[發(fā)明專利]一種基因重組串聯(lián)表達(dá)利那洛肽的融合蛋白及表達(dá)利那洛肽的方法

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• 申請?zhí)枺?/td>: 202210080690.0
• 申請日: 2022-01-24
• 公開（公告）號: CN114507293A
• 公開（公告）日: 2022-05-17
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 吳寅嵩;譚瑩瑩;萬民熙;陳麗麗;李素雯;曹煜梟
• 申請（專利權(quán)）人: 修實(shí)生物醫(yī)藥（南通）有限公司
• 主分類號: C07K19/00
• 分類號: C07K19/00;C12N15/62;C12N15/70;C07K7/08
• 代理公司: 濟(jì)南市易拓知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 37325
• 代理人: 江莉莉

1.一種用于基因重組串聯(lián)表達(dá)利那洛肽的融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白包含融合標(biāo)簽和串聯(lián)的利那洛肽。

2.如權(quán)利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述利那洛肽串聯(lián)數(shù)為1-10個，優(yōu)選為3-8個。

3.如權(quán)利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述融合標(biāo)簽為TrxA或SUMO或GST或MBP，優(yōu)選為TrxA或SUMO。

4.如權(quán)利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白的核苷酸序列為SEQ IDNO:5,7,9,11,13,15,17,21，25或29。

5.如權(quán)利要求1所述的融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白的氨基酸序列為

SEQ ID NO:6,8,10,12,14,16,18,22,26或30。

6.如權(quán)利要求1所述的融合蛋白在表達(dá)利那洛肽中的應(yīng)用。

7.如權(quán)利要求6所述的融合蛋白在表達(dá)利那洛肽中的應(yīng)用，其特征在于，所述利那洛肽表達(dá)步驟包括：

（1）工程菌構(gòu)建；

（2）搖瓶培養(yǎng)及發(fā)酵罐放大；

（3）融合蛋白提取；

（4）酶切及環(huán)化；

（5）純化及檢測。

8.如權(quán)利要求6所述的融合蛋白在表達(dá)利那洛肽中的應(yīng)用，其特征在于，所述工程菌構(gòu)建步驟為：構(gòu)建利那洛肽融合串聯(lián)表達(dá)基因，根據(jù)大腸桿菌密碼子偏好性，優(yōu)化相關(guān)基因序列后人工合成基因片段，插入質(zhì)粒，轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21(DE3)感受態(tài)細(xì)胞。

9.編碼如權(quán)利要求1所述的融合蛋白的編碼基因。

10.一種包含權(quán)利要求9所述的編碼基因的重組載體。