[發明專利]去甲波爾定的應用及其促進間充質干細胞向成骨細胞分化的方法

在審

• 申請號: 202210099747.1
• 申請日: 2022-01-27
• 公開（公告）號: CN114377013A
• 公開（公告）日: 2022-04-22
• 發明（設計）人: 劉如明;肖建輝;邢穎
• 申請（專利權）人: 遵義醫科大學附屬醫院
• 主分類號: A61K31/473
• 分類號: A61K31/473;A61L27/36;A61L27/38;C12N5/077;C12N5/0775;A61P19/08
• 代理公司: 重慶強大凱創專利代理事務所(普通合伙) 50217
• 代理人: 左康艷

本發明屬于醫藥技術領域，具體涉及去甲波爾定的應用以及使用其誘導人羊膜間充質干細胞(hAMSCs)向成骨細胞分化的方法。本發明通過研究發現去甲波爾定能夠誘導體外培養的hAMSCs向成骨細胞分化，包括增加早期成骨標志物堿性磷酸酶的表達和酶活，晚期成骨標志鈣化結節的形成，以及上調早期和晚期成骨分化相關基因和蛋白的表達。hAMSCs分化形成的成骨細胞可作為種子細胞，應用于骨缺損領域相關疾病的治療，如骨質疏松、關節炎和骨折等；去甲波爾定也可作為促進干細胞成骨分化的藥物用于骨科相關疾病的治療。本發明為去甲波爾定和hAMSCs在干細胞移植為基礎的再生治療領域的應用提供了理論和實驗基礎。

技術領域

本發明屬于醫藥技術領域，具體涉及去甲波爾定的應用及其促進間充質干細胞向成骨細胞分化的方法。

背景技術

人羊膜間充質干細胞(hAMSCs)來源的人胎盤羊膜是胚胎早期產物，屬于醫療廢棄物，取材方便，也不存在倫理道德爭議(Du L,Lv R,Yang X,et al.Hypoxic conditionedmedium of placenta-derived mesenchymal stem cells protects against scarformation.Life Sci.2016,149:51-57)。另外hAMSCs能夠表達胚胎干細胞的典型標志物，如SSEA-3、SSEA-4、Oct4和Rex1等(Bilic G,Zeisberger S M,Mallik A S,etal.Comparative characterization of cultured human term amnion epithelial andmesenchymal stromal cells for application in cell therapy.Cell Transplant,2008,17:955-968)，具有可塑性和多向分化潛能，并且無致瘤性。因此，hAMSCs被認為是組織工程理想的種子細胞。

目前，hAMSCs已證實在一定條件下能夠分化為成骨細胞。成骨細胞是骨形成的主要功能細胞，負責骨基質的合成、分泌和礦化，其形成和功能異常引起的骨組織缺損與一列骨骼疾病相關，如骨關節炎、骨質疏松、骨折等。hAMSCs作為成骨細胞的絕佳來源在骨組織缺損修復領域具有極大的應用前景，但其成骨分化的定向調控及作用機制尚未完全明了，目前尚無理想的誘導策略。

隨著化學生物學的發展，小分子化合物在調控干細胞命運方面顯示出重要價值。我國傳統中草藥資源豐富，且有長期的臨床應用基礎，來自于天然中草藥的小分子化合物因其結構的多樣性和新穎性，具有多樣的藥理活性(屠鵬飛,曾克武,廖理曦,宋小敏.天然活性小分子靶標蛋白識別方法學研究進展.中國中藥雜志,2016,41(01):6-13)。利用天然的小分子化合物誘導干細胞分化將是很有潛力的一條途徑。

去甲波爾定(Laurolitsine,LAU)也稱新木姜子堿，屬于喹啉生物堿類化合物，是傳統中草藥烏藥的主要有效成分之一。去甲波爾定的分子式為C₁₈H₁₉NO₄，分子量為313.35。傳統中醫理論證明，烏藥具有行氣止痛，溫腎散寒的功效(袁代昌,袁玲,袁盼盼,魯玉梅,南一.烏藥的本草考證.山西中醫,2021,37(7):55-58)。現代藥理研究表明烏藥具有廣泛的藥理活性，如能增強消化液的分泌，有興奮和增強運動節律作用，可以顯著抑制潰瘍的形成，明顯對抗乙醇誘發的細胞損傷，具有細胞保護作用(鄧桂明,向彪,肖小芹,歐陽林旗,劉景詩,魏鳳,朱青,蔣司晨.基于網絡藥理學的烏藥主要化學成分藥效作用研究.中草藥,2018,49(21):5125-5133)。近來又發現還具有較強的鎮痛、抗炎作用和顯著的抗風濕作用(張劍,羅人仕,楊瑜,劉冰晶.烏藥總生物堿抗炎鎮痛藥理學研究.中國醫院藥學雜志,2016,36(24):2187-2190)。