[發(fā)明專利]一種以ACE2靶向遞送shRNA的ACE2siRNA藥物

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• 申請日: 2022-02-08
• 公開（公告）號: CN114617977A
• 公開（公告）日: 2022-06-14
• 發(fā)明（設計）人: 翁炳煥;陳敏;許亞麗;姚旭峰;羅玉琴;楊艷梅;李小平;俞佳玲;師越
• 申請（專利權）人: 杭州癡創(chuàng)生物科技有限公司
• 主分類號: A61K47/64
• 分類號: A61K47/64;A61K31/713;A61P31/14;C12N15/113
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• 代理人: 暫無信息

1.一種以ACE2靶向遞送shRNA的ACE2siRNA藥物，其特征在于，合成以ACE2中和冠狀病毒和靶向遞送抗變異靶標shRNA的ACE2siRNA，包括分別合成以冠狀病毒保守基因為靶標的shRNA和以冠狀病毒受體結合域RBD為配體的ACE2，然后將合成的ACE2分別連接到合成的shRNA的正反義鏈上，構成由ACE2和shRNA組成的ACE2siRNA，包括進一步的脂質體修飾，使被ACE2靶向遞送的shRNA特異性間接結合RBD，形成shRNA-ACE2-RBD-病毒的復合物，進而使shRNA被復合物靶向遞送而隨著病毒的感染進入靶細胞，起抗變異靶標的RNA干擾作用。

2.根據權利要求1所述的一種以ACE2靶向遞送shRNA的ACE2siRNA藥物，其特征在于，所述以保守基因為靶標是指用于合成shRNA的siRNA選自數(shù)據庫記載的各種致病性冠狀病毒及其變異毒株的共有基因，使合成的shRNA靶向干擾所述共有基因，從而起廣譜抗變異毒株的作用；所述共有基因包括但不限于超保守基因、保守基因和/或由保守微衛(wèi)星拼接的基因。

3.根據權利要求1、2所述的一種以ACE2靶向遞送shRNA的ACE2siRNA藥物，其特征在于，所述合成shRNA包括但不限于首先合成2條互補的約21-25nt的siRNA寡核苷酸多肽以及合成起間隔作用的loop環(huán)堿基序列，然后將所合成的siRNA和loop環(huán)連接成由loop環(huán)間隔成的小發(fā)夾shRNA雙鏈，繼之在shRNA雙鏈的每條單鏈上各連接ACE2多肽。

4.根據權利要求1、2所述的一種以ACE2靶向遞送shRNA的ACE2siRNA藥物，其特征在于，所述以保守基因為靶標是指靶向所述保守基因的siRNA序列包括但不限于SEQ ID NO.1～41；所述以超保守基因、保守基因或保守微衛(wèi)星為靶標的siRNA序列包括但不限于SEQ IDNO.1、SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.5；所述保守基因包括但不限于WUHAN株、DELTA變異株和/或OMICRON變異株共有的基因序列，其siRNA序列包括但不限于SEQ ID NO.9～11、SEQ IDNO.16～20、SEQ ID NO.23、SEQ ID NO.26～27、SEQ ID NO.31～33、SEQ ID NO.35或SEQ IDNO.37～39。

5.根據權利要求1、3所述的一種以ACE2靶向遞送shRNA的ACE2siRNA藥物，其特征在于，所述ACE2siRNA包括將所述ACE2與所述shRNA和/或siRNA連接成化合物，或將所述shRNA和/或siRNA插入到所述ACE2多肽中間，連接成化合物，包括進而以脂質體修飾化合物。

6.根據權利要求1、5所述的一種以ACE2靶向遞送shRNA的ACE2siRNA藥物，其特征在于，所述ACE2包括全長ACE2、胞外ACE2、跨膜ACE2、胞內ACE2或密碼子優(yōu)化的ACE2多肽。

7.根據權利要求1、6所述的一種以ACE2靶向遞送shRNA的ACE2siRNA藥物，其特征在于，所述ACE2包括但不限于第1-740位氨基酸的胞外ACE2、第741-763位氨基酸的跨膜ACE2、第764-805位氨基酸的胞內ACE2以及經氨基酸序列優(yōu)化的ACE2多肽。

8.根據權利要求1、5所述的一種以ACE2靶向遞送shRNA的ACE2siRNA藥物，其特征在于，所述連接或合成包括但不限于將ACE2與shRNA的反義鏈3'末端、正義鏈5'末端或3'末端進行連接，并包括但不限于以帶間隔臂的羧腙鍵、二硫鍵、磷酸二酯鍵、二硫代磷酸脂鍵、硫醚鍵、肟鍵、酰胺鍵、馬來酰亞胺-巰基鍵的化學偶聯(lián)或共價偶聯(lián)進行連接。

9.根據權利要求1所述的一種以ACE2靶向遞送shRNA的ACE2siRNA藥物，其特征在于，所述ACE2siRNA包括在shRNA的正反義鏈上分別連接ACE2或RBD，或分別連接其多肽。

10.根據權利要求1、5所述的一種以ACE2靶向遞送shRNA的ACE2siRNA藥物，其特征在于，所述脂質體修飾ACE2siRNA包括但不限于制備ACE2-shRNA/ch1-ACE2、siRNA/ch1和shRNA/ch1、ACE2-siRNA/ch1、ACE2-shRNA/ch1、3ACE2-shRNA/ch1、2ACE2-shRNA/siRNA/ch1、2ACE2-2shRNA/ch1、4ACE2-2shRNA/ch1和ACE2-siRNA/lip。