[發明專利]一種基因重組串聯表達利那洛肽的工程菌在審
| 申請號: | 202210082694.2 | 申請日: | 2022-01-24 |
| 公開(公告)號: | CN114350587A | 公開(公告)日: | 2022-04-15 |
| 發明(設計)人: | 吳寅嵩;譚瑩瑩;萬民熙;金鋒;楊曉爽 | 申請(專利權)人: | 修實生物醫藥(南通)有限公司 |
| 主分類號: | C12N1/21 | 分類號: | C12N1/21;C12N15/70;C07K19/00;C12N15/62;C07K7/08;C12R1/19 |
| 代理公司: | 濟南市易拓知識產權代理事務所(普通合伙) 37325 | 代理人: | 江莉莉 |
| 地址: | 226006 江蘇省*** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 基因 重組 串聯 表達 工程 | ||
1.一種基因重組串聯表達利那洛肽的工程菌,其特征在于,保藏編號為CGMCC No.23800,分類命名為大腸埃希氏菌Escherichia coli,保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心。
2.如權利要求1所述工程菌在合成利那洛肽中應用。
3.如權利要求2所述工程菌在合成利那洛肽中應用,其特征在于,所述利那洛肽表達步驟包括:
(1)工程菌構建;
(2)搖瓶培養及發酵罐放大;
(3)融合蛋白提取;
(4)酶切及環化;
(5)純化及檢測。
4.如權利要求3所述工程菌在合成利那洛肽中應用,其特征在于,所述發酵參數為:溶氧30%-40%,pH=7.0,補料為70%葡萄糖。
5.如權利要求3所述工程菌在合成利那洛肽中應用,其特征在于,所述搖瓶培養的培養基為LB培養基,且含卡那霉素。
6.如權利要求3所述工程菌在合成利那洛肽中應用,其特征在于,所述搖瓶培養的接種量為1%。
7.如權利要求3所述工程菌在合成利那洛肽中應用,其特征在于,所述發酵過程添加IPTG。
8.如權利要求7所述工程菌在合成利那洛肽中應用,其特征在于,加入IPTG后進一步誘導并收集,優選地,誘導溫度為25-37℃,誘導時間為4-12h,最優的,誘導溫度為30℃,誘導時間為8h。
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