[發明專利]一種小鼠肺癌腦轉移細胞LLC-BMT3及其構建方法和應用

有效

• 申請號: 202210086902.6
• 申請日: 2022-01-25
• 公開（公告）號: CN114561360B
• 公開（公告）日: 2023-09-08
• 發明（設計）人: 周愛冬;王力;楊勇;李翠瑩
• 申請（專利權）人: 南方醫科大學
• 主分類號: C12N5/10
• 分類號: C12N5/10;C12N15/85;C12N15/65;A01K67/027;C12Q1/02;G01N33/574;C12R1/91
• 代理公司: 廣州粵高專利商標代理有限公司 44102
• 代理人: 趙崇楊

本發明公開了一種小鼠肺癌腦轉移細胞LLC?BMT3及其構建方法和應用。本發明所述小鼠肺癌腦轉移細胞LLC?BMT3于2022年1月20日保藏于中國典型培養物保藏中心，保藏編號為CCTCC?NO：C202228，保藏地址為中國武漢大學。所述小鼠肺癌腦轉移細胞LLC?BMT3的腦轉移發生率高，易于觀察，不僅適于構建肺癌腦轉移小鼠模型，用于篩選肺癌腦轉移的分子標志物，鑒定肺癌腦轉移的分子靶點，篩選或評估腦轉移性肺癌的治療藥物，還能用于免疫健全小鼠的肺癌腦轉移造模，開展肺癌細胞免疫逃逸及腦免疫微環境等相關研究，鑒定免疫治療新靶點，評估免疫治療效果，評估藥物在改善免疫微環境中的效果等。

技術領域

本發明屬于生物技術領域。更具體地，涉及一種小鼠肺癌腦轉移細胞LLC-BMT3及其構建方法和應用。

背景技術

腦轉移瘤是指中樞神經系統外的組織腫瘤細胞經血液循環系統進入顱內浸潤腦組織形成的轉移性腫瘤，為惡性腫瘤的一種晚期表現。腦腫瘤患者中，腦轉移瘤的數量大約是原發性腦腫瘤的10倍，是成年人最常見的顱內腫瘤。腦轉移瘤的發生常意味著不良的預后，未治療的患者中位生存期僅為1～2個月，經治療后延長為4～5個月，患者死因多為腦水腫、顱內高壓、腦疝、腦出血。臨床上腦轉移瘤的治療方法主要為外科手術、全腦放射治療、立體定向放射治療以及化療等，但總體來說治療效果欠佳。而腦轉移瘤的原發病灶以肺癌最為多見(40％～50％)，因此，對肺癌腦轉移機制的探索有著重要意義。

建立肺癌腦轉移實驗動物模型是進行肺癌腦轉移機制研究以及藥物篩選的基礎。目前，國內外學者多采用在左心室、頸動脈、尾動脈、尾靜脈等部位注射腫瘤細胞構建腫瘤轉移模型，但由于血腦屏障的存在以及腦部功能和結構的特殊性，建立穩定的腦轉移實驗動物模型十分困難，關于成功構建穩定的肺癌腦轉移動物模型的報道較少，且腦轉移發生率也不高。例如，中國專利《一種高潛能腦轉移中國人肺腺癌細胞株中》，通過取56歲女性肺腺癌患者十次化療，放療一次后產生的胸、腹水為細胞原代培養的材料，經培養獲得人肺腺癌腦轉移細胞株Yang2-腦M，通過裸鼠左心室種植試驗后，分離腦轉移灶經過三次篩選，獲得腦轉移發生率為60％的人肺腺癌腦轉移亞株。此外，此方法雖成功獲得了人肺腺癌腦轉移亞株，但其只能應用于免疫缺陷裸鼠的肺癌腦轉移模型構建，此種小鼠模型由于T淋巴細胞等免疫缺陷，無法開展腫瘤免疫逃逸及相關抗腫瘤藥物的研究。

發明內容

本發明要解決的技術問題是克服現有技術中的肺癌腦轉移細胞株腦轉移發生率低、只能應用于免疫缺陷小鼠、篩選和示蹤效果差等缺陷和不足，提供一種能應用于免疫健全小鼠且腦轉移發生率高的小鼠肺癌腦轉移細胞LLC-BMT3及其構建方法和應用。

本發明的第一個目的是提供一種小鼠肺癌腦轉移細胞LLC-BMT3。

本發明的第二個目的是提供所述小鼠肺癌腦轉移細胞LLC-BMT3的構建方法。

本發明的第三個目的是提供所述小鼠肺癌腦轉移細胞LLC-BMT3在構建肺癌腦轉移動物模型中的應用。

本發明的第四個目的是提供所述小鼠肺癌腦轉移細胞LLC-BMT3在肺癌腦轉移分子標志物篩選和分子靶點鑒定中的應用。

本發明的第五個目的是提供所述小鼠肺癌腦轉移細胞LLC-BMT3在篩選治療腦轉移性的肺癌的藥物中的應用。

本發明的第六個目的是提供所述小鼠肺癌腦轉移細胞LLC-BMT3在構建腫瘤免疫逃逸小鼠模型中的應用。

本發明的第七個目的是提供所述小鼠肺癌腦轉移細胞LLC-BMT3在構建腫瘤耐藥模型中的應用。

本發明的第八個目的是提供所述小鼠肺癌腦轉移細胞LLC-BMT3在開發肺癌腦轉移風險評估檢測試劑盒中的應用。

本發明上述目的通過以下技術方案實現：