[發明專利]一種血液培養報陽的檢測方法

在審

• 申請號: 202210086171.5
• 申請日: 2022-01-25
• 公開（公告）號: CN114414341A
• 公開（公告）日: 2022-04-29
• 發明（設計）人: 何浩睿
• 申請（專利權）人: 廈門元譜生物科技有限公司
• 主分類號: G01N1/28
• 分類號: G01N1/28;G01N27/64;G01N27/68
• 代理公司: 北京高沃律師事務所 11569
• 代理人: 吳波

本發明提供了一種血液培養報陽的檢測方法，屬于血液樣本檢測技術領域。本發明提供的血液培養報陽檢測方法，包括如下步驟：將血培養瓶樣品和基質液混合，采用質譜法對血培養瓶中分子量為10?1000Da的小分子成份進行監測，運用AI聚類分析算法，對比小分子成份的變化，實現對血培養瓶報陽檢測。本發明利用質譜的高靈敏度、同時能測多種分子的優勢，再結合AI算法，能夠大大縮短血液培養報陽時間，從而降低該感染的發病率和死亡率。

技術領域

本發明屬于血液樣本檢測技術領域，尤其涉及一種血液培養報陽的檢測方法。

背景技術

血液培養報陽的檢測是用于檢驗血液樣品中有無細菌存在的一種微生物學檢查方法。它是通過將血液接種到培養瓶中，利用培養瓶的營養液對血液感染的微生物進行培養，然后對微生物的生產繁殖情況進行監測。如果檢測有微生物，就發出報陽警報。因此，報陽率和報陽速度是血液培養報陽檢測最重要的兩個指標。

現有的血培養報陽的檢測方法主要以下幾種：1)法國bioMerieux公司生產的VITAL自動血培養(CN201280067584.3)，其檢測原理是液體培養瓶內含有發熒光物質的分子，微生物生長代謝過程中會產生二氧化碳(即碳酸)使得氫離子增加，發熒光的分子接受了這些物質后改變自身結構轉變為不發光的化合物，出現熒光衰減現象，一旦被測出，即提示有細菌生長。2)美國BD公司生產的BACTECV自動血培養儀，采用均質熒光增強檢測技術。培養瓶底部的熒光傳感器受細菌產生的代謝物質激發產生熒光，熒光強度隨著細菌數量的增加而不斷增強。系統根據熒光變化趨勢判斷有無微生物生長。3)荷蘭OrganonTeknika公司生產的BacT/alert自動血培養儀的檢測原理是在血培養瓶底部有一個固相感應器，感應器上有半滲透性薄膜將培養基與感應裝置隔離，只有二氧化碳能通過薄膜。當培養瓶內有細菌生長，其釋放的二氧化碳可滲透至感應器，經水飽和后，產生氫離子，使pH值發生改變，感應器的顏色也隨之改變，顏色由原來的綠色變成黃色，這一過程由一個置于檢測組件內部的光反射檢測計進行連續監測。4)武漢迪艾斯科技有限公司2017年11月6日(申請公布號CN 107699480 A)申請的一種血液培養檢測報陽裝置，采用的二氧化碳感應裝置測量血培養瓶內二氧化碳濃度變化狀態，從而判斷培養液中微生物生長狀態。

上述全部的檢測方法都是通過檢測培養液中微生物代謝過程中產生的氣體(二氧化碳)濃度或壓力的變化，間接地判斷微生物的生長狀態。因此存在著以下缺點：1)靈敏度低：首先，因為二氧化碳在培養瓶一部分以氣體狀態存在，另一部分溶解在培養液里，所以上述檢測方法只能部分采樣，必然會降低檢測靈敏度；其次，由于空氣自身含有超過0.03％含量的二氧化碳，因此本底高，也大大影響了靈敏度；2)適用范圍受限：上述檢測方法只能檢測那些生產代謝中產生二氧化碳的微生物，對不產二氧化碳的微生物就無法檢測；3)成本高：為了探測二氧化碳的變化，需要在血培養瓶中以特殊工藝添加二氧化碳的微生物指示劑，造成血培養瓶的成本昂貴。

發明內容

有鑒于此，本發明的目的在于提供一種靈敏度和準確率高，簡單快捷，報陽時間短的血液培養檢測方法。

為了實現上述發明目的，本發明提供了以下技術方案：

本發明提供了一種血液培養報陽的檢測方法，包括如下步驟：將血培養瓶樣品和基質液混合，采用質譜法對血培養瓶中小分子成份進行監測，運用AI聚類分析算法，對比小分子成份的變化，實現對血培養瓶報陽檢測；所述小分子成份的分子量為10-1000Da。

優選的，所述血培養瓶樣品為去除血細胞和分子量大于1000Da蛋白質的血清。

優選的，所述基質液包括如下原料：基質，有機溶劑，去離子超純水和三氟乙酸。

優選的，所述基質包括有機基質或無機基質，所述有機基質包括肉桂酸或2，5-二羥基苯甲酸。

優選的，所述乙腈和去離子超純水的體積比為為10：0～1：9。