[發(fā)明專利]一株能同時(shí)裂解沙門氏菌和大腸桿菌的噬菌體STP55及應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202210088482.5
• 申請(qǐng)日: 2022-01-25
• 公開（公告）號(hào): CN114703148B
• 公開（公告）日: 2023-08-11
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王小紅;朱文娟;丁一峰;王佳;王吉;黃晨曦;王源上
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 華中農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號(hào): C12N7/00
• 分類號(hào): C12N7/00;A01N63/40;A01P1/00
• 代理公司: 武漢開元知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 42104
• 代理人: 馮超

本發(fā)明公開了一株能同時(shí)裂解沙門氏菌和大腸桿菌的噬菌體STP55及應(yīng)用，該噬菌體STP55為鼠傷寒沙門氏菌噬菌體，其保藏編號(hào)：CCTCC?NO：M?2022085；其具有較高的溫度耐受性和較寬的酸堿耐受范圍。基因組分析其不含任何與抗生素耐藥性、毒素、溶原性和毒力因子相關(guān)的基因，從遺傳背景上證實(shí)了該噬菌體的安全性。噬菌體STP55不僅能夠抑制沙門氏菌和大腸桿菌產(chǎn)生的單雙物種生物被膜的形成，還能夠清除在生菜上已建立的生物被膜，因此該噬菌體可作為生物殺菌劑清除食品上形成的生物被膜，有效降低沙門氏菌和大腸桿菌的污染和傳播。本發(fā)明提供的噬菌體為開發(fā)新型抗菌制劑提供了優(yōu)良菌種資源，具有良好的應(yīng)用開發(fā)前景。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及食品安全領(lǐng)域，具體涉及一株能同時(shí)裂解沙門氏菌和大腸桿菌的噬菌體STP55及應(yīng)用。

背景技術(shù)

沙門氏菌和致病性大腸桿菌是重要的食源性病原菌，在世界范圍內(nèi)經(jīng)常被報(bào)道。沙門氏菌是一種人畜共患病病原體，是食源性疾病的主要原因之一，可引起惡心、嘔吐、腹痛、腹瀉、發(fā)燒和頭痛等各種癥狀。大腸桿菌是腸桿菌科細(xì)菌家族的一員，是人類和溫血?jiǎng)游镂改c道中最常見的共生菌體，也是引起腸炎、尿路感染、敗血癥和其他臨床感染的主要原因。根據(jù)美國疾病控制和預(yù)防中心(CDC)的數(shù)據(jù)，僅在美國，這兩種物種每年就分別導(dǎo)致數(shù)百萬人患病，2000人和23000人住院，以及60人和450人死亡。此外，沙門氏菌和大腸桿菌還能夠在各種食品設(shè)備表面和新鮮農(nóng)產(chǎn)品上附著、定殖和形成生物膜，進(jìn)一步加劇了它們的危險(xiǎn)。

生物膜是嵌入在自身的細(xì)胞外基質(zhì)中的多細(xì)胞群落，它們附著在非生物或生物表面上并生長。這些物種分泌胞外聚合物質(zhì)(EPS)，維持細(xì)胞共同形成復(fù)雜的三維結(jié)構(gòu)，并作為屏障。因此，生物被膜中的生物比浮游細(xì)胞更能耐受環(huán)境壓力，這使得生物被膜難以抑制或根除。在自然界中，細(xì)菌可以形成單一物種的生物膜，也可以共存于多物種群落中，形成混合生物膜。一些研究表明，多物種生物膜由于其復(fù)雜的結(jié)構(gòu)以及物種間和物種內(nèi)的相互作用，對(duì)抗菌藥物的敏感性更低。雖然提出了多種物理、化學(xué)和生物策略來控制生物膜，如天然物質(zhì)、超聲波、UV-C輻照、冷氧等離子體等。然而，這些方法的有效性有限，而且大多數(shù)技術(shù)實(shí)際上并不適合在食品工業(yè)中實(shí)施控制生物膜。因此，需要更好的方法來控制它們的污染。

近年來，噬菌體的應(yīng)用被認(rèn)為是控制細(xì)菌生物膜的一種新的生物方法，因?yàn)樗试S通過噬菌體解聚酶的酶活性降解EPS。噬菌體處理被證明對(duì)減少由沙門氏菌、大腸桿菌、單核增生李斯特菌和副溶血性弧菌形成的生物膜有很高的效率。噬菌體依靠其細(xì)菌宿主進(jìn)行繁殖，是地球上最豐富的生物實(shí)體，可以在任何可能的棲息地找到。它只感染細(xì)菌，不傷害人類，使其在食品和臨床環(huán)境中使用是安全的。然而，噬菌體通常具有物種特異性甚至菌株特異性，這限制了噬菌體作為食品行業(yè)細(xì)菌污染生物控制的廣泛應(yīng)用。因此，在噬菌體對(duì)多物種生物膜處理的研究中，通過噬菌體雞尾酒療法進(jìn)行。

為了達(dá)到這些目的，首先需要分離每個(gè)目標(biāo)菌株的噬菌體，這可能會(huì)增加分離和驗(yàn)證這些噬菌體的勞動(dòng)需求。最近，一些噬菌體被觀察到感染不同屬或種的菌株，稱為多價(jià)噬菌體。例如，噬菌體EcS1能夠感染志賀氏菌、沙門氏菌和大腸桿菌；噬菌體S144能夠感染沙門氏菌、阪崎腸桿菌。這些噬菌體可能為多物種生物膜的控制提供新的策略。但是，很少有報(bào)道使用單一噬菌體控制由沙門氏菌和大腸桿菌形成的雙物種生物膜。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的第一目的在于提供了一種能夠同時(shí)裂解沙門氏菌和大腸桿菌的噬菌體STP55，以此來豐富噬菌體種庫，并進(jìn)一步發(fā)展一種新型的生物防治手段。

為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明所設(shè)計(jì)一株能同時(shí)裂解沙門氏菌和大腸桿菌的噬菌體STP55，所述噬菌體STP55為鼠傷寒沙門氏菌噬菌體(Salmonella?Typhimuriumbacteriophage)STP55，其保藏編號(hào)為：CCTCC?NO：M?2022085。