[發明專利]一種耐鹽堿草酸青霉菌劑及其制備方法和應用

在審

• 申請號: 202210106971.9
• 申請日: 2022-01-28
• 公開（公告）號: CN114437941A
• 公開（公告）日: 2022-05-06
• 發明（設計）人: 孫杉杉;徐延平;葛振宇;徐志文
• 申請（專利權）人: 領先生物農業股份有限公司
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12N1/36;C09K17/14;C09K101/00;C09K109/00;C12R1/80
• 代理公司: 北京八月瓜知識產權代理有限公司 11543
• 代理人: 陶敏

1.一種耐鹽堿草酸青霉菌劑的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：

S1：對保藏編號為CGMCC No.12628的草酸青霉菌進行馴化；

S2：在高鹽堿條件下對馴化后的草酸青霉菌進行發酵；

優選地，高鹽堿條件包括：鹽濃度為10％以上和pH值為11以上。

2.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，馴化包括耐鹽堿馴化；耐鹽堿馴化包括：采用不同鹽濃度梯度和堿濃度梯度的培養基對草酸青霉菌進行馴化培養；

優選地，鹽濃度梯度為0％、2％、5％、7％、10％的NaCl；堿濃度梯度為pH6、pH8、pH9、pH10、pH11。

3.根據權利要求2所述的制備方法，其特征在于，馴化還包括耐鹽堿定向馴化；耐鹽堿定向馴化包括采用添加高鹽堿物料浸出液的培養基對草酸青霉菌進行馴化培養，高鹽堿物料包括味精渣、堿解海藻渣和廚余垃圾堆肥發酵物料中的至少一種；

優選地，高鹽堿物料包括物料A和物料B，其中物料A為味精渣，物料B為堿解海藻渣或廚余垃圾堆肥發酵物料；

優選地，高鹽堿物料中物料A與物料B的質量比為(1.5-2.5)：1。

4.根據權利要求3所述的制備方法，其特征在于，高鹽堿物料浸出液的制備方法包括：將高鹽堿物料與水混合后攪拌、靜置、取上清液，得到高鹽堿物料浸出液；

優選地，高鹽堿物料與水質量體積比為1g：(1.5-2.5)mL；

優選地，培養基中高鹽堿物料浸出液的濃度為15-25％。

5.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，發酵為固態發酵；固態發酵原料包括味精渣、堿解海藻渣和廚余垃圾堆肥發酵物料中的至少一種；

優選地，固態發酵原料包括物料A和物料B，其中物料A為味精渣，物料B為堿解海藻渣或廚余垃圾堆肥發酵物料；

優選地，固態發酵原料中物料A與物料B的質量比為(1.5-2.5)：1。

6.根據權利要求5所述的制備方法，其特征在于，固態發酵包括：

將培養好的種子液培養物加入固態發酵原料中，接種量不低于1×10⁴cfu/g物料，于28-30℃下恒溫培養7-10天，得到耐鹽堿草酸青霉菌劑。

7.根據權利要求6所述的制備方法，其特征在于，種子液培養物的制備方法包括：

將馴化后的草酸青霉菌的活化孢子粉、分散劑和無菌水混合，制得孢子菌懸液；

將孢子菌懸液接種于滅菌的液體種子培養基中，于28-30℃下恒溫震蕩培養60-68h，得到種子液培養物；

優選地，分散劑為甘油或吐溫80；

優選地，孢子菌懸液中孢子濃度不低于3×10⁷cfu/mL。

8.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，還包括步驟S3：對發酵產物進行粉碎、干燥、過篩，得到耐鹽堿草酸青霉菌劑；

優選地，耐鹽堿草酸青霉菌劑的有效活菌數不低于2×10⁹cfu/g；

優選地，耐鹽堿草酸青霉菌劑的水分含量不高于15％。

9.一種耐鹽堿草酸青霉菌劑，其特征在于，按照權利要求1-8任一所述的制備方法制得。

10.權利要求9所述的耐鹽堿草酸青霉菌劑在作物種植或鹽堿土壤改良中的應用。