[發明專利]一株樊慶笙氏紅球菌及其獲取方法與應用

有效

• 申請號: 202210111109.7
• 申請日: 2022-01-29
• 公開（公告）號: CN114507620B
• 公開（公告）日: 2023-05-23
• 發明（設計）人: 劉麗;程歡;董雅鳳;張東華;伍建榕;李進斌
• 申請（專利權）人: 西南林業大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N1/02;A01N63/20;A01P21/00;C12R1/01
• 代理公司: 云南律翔知識產權代理事務所(普通合伙) 53219
• 代理人: 謝喬良

本發明公開了一株樊慶笙氏紅球菌（Rhodococcus?qingshenggii）Srq?21及其獲取方法與應用，屬于微生物應用技術領域。樊慶笙氏紅球菌（Rhodococcu?sqingshenggii）Srq?21，已在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心保藏，其保藏編號為CGMCC?No.23566，所述樊慶笙氏紅球菌（Rhodococcus?qingshenggii）Srq?21屬于真細菌界，放線菌門，棒桿菌目、諾卡菌科、紅球菌屬。獲取方法包括分離、篩選、純化工序，應用為所述的樊慶笙氏紅球菌（Rhodococcus?qingshenggii）Srq?21在制備作為促進植物生長的單一固氮菌種菌劑中的應用。

技術領域

本發明屬于微生物技術領域，進一步屬于微生物分離培養應用技術領域，具體涉及一株樊慶笙氏紅球菌及其獲取方法與應用。

背景技術

蘋果是世界產量排名第二的水果，僅次于香蕉（統計截止至2016年）。中國蘋果的栽培面積、總產量居世界蘋果主產國第一位，是第一蘋果生產大國。隨著蘋果的大量集約化種植，提高肥料利用率，降低土壤環境負荷的問題越來越重要。這首先適用于氮肥，氮肥是最限制作物產量的營養物質，它們兼具高能源強度和高污染環境的特性。高劑量的氮肥施用會對土壤性質和果實質量產生負面影響。

通過生物固氮作用固定的氮素能與有機物結合且不易流失，能被生物完全利用而不會對環境造成污染。因此研究生物固氮在改善生態平衡和促進農業可持續發展上具有重要意義。內生菌位于植物體內部，在植物組織內生活而不引起植物病癥或者傷害。它們可以和植物形成復雜的共締合，能在自然環境下促進宿主植物的生長和養分吸收，提高植物抗逆性和對病原菌的抵抗能力。其中內生固氮菌是在植物組織內部建立聯合固氮體系，從而與植物形成緊密互惠共生關系的一類內生微生物。在1993年召開的第五屆國際非豆科植物固氮大會總結報告中，評價內生固氮菌開辟了一條新的拓展生物固氮到非結瘤植物的途徑。

發明內容

本發明屬于微生物技術領域，進一步屬于微生物分離培養應用技術領域，具體涉及一株樊慶笙氏紅球菌及其獲取方法與應用。

本發明的第一目的在于提供一株樊慶笙氏紅球菌；第二目的在于提供所述的樊慶笙氏紅球菌的獲取方法；第三目的在于提供所述的樊慶笙氏紅球菌的應用。

本發明的第一目的是這樣實現的，一株樊慶笙氏紅球菌（ Rhodococcusqingshengii），命名為Srq-21，經鑒定為樊慶笙氏紅球菌（ Rhodococcusqingshengii）的一個株系，是從紅富士蘋果的樹皮中分離得到，已于2021年10月11日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心（簡稱CGMCC，地址為：北京市朝陽區北辰西路1號院3號中國科學院微生物研究所，郵編100080），其保藏編號為CGMCC?No.23566，所述樊慶笙氏紅球菌屬于真細菌界，放線菌門，棒桿菌目、諾卡菌科、紅球菌屬，該菌內生于蘋果樹皮內具有聯合固氮的能力。

內生固氮菌，最早于1986年在甘蔗中分離獲得。后針對禾本科作物內生固氮菌的分離及應用的相關研究比較多。如研究表明甘蔗內生固氮菌可為植株提供高達70%的氮素需求；某些條件下水稻中內生固氮菌可為植株提供36%-42%氮素需求等；目前，木本植物內生固氮菌的研究還比較少，但現已開始逐漸深入。如已用¹⁵N標記的方法證明了楊樹內生菌具有固氮功能。本發明已通過高通量測序的方法驗證在蘋果的各個組織部位均有豐富的內生固氮菌存在。同時通過傳統的分離方法獲得了大量的內生固氮菌株。蘋果內生固氮菌這一新微生物資源的應用，有望減少蘋果栽培過程中化肥的使用。

本發明的第二目的是這樣實現的：一種所述樊慶笙氏紅球菌的獲取方法，包括分離、純化及分子驗證、菌株鑒定工序。具體包括：