[發(fā)明專(zhuān)利]結(jié)核分枝桿菌Rv0934抗原蛋白、其抗原表位肽及其應(yīng)用

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202210111080.2
• 申請(qǐng)日: 2022-01-29
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN114099659A
• 公開(kāi)（公告）日: 2022-03-01
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 萬(wàn)康林;劉海燦;范雪亭;李馬超
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 中國(guó)疾病預(yù)防控制中心傳染病預(yù)防控制所
• 主分類(lèi)號(hào): A61K39/04
• 分類(lèi)號(hào): A61K39/04;A61P31/06;C07K14/35;C12N15/31;C12Q1/689;C12Q1/04;G01N33/569
• 代理公司: 北京路浩知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11002
• 代理人: 商秀玲

本發(fā)明涉及抗原肽技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及結(jié)核分枝桿菌Rv0934抗原蛋白、其抗原表位肽及其應(yīng)用。本發(fā)明提供結(jié)核分枝桿菌Rv0934蛋白或其編碼基因在制備用于預(yù)防或治療結(jié)核分枝桿菌感染引起疾病的藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明還提供一種結(jié)核分枝桿菌抗原表位肽，其包含第一抗原表位肽和第二抗原表位肽；第一抗原表位肽具有結(jié)核分枝桿菌Rv0934蛋白的第57?135位氨基酸序列；第二抗原表位肽具有結(jié)核分枝桿菌Rv0934蛋白的第268?373位氨基酸序列。結(jié)核分枝桿菌Rv0934抗原蛋白及其抗原表位肽能夠刺激機(jī)體產(chǎn)生強(qiáng)的細(xì)胞免疫和體液免疫反應(yīng)，可用于新型疫苗候選抗原，具有重要的應(yīng)用價(jià)值。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及抗原肽技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及結(jié)核分枝桿菌Rv0934抗原蛋白、其抗原表位肽及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

結(jié)核病（Tuberculosis, TB）是由結(jié)核分枝桿菌（Mycobacterium tuberculosis，M.tb）引起的一種人獸共患傳染性疾病，隨著耐藥結(jié)核病以及HIV-TB合并感染的出現(xiàn)，結(jié)核病的防治面臨更大的挑戰(zhàn)。

控制和預(yù)防傳染病最有效的方法即接種疫苗。目前應(yīng)用于人預(yù)防結(jié)核病的疫苗只有卡介苗（Bacillus Calmette Guérin，BCG），它對(duì)于預(yù)防兒童嚴(yán)重性結(jié)核（例如結(jié)核性腦膜炎和粟粒性結(jié)核）有效，但對(duì)于青少年以及成年人結(jié)核幾乎沒(méi)有效果，而目前成人結(jié)核病占結(jié)核病總數(shù)的絕大部分。由于卡介苗為減毒活疫苗，因此對(duì)于免疫力低或者免疫系統(tǒng)不健全的人具有一定的危險(xiǎn)性。此外，有研究證實(shí)由于BCG的接種，降低了結(jié)核菌素作為診斷試劑的敏感性，對(duì)目前臨床診斷結(jié)核病造成一定的影響（Anon，1999，India journal ofmedical research 110, 14）。因此，研究一種安全且有效的結(jié)核病疫苗非常迫切。當(dāng)前結(jié)核病新型疫苗的研究主要分為以下幾種：1）活菌疫苗，主要包括重組BCG和結(jié)核分枝桿菌減毒活疫苗；2）亞單位疫苗，主要包括病毒載體疫苗、蛋白疫苗以及DNA疫苗等；3）滅活疫苗等。對(duì)于重組BCG以及亞單位疫苗的研發(fā)，最重要的即開(kāi)發(fā)有效的結(jié)核分支桿菌抗原。目前，已經(jīng)有Ag85B、Esat-6、HspX等抗原被證實(shí)具有較強(qiáng)的免疫原性，可用于結(jié)核病疫苗的研究。然而，雖然有多種結(jié)核分枝桿菌的抗原用于結(jié)核新型疫苗的研究，但是亞單位疫苗的保護(hù)效果仍有待提高，因此，仍需要開(kāi)發(fā)有效的結(jié)核分支桿菌抗原。

結(jié)核分枝桿菌通過(guò)呼吸道進(jìn)入宿主后，寄生于肺泡巨噬細(xì)胞，屬于胞內(nèi)寄生菌，因此細(xì)胞免疫應(yīng)答對(duì)于清除結(jié)核分枝桿菌具有重要作用（Lindestam Arlehamn C.S et al.,2014, Cold Spring Harb Perspect Med 4(7), a018465）。另外，Slight等發(fā)現(xiàn)增殖的抗原特異性B細(xì)胞定殖于保護(hù)性肉芽腫內(nèi)，這些肉芽腫是高度特殊化的空間結(jié)構(gòu)，可以控制Mtb的進(jìn)一步感染（Slight et al., 2013, Journal of Clinical Investigation 123(2), 712-726）。除此之外，最近的研究證實(shí)，來(lái)自潛伏感染者的抗體能促進(jìn)噬菌體的成熟、炎癥小體激活以及細(xì)胞內(nèi)Mtb的巨噬細(xì)胞殺傷作用，這些研究證實(shí)體液免疫對(duì)于機(jī)體抗結(jié)核分枝桿菌也具有一定的作用( Lu et al., 2016, Cell 167(2), 433-443)。

Rv0934是結(jié)核分枝桿菌無(wú)機(jī)磷酸鹽攝取系統(tǒng)的磷酸鹽結(jié)合亞基，分子量大小為38KDa，屬于ABC （ATP結(jié)合盒）轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白家族（Andersen AB et al.,1989, Infection andImmunity 57(8), 2481-2488），基因全長(zhǎng)1125bp，編碼374個(gè)氨基酸。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的之一是提供結(jié)核分枝桿菌Rv0934抗原蛋白及其應(yīng)用。本發(fā)明的另一目的是提供結(jié)核分枝桿菌Rv0934抗原蛋白的T細(xì)胞表位肽及其應(yīng)用。