[發明專利]一種用于小麥葉片表面苯菌酮的質譜成像檢測方法

在審

• 申請號: 202210080058.6
• 申請日: 2022-01-24
• 公開（公告）號: CN114705748A
• 公開（公告）日: 2022-07-05
• 發明（設計）人: 周磊;張學維;洪明慧;楊雪瑞;萬子豪;修光利;陳治;洪慧;王芳芳;金紫薷;史叢閃
• 申請（專利權）人: 華東理工大學
• 主分類號: G01N27/64
• 分類號: G01N27/64;G01N1/28;G01N1/36;G01N1/42
• 代理公司: 上海智信專利代理有限公司 31002
• 代理人: 宋麗榮

本發明涉及一種用于小麥葉片表面苯菌酮的質譜成像檢測方法，其包括如下步驟：S1，提供表面附著有苯菌酮的小麥葉片；S2，將基質通過升華法涂覆到小麥葉片的表面；S3，設置噴涂厚度為0.7μm?1.5μm，激光斑點直徑及激光強度為(40μm?75μm，56.4％?71.0％)和成像步長為(30μm?50μm，30μm?50μm)進行MALDI?MSI分析。根據本發明的用于小麥葉片表面苯菌酮的質譜成像檢測方法，通過限定涂覆方法和儀器參數能夠有效避免基質對目標物的干擾，通過儀器參數優化使得成像熱圖清晰直觀。

技術領域

本發明涉及分子成像技術領域，更具體地涉及一種用于小麥葉片表面苯菌酮的質譜成像檢測方法。

背景技術

苯菌酮(MF)是主要用于防治禾谷類作物、番茄、黃瓜和葡萄白粉病和眼點病的一種二苯甲酮類殺菌劑，由于其良好的預防和治療效果，目前已經多種農作物上大量應用。該農藥的施藥方式一般為兌水后噴灑于農作物葉片表面，但目前并沒有能直接在實際葉片表面檢測物質種類及濃度的分析檢測儀器裝置。

質譜成像法(Mass Spectrometry Imaging，MSI))是由質譜技術發展而來的一種新型分子成像技術。它通過直接掃描生物組織切片，同時獲得生物分子的定性、定量和定位的信息，具有免標記、高通量和高分辨等優點，在藥物分析、癌癥研究和環境毒理等各種研究領域具有廣泛的應用前景。然而，對農藥分子而言(尤其是苯菌酮)，使用質譜成像法精確獲得其在實際葉片表面的空間分布及直接檢測其濃度的實際范例十分匱乏。同時，使用MSI分析農藥分子時需要加入基質，而現有技術中常用的基質易對目標物產生較大干擾。

發明內容

為了解決上述現有技術中的農藥難以在植物葉片表面直接進行分析的問題，本發明提供一種用于小麥葉片表面苯菌酮的質譜成像檢測方法。

根據本發明的用于小麥葉片表面苯菌酮的質譜成像檢測方法，其包括如下步驟：S1，提供表面附著有苯菌酮的小麥葉片；S2，將基質通過升華法涂覆到小麥葉片的表面；S3，設置噴涂厚度范圍為0.7μm-1.5μm，激光斑點直徑及激光強度范圍為(40μm-75μm，56.4％-71.0％)和成像步長為(30μm-50μm，30μm-50μm)進行MALDI-MSI分析。

優選地，在步驟S1中，小麥葉片表面附著的苯菌酮的沉積量≥2.0ng。在一個優選的實施例中，小麥葉片表面附著的苯菌酮的濃度為100μM，沉積量為40.0ng。

優選地，在步驟S2中，基質為CHCA或DHB。

優選地，步驟S2具體包括：在升華儀的狹縫腔體中裝入基質的粉末以進行涂覆。

優選地，升華儀設定基質的涂覆厚度為1.2μm。

優選地，該質譜成像檢測方法還包括結合冷凍切片技術觀察苯菌酮在小麥葉片中的縱向截面分布。

優選地，該質譜成像檢測方法還包括配置不同濃度梯度的苯菌酮溶液，利用質譜成像儀建立外標法標準曲線，以對苯菌酮進行定量分析。

優選地，確定濃度檢測限的苯菌酮溶液的濃度梯度為1μM、5μM、10μM、15μM、20μM。

優選地，外標法標準曲線的苯菌酮濃度分別為20μM、50μM、80μM、100μM。