[發(fā)明專利]一種濕地植被土壤微生物磷檢測方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202210093392.5
• 申請日: 2022-01-26
• 公開（公告）號: CN114428062A
• 公開（公告）日: 2022-05-03
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 劉明華;王孟娟;王志彪;李蘋;辛志剛;王曉杰;畢建平
• 申請（專利權(quán)）人: 遼寧省德明環(huán)境檢測有限公司
• 主分類號: G01N21/31
• 分類號: G01N21/31
• 代理公司: 遼寧中科品創(chuàng)專利代理事務(wù)所(普通合伙) 21261
• 代理人: 王麗瓊

1.一種濕地植被土壤微生物磷檢測方法，其特征在于，包括如下步驟：

步驟1，采樣：

水質(zhì)層取樣，水質(zhì)層中部采用吸管取樣，得到水樣1；

水土交界面取樣，水土交界面采用吸管或取樣器取樣，得到水土混合樣2；

土質(zhì)層取樣：土質(zhì)層取樣采用取樣器在土層下5～10cm取樣得到淺土壤樣3，在土層下15～30cm取樣得到深土壤樣4；

步驟2，分樣：

將水樣1分為樣A1、樣B1、樣C1、樣D1四種；將水土混合樣2分為樣A2、樣B2、樣C2、樣D2四種；將淺土壤樣3分為樣A3、樣B3、樣C3、樣D3四種；將深土壤樣4分為樣A4、樣B4、樣C4、樣D4四種；

步驟3，處理樣A1、A2、A3和A4：

等質(zhì)量稱取樣A1、樣A2、樣A3和樣A4，分別加入硅粉或去離子水拌合均勻，制成含水量在20～30％的拌合樣A1、拌合樣A2、拌合樣A3和拌合樣A4；

將拌合樣A1、拌合樣A2、拌合樣A3和拌合樣A4，攤平至薄層，進(jìn)行氯仿熏蒸，除去氯仿后，分別加入碳酸氫鈉浸提兩次，過濾兩次，保留濾液，得到濾液A1、濾液A2、濾液A3和濾液A4；

步驟4，處理樣B1、B2、B3和B4：

等質(zhì)量稱取樣B1、樣B2、樣B3和樣B4，分別加入硅粉或去離子水拌合均勻，制成含水量在20～30％的拌合樣B1、拌合樣B2、拌合樣B3和拌合樣B4；

將拌合樣B1、拌合樣B2、拌合樣B3和拌合樣B4，分別直接加入碳酸氫鈉浸提兩次，過濾兩次，保留濾液，得到濾液B1、濾液B2、濾液B3和濾液B4；

步驟5，模擬環(huán)境培養(yǎng)樣及處理樣C1、C2、C3和C4：

等質(zhì)量稱取樣C1、樣C2、樣C3和樣C4，置于液體培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，進(jìn)行溫濕度濕地環(huán)境模擬培養(yǎng)25天后，取出；分別加入硅粉或去離子水拌合制成含水量在20～30％的拌合樣C1、拌合樣C2、拌合樣C3、拌合樣C4，攤平至薄層，進(jìn)行氯仿熏蒸，除去氯仿后，分別加入碳酸氫鈉浸提兩次，過濾兩次，保留濾液，得到濾液C1、濾液C2、濾液C3和濾液C4；

步驟6，模擬環(huán)境培養(yǎng)樣及處理樣D1、D2、D3和D4：

等質(zhì)量稱取樣D1、樣D2、樣D3和樣D4，置于液體培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，進(jìn)行溫濕度濕地環(huán)境模擬培養(yǎng)25天后，取出；分別加入硅粉或去離子水拌合制成含水量在20～30％的拌合樣D1、拌合樣D2、拌合樣D3、拌合樣D4；

將拌合樣D1、拌合樣D2、拌合樣D3和拌合樣D4，分別直接加入碳酸氫鈉浸提兩次，過濾兩次，保留濾液，得到濾液D1、濾液D2、濾液D3和濾液D4；

步驟7，中和、定容：

在濾液A1、濾液A2、濾液A3、濾液A4、濾液B1、濾液B2、濾液B3、濾液B4、濾液C1、濾液C2、濾液C3、濾液C4、濾液D1、濾液D2、濾液D3和濾液D4中分別加入鹽酸，調(diào)節(jié)pH值為6～6.5，定容制成待測樣；

步驟8，測定：

采用鉬銻抗分光光度法，儀器測定待測樣中磷的含量；

步驟9，計算：

計算當(dāng)前水樣1中微生物磷含量n1、當(dāng)前水土混合樣2中微生物磷含量n2、當(dāng)前淺土壤樣3中微生物磷含量n3、當(dāng)前深土壤樣4中微生物磷含量n4、預(yù)后水樣1中微生物磷含量m1、預(yù)后水土混合樣2中微生物磷含量m2、預(yù)后淺土壤樣3中微生物磷含量m3和預(yù)后深土壤樣4中微生物磷含量m4；

步驟10，判斷：

根據(jù)計算結(jié)果，繪制當(dāng)前含量折線圖和預(yù)后斜率圖，判斷濕地植被不同樣點土壤微生物磷含量狀況，以及確定不同樣點微生物磷的含量增長斜率，根據(jù)走勢評估濕地植被土壤環(huán)境好壞。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種濕地植被土壤微生物磷檢測方法，其特征在于，步驟1中，所述水樣1、水土混合樣2、淺土壤樣3和深土壤樣4為單點取樣或多點平行取樣。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種濕地植被土壤微生物磷檢測方法，其特征在于，步驟1中，所述水樣1、水土混合樣2、淺土壤樣3和深土壤樣4采樣后清理動、植物雜質(zhì)。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種濕地植被土壤微生物磷檢測方法，其特征在于，步驟2中，所述樣A1、樣B1、樣C1、樣D1、A2、樣B2、樣C2、樣D2、樣A3、樣B3、樣C3、樣D3、樣A4、樣B4、樣C4和樣D4為單份樣或者多份平行樣。