[發(fā)明專利]一種斑石鯛RhoGEF10重組基因及性別鑒定方法和試劑盒

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202210083551.3
• 申請(qǐng)日: 2022-01-25
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN114107314B
• 公開(kāi)（公告）日: 2022-05-06
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 肖永雙;吳燕鐸;李軍;肖志忠;馬玉婷;趙海霞;馬道遠(yuǎn);劉靜
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)科學(xué)院海洋研究所
• 主分類號(hào): C12N15/12
• 分類號(hào): C12N15/12;C12Q1/6888;C12Q1/6879
• 代理公司: 沈陽(yáng)科苑專利商標(biāo)代理有限公司 21002
• 代理人: 李穎

本發(fā)明涉及基因重組技術(shù)領(lǐng)域，具體說(shuō)是一種斑石鯛RhoGEF10重組基因及性別鑒定方法和試劑盒。斑石鯛RhoGEF10重組基因?yàn)榘呤燫hoGEF10基因SEQ ID NO:1中第55位點(diǎn)和56位點(diǎn)之間插入DNA片段獲得斑石鯛RhoGEF10重組基因。本發(fā)明獲得斑石鯛X和Y染色體RhoGEF10基因同源區(qū)段且有大片段DNA插入重組標(biāo)記序列，建立斑石鯛重組RhoGEF10基因快速檢測(cè)方法，采用該方法可以快速、準(zhǔn)確和高效的鑒定待檢測(cè)斑石鯛RhoGEF10基因是否發(fā)生重組，縮短斑石鯛RhoGEF10基因重組準(zhǔn)確鑒定時(shí)間，提升檢測(cè)效率，并利用其進(jìn)行雌雄性別鑒定、高雄苗種制備和家系選育上具有重要的意義和應(yīng)用價(jià)值。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及基因重組技術(shù)領(lǐng)域，具體說(shuō)是一種斑石鯛RhoGEF10重組基因及性別鑒定方法和試劑盒。

背景技術(shù)

斑石鯛隸屬于鱸形目（Perciformes），石鯛科（Oplegnathidae），石鯛屬（Oplegnathus），主要分布于西太平洋溫?zé)釒ШＳ颍捎诎呤牼哂袛z食貝殼食性特點(diǎn)，可以清理養(yǎng)殖網(wǎng)箱網(wǎng)衣，節(jié)約了大量的人力資源和網(wǎng)衣清理成本，經(jīng)濟(jì)效益和生態(tài)效益極其顯著。斑石鯛又是我國(guó)本土自然種類，對(duì)其資源開(kāi)發(fā)及可持續(xù)利用具長(zhǎng)效性，養(yǎng)殖前景廣闊。斑石鯛雌魚染色體核型為2n=48，遺傳性別類型為（X₁X₁X₂X₂）；雄魚染色體核型為2n=47，含有1條巨大的異形染色體，遺傳性別類型為（X₁X₂Y）（薛蕊，安皓，劉清華，肖志忠，王彥豐，李軍. 斑石鯛（Oplegnathus punctatus）雌、雄魚核型及Ag-NORs帶型分析. 海洋與湖沼，2016，47(3)：626-632）。石鯛科魚類在養(yǎng)殖過(guò)程中存在顯著的雌雄生長(zhǎng)二態(tài)性，雄魚生長(zhǎng)速度快于雌魚，斑石鯛高雄苗種和全雄苗種的制備將促進(jìn)斑石鯛養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)的提質(zhì)增效，開(kāi)展斑石鯛苗種遺傳性別快速鑒定技術(shù)的研發(fā)將有助于斑石鯛優(yōu)良雄性種質(zhì)的儲(chǔ)備（肖志忠.條石鯛種群遺傳學(xué)及養(yǎng)殖生物學(xué)研究. 中國(guó)海洋大學(xué)，博士論文，2015）。

插入或缺失多態(tài)性是一種分子標(biāo)記，是DNA或者蛋白質(zhì)序列水平上發(fā)生頻率僅次于殘基替換的改變，主要表現(xiàn)為基因組中插入或者缺失了不同大小的片段化DNA。隨著比較基因組學(xué)的深入研究，插入或缺失多態(tài)性標(biāo)記的挖掘?yàn)檫z傳育種應(yīng)用研究提供了重要的生物信息。目前，該技術(shù)開(kāi)發(fā)研究主要集中在人類疾病、農(nóng)作物以及畜禽生長(zhǎng)性狀等具備全基因組信息的物種和類群上，在海洋動(dòng)物上的研究和應(yīng)用起步較晚和應(yīng)用甚少。由此，對(duì)海洋魚類的功能性基因的插入或缺失標(biāo)記研究亟待開(kāi)拓和深入。