(zhì)轉(zhuǎn)化、纖維細(xì)胞和其他細(xì)胞，如周細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞、脂肪細(xì)胞和腫瘤干細(xì)胞等，因此，淋巴結(jié)微環(huán)境中有多種CAFs前體細(xì)胞。

由于不同來(lái)源的CAFs在腫瘤的進(jìn)展中起不同的作用，因此構(gòu)建不同來(lái)源的CAFs細(xì)胞有助于深入探索腫瘤病理。現(xiàn)有技術(shù)中，公開(kāi)號(hào)為CN108795851A的發(fā)明專利公開(kāi)了一種人唾液腺腺樣囊性癌癌相關(guān)成纖維細(xì)胞系CAF-SA的建立方法及其應(yīng)用，為唾液腺腺樣囊性癌研究及藥物研發(fā)提供了良好的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ汀５壳搬槍?duì)淋巴瘤，尤其是淋巴結(jié)來(lái)源的癌相關(guān)成纖維細(xì)胞仍未見(jiàn)研究和報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供小鼠淋巴瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞腫瘤細(xì)胞HXLyAF-KLN，是一株淋巴結(jié)來(lái)源小鼠淋巴瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞腫瘤細(xì)胞株，該細(xì)胞株為國(guó)內(nèi)外首次建立的淋巴結(jié)來(lái)源淋巴瘤相關(guān)小鼠成纖維細(xì)胞腫瘤細(xì)胞株。為此，本發(fā)明還提供了該細(xì)胞株在構(gòu)建小鼠成纖維細(xì)胞腫瘤動(dòng)物模型、惡性淋巴結(jié)微環(huán)境模型、3D腫瘤培養(yǎng)體系和類器官體系模型、淋巴結(jié)微環(huán)境與淋巴瘤進(jìn)展和耐藥的關(guān)系模型中的應(yīng)用。

本發(fā)明通過(guò)下述技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)：一種淋巴結(jié)來(lái)源淋巴瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞腫瘤細(xì)胞株，來(lái)源于人淋巴瘤細(xì)胞裸鼠移植瘤模型中的淋巴結(jié)微環(huán)境，其細(xì)胞名稱為小鼠淋巴瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞腫瘤細(xì)胞HXLyAF-KLN，保藏編號(hào)為CCTCC?NO：C2021107，保藏日期為2021年12月09日，保藏單位為中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心，保存單位地址為中國(guó)湖北省武漢市武漢大學(xué)。

所述淋巴結(jié)來(lái)源小鼠成纖維細(xì)胞腫瘤細(xì)胞株來(lái)源于人間變性大細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞Karpas299裸鼠移植瘤模型，取自小鼠淋巴瘤細(xì)胞浸潤(rùn)淋巴結(jié)，是一株淋巴結(jié)來(lái)源淋巴瘤相關(guān)小鼠成纖維細(xì)胞腫瘤細(xì)胞株。該細(xì)胞株的原代細(xì)胞來(lái)源于人間變性大細(xì)胞淋巴瘤移植瘤模型小鼠；取腫大的淋巴結(jié)，剪碎成組織塊，體外接種培養(yǎng)，去除懸浮細(xì)胞，獲得貼壁生長(zhǎng)細(xì)胞；細(xì)胞傳代10代后，形態(tài)較前均一，以不規(guī)則多角形和紡錘形為主，核大，核仁清晰，胞漿有短粗突起，無(wú)接觸抑制，可交叉重疊生長(zhǎng)，細(xì)胞密集時(shí)成團(tuán)聚集；在體外穩(wěn)定無(wú)限傳代，具高致瘤性；命名為小鼠淋巴瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞腫瘤細(xì)胞HXLyAF-KLN。

本發(fā)明涉及的小鼠成纖維細(xì)胞腫瘤細(xì)胞株HXLyAF-KLN具有以下生物學(xué)特性：