[發(fā)明專(zhuān)利]一種重組新型冠狀病毒蛋白疫苗、其制備方法和應(yīng)用

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202210073510.6
• 申請(qǐng)日: 2022-01-21
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN114315989A
• 公開(kāi)（公告）日: 2022-04-12
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李啟明;梁宇;蘇計(jì)國(guó);侯俊偉;韓子泊;張靖;張學(xué)峰;靳玉琴;劉兆明;杜麗芳;雷澤華;唐芳;張浩;邵帥;侯亞楠;馬智靜;陳實(shí);鄭凡;劉寧;沈福杰
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 國(guó)藥中生生物技術(shù)研究院有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): C07K14/165
• 分類(lèi)號(hào): C07K14/165;C07K19/00;C12N15/50;C12N15/62;C12N15/85;A61K39/215;A61P31/14
• 代理公司: 北京東巖躍揚(yáng)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11559
• 代理人: 谷岳

1.一種重組新型冠狀病毒蛋白，所述重組新型冠狀病毒蛋白為三聚體，包括三個(gè)由新型冠狀病毒S蛋白R(shí)BD區(qū)域第319～537位氨基酸片段構(gòu)成的亞基，其特征在于，

所述重組新型冠狀病毒蛋白的第一個(gè)亞基中包括L452R和/或T478K突變位點(diǎn)；和

所述重組新型冠狀病毒蛋白的第二個(gè)亞基中包括選自K417N、E484K或N501Y突變位點(diǎn)中的一個(gè)或一個(gè)以上；和

所述重組新型冠狀病毒蛋白的第三個(gè)亞基中包括選自G339D、S371L、S373P、S375F、K417N、N440K、G446S、S477N、T478K、E484A、Q493R、G496S、Q498R、N501Y或Y505H突變位點(diǎn)中的五個(gè)或五個(gè)以上。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的重組新型冠狀病毒蛋白，其特征在于，所述重組新型冠狀病毒蛋白的三個(gè)亞基的一級(jí)結(jié)構(gòu)為所述三個(gè)亞基按照N末端至C末端的順序首位串聯(lián)。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的重組新型冠狀病毒蛋白，其特征在于，所述重組新型冠狀病毒蛋白的三個(gè)亞基按照所述第一個(gè)亞基、所述第二個(gè)亞基、所述第三個(gè)亞基的順序串聯(lián)。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的重組新型冠狀病毒蛋白，其特征在于，所述重組新型冠狀病毒蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.1-11所示或與其除所述突變位點(diǎn)外的氨基酸序列具有95％以上同源性的序列，優(yōu)選為如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列或與其除所述突變位點(diǎn)外的氨基酸序列具有95％以上同源性的序列。

5.一種融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白的氨基酸序列包含如權(quán)利要求1～4任意一項(xiàng)中所述的重組新型冠狀病毒蛋白的氨基酸序列。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白還包含選自信號(hào)肽、標(biāo)簽或免疫增強(qiáng)肽中的一種或幾種。

7.一種核酸分子，其特征在于，所述核酸分子包含編碼如權(quán)利要求1～4任意一項(xiàng)中所述的重組新型冠狀病毒蛋白，或編碼如權(quán)利要求5或6所述的融合蛋白的核苷酸序列。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的核酸分子，其特征在于，所述核酸分子的核苷酸序列為如SEQID No.12-22所示的核苷酸序列。

9.一種載體，其特征在于，所述載體包含如權(quán)利要求7所述的核酸分子。

10.一種宿主細(xì)胞，其特征在于，所述宿主細(xì)胞包含如權(quán)利要求7所述的核酸分子或如權(quán)利要求9所述的載體。

11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的宿主細(xì)胞，其特征在于，所述宿主細(xì)胞為大腸桿菌、酵母細(xì)胞、昆蟲(chóng)細(xì)胞或哺乳動(dòng)物細(xì)胞。

12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的宿主細(xì)胞，其特征在于，所述宿主細(xì)胞為CHO細(xì)胞。

13.如權(quán)利要求1～4任意一項(xiàng)中所述的重組新型冠狀病毒蛋白或如權(quán)利要求5或6所述的融合蛋白的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

步驟A)制備如權(quán)利要求7所述的核酸分子，構(gòu)建該核酸分子的表達(dá)載體，將表達(dá)載體轉(zhuǎn)化或轉(zhuǎn)染至宿主細(xì)胞內(nèi)；

步驟B)利用步驟A)的產(chǎn)物進(jìn)行蛋白質(zhì)表達(dá)；

步驟C)純化步驟B)中獲得的表達(dá)產(chǎn)物，得到所述重組新型冠狀病毒蛋白或融合蛋白。

14.如權(quán)利要求1～4任意一項(xiàng)中所述的重組新型冠狀病毒蛋白、如權(quán)利要求5或6所述的融合蛋白、如權(quán)利要求7所述的核酸分子、如權(quán)利要求9所述的載體或如權(quán)利要求10所述的宿主細(xì)胞在制備用于治療和/或預(yù)防新型冠狀病毒感染和/或新型冠狀病毒引起的疾病的藥物中的用途。