[發明專利]一種新型多元適體分子在磁珠免疫化學發光AFP中的應用

有效

• 申請號: 202210105543.4
• 申請日: 2022-01-28
• 公開（公告）號: CN114441749B
• 公開（公告）日: 2022-09-30
• 發明（設計）人: 李松羊;李強
• 申請（專利權）人: 安源基因科技（上海）有限公司
• 主分類號: C12N15/115
• 分類號: C12N15/115;G01N33/543;C07C335/20;C07C331/28;C07C231/02;C07C231/12
• 代理公司: 蘇州三英知識產權代理有限公司 32412
• 代理人: 朱如松

本發明公開了一種新型多元適體分子在磁珠免疫化學發光AFP中的應用。其中，多元適體分子通式為：Mag?NH?C(S)?NH?R1?L1?[C(O)?NH?Ap1]_n，n為正整數且不小于4，Mag?NH₂為氨基磁珠，Ap1為適體分子。通過功能基團增加了適體分子Ap1的數量，通過鏈長L1增加了適體分子之間的間隔距離。AFP為甲胎蛋白，通過適體分子與檢測物質AFP反應，捕獲檢測物質AFP；同時，通過檢測物質AFP的雙抗體夾心免疫反應，再次增加對檢測物質AFP的信號放大作用，從而，提高檢測物AFP的靈敏度。特別提供了新型多元適體分子AP6(n＝16)、檢測物質AFP、多個抗體標記物等一起共同形成抗原抗體適體磁珠免疫復合物。該適體免疫復合物增加了對檢測物質AFP的信號放大作用。

技術領域

本發明是關于生物檢測技術，特別是關于一種新型多元適體分子在磁珠免疫化學發光AFP中的應用。

背景技術

目前，抗原抗體免疫反應分為競爭法和夾心法兩種。夾心法是雙抗體與抗原反應，形成抗原抗體免疫復合物。其中，包被抗體與磁珠交聯，形成磁珠包被抗體；標記抗體與標記物交聯，形成抗體標記物。磁珠包被抗體，抗原，也就是檢測物，與抗體標記物等，一起免疫反應，形成抗原抗體免疫復合物，經過磁分離過程，洗去未結合的抗體標記物，通過抗體標記物與底物的反應，產生光信號強度，其中，光信號強度與檢測物T濃度成正比。作光信號強度與校準品濃度的校準曲線，通過檢測物的校準曲線求出檢測物的濃度。

公開于該背景技術部分的信息僅僅旨在增加對本發明的總體背景的理解，而不應當被視為承認或以任何形式暗示該信息構成已為本領域一般技術人員所公知的現有技術。

發明內容

本發明的目的在于提供一種新型多元適體分子在磁珠免疫化學發光AFP中的應用，尤其適用于磁珠免疫化學發光AFP領域，獲得了一種空間位阻和空間構象等得到顯著優化的適體分子，從而極大地提高了免疫化學發光AFP的靈敏度。

為實現上述目的，本發明的實施例提供了一種新型多元適體分子在磁珠免疫化學發光AFP中的應用，包括多元適體分子，其通式為：Mag-NH-C(S)-NH-R1-L1-[C(O)-NH-Ap1]_n，n為正整數且不小于4，其中Mag-NH₂為氨基磁珠，Ap1至少包括核酸單鏈序列或者核酸雙鏈序列，L₁選自長鏈基團，R1為不存在或者選自多元結構。優選的，L₁選自至少提供多元氨基的C1-C100長鏈基團。

優選的新型多元適體分子的通式如下所示：

在本發明的一個或多個實施方式中，多元適體分子中R1的多元結構選自碳鏈或者雜鏈或者多元環結構。

在本發明的一個或多個實施方式中，氨基磁珠的粒徑為0.01-1000μm。

在本發明的一個或多個實施方式中，還包括與所述新型多元適體分子配合的抗體標記物和檢測物質AFP，形成免疫復合物，其通式如下所示：

其中，抗體標記物至少包括Ab1-X和Ab2-X，其中Ab1和Ab2為AFP的單克隆抗體或者多克隆抗體，X為標記物，m為正整數，且不小于1。X能與底物反應產生光信號，X產生的光信號強度與檢測物質AFP濃度成正比。因此，新型多元適體分子免疫復合物產生的光信號強度，可以通過檢測物質AFP的校準曲線求出檢測物質AFP的濃度。

在本發明的一個或多個實施方式中，新型多元適體分子免疫復合物，抗體標記物中標記物X選自堿性磷酸酶。

在本發明的一個或多個實施方式中，新型多元適體分子免疫復合物，適體分子Ap1是針對檢測物質AFP的特異性適體分子。