[發(fā)明專利]一種與無精子癥有關(guān)的分子標(biāo)志物3-(3-羥基苯基)丙酸及其檢測(cè)方法和應(yīng)用

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202210073093.5
• 申請(qǐng)日: 2022-01-21
• 公開（公告）號(hào): CN114414695A
• 公開（公告）日: 2022-04-29
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 沙家豪;袁艷;陳敏健;楊曉玉;王嘉琛;姚瑩
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 蘇州南醫(yī)大創(chuàng)新中心
• 主分類號(hào): G01N30/02
• 分類號(hào): G01N30/02;G01N30/54;G01N30/72;C07C59/52
• 代理公司: 蘇州謹(jǐn)和知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 32295
• 代理人: 許冬瑩

本發(fā)明涉及一種與無精子癥有關(guān)的分子標(biāo)志物3?(3?羥基苯基)丙酸及其檢測(cè)方法和應(yīng)用，屬于分析化學(xué)及臨床醫(yī)學(xué)技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明通過采用UPLC?Qexactive?MS比較正常對(duì)照和無精子癥中精液的代謝小分子，發(fā)現(xiàn)了精液中存在可用于評(píng)估是否患有無精子癥的具有診斷價(jià)值的3?(3?羥基苯基)丙酸，以及檢測(cè)該物質(zhì)的UPLC?Q?exactive?MS的應(yīng)用，研制出可便于臨床應(yīng)用的無精子癥診斷、監(jiān)測(cè)試劑盒。代謝小分子是一種新型生物標(biāo)志物，其與疾病結(jié)局關(guān)聯(lián)強(qiáng)、穩(wěn)定、無創(chuàng)、易于檢測(cè)、定量精確。本發(fā)明提供的3?(3?羥基苯基)丙酸可用作無精子癥的診斷標(biāo)志物，為臨床醫(yī)生進(jìn)一步深入檢查提供依據(jù)，為快速準(zhǔn)確掌握患者的疾病狀態(tài)和病情嚴(yán)重程度、及時(shí)采取防治方案提供支持，延緩和阻止疾病進(jìn)展。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種與無精子癥有關(guān)的分子標(biāo)志物3-(3-羥基苯基)丙酸及其檢測(cè)方法和應(yīng)用，屬于分析化學(xué)及臨床醫(yī)學(xué)技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

據(jù)世界衛(wèi)生組織(WHO)統(tǒng)計(jì)全世界約有15％的育齡夫婦遭受不育的困擾。我國(guó)由于人口基數(shù)大,新婚夫婦中不孕不育的患者人數(shù)遠(yuǎn)超過百萬,因男性因素導(dǎo)致的不育高于50％。無精子癥的發(fā)生率占男性不育癥的10％-20％。尋找與無精子癥有關(guān)的生物標(biāo)志以輔助或者替代精液參數(shù)分析非常迫切。男性科學(xué)的技術(shù)進(jìn)步可有效彌補(bǔ)常規(guī)精液分析的不足,為無精子癥的診斷提供了新的方法并且可為無精子癥的發(fā)生機(jī)制提供新的視角。當(dāng)務(wù)之急是提供一種對(duì)生育能力進(jìn)行客觀評(píng)估的方法。組學(xué)技術(shù)包含了基因組學(xué)、轉(zhuǎn)錄組學(xué)、蛋白組學(xué)和代謝組學(xué)。代謝組學(xué)是一種新興的技術(shù),可以用于疾病診斷的生物標(biāo)志的發(fā)現(xiàn)并且可以揭示疾病發(fā)生的機(jī)制。代謝組學(xué)揭示了發(fā)生在基因、轉(zhuǎn)錄和蛋白層面之下的分子事件,被認(rèn)為是最近接近疾病表型的組學(xué)。目前,無精子癥的精漿代謝組改變?nèi)匀晃粗?精漿為精液的主要成分，精漿調(diào)節(jié)了精液的化學(xué)成分,是一種無創(chuàng)傷的樣本,特別適合用來發(fā)現(xiàn)無精子癥診斷和機(jī)制研究的生物標(biāo)志。

目前代謝組學(xué)研究常用技術(shù)包括液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(LC-MS)、氣象色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(GC-MS)及核磁共振技術(shù)(NMR)。核磁共振技術(shù)特點(diǎn)是對(duì)待測(cè)組分無破壞,樣本前處理簡(jiǎn)單,但靈敏度較低；氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用具有較好的靈敏度和重現(xiàn)性,但一般要采用衍生化方法對(duì)樣本進(jìn)行前處理,使得實(shí)驗(yàn)步驟變得復(fù)雜。而LC-MS具有樣本處理簡(jiǎn)單,靈敏度高,臨床實(shí)用性強(qiáng)的特點(diǎn).UPLC-Q?exactive?MS是新一代高分辨質(zhì)譜與超高效液相的組合,具有相比傳統(tǒng)LC-MS更強(qiáng)的靈敏度、特異度和穩(wěn)定性。故而采用UPLC-Q?exactive?MSS進(jìn)行精漿代謝小分子的代謝組學(xué)分析,若能發(fā)現(xiàn)穩(wěn)定的與特發(fā)性男性不育發(fā)病相關(guān)的特異精漿代謝小分子作為生物標(biāo)志物,并研發(fā)相應(yīng)的代謝小分子標(biāo)志的UPLC-Q?exactive?MS檢測(cè)方法，將為男性生殖健康做出巨大貢獻(xiàn)。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的一個(gè)目的在于提供一種與無精子癥提供相關(guān)的分子標(biāo)志物3-(3-羥基苯基)丙酸。

本發(fā)明另一個(gè)目的是為將分子標(biāo)志物3-(3-羥基苯基)丙酸用于無精子癥診斷提供基于UPLC-Q?exactive?MS的應(yīng)用。

本發(fā)明再有一個(gè)目的是為上述分子標(biāo)志物3-(3-羥基苯基)丙酸提供色譜質(zhì)譜用檢測(cè)和診斷試劑盒。

為達(dá)到上述目的，本發(fā)明提供如下技術(shù)方案：一種無精子癥相關(guān)的分子標(biāo)志物3-(3-羥基苯基)丙酸，所述分子標(biāo)志物為3-(3-羥基苯基)丙酸。

本發(fā)明還提供一種使用如上所述的分子標(biāo)志物3-(3-羥基苯基)丙酸在制備以精液為檢測(cè)樣本的無精子癥診斷或監(jiān)測(cè)試劑中的應(yīng)用。

本發(fā)明再提供一種使用如上所述的分子標(biāo)志物3-(3-羥基苯基)丙酸制備的無精子癥診斷或監(jiān)測(cè)試劑盒，包括：

3-(3-羥基苯基)丙酸標(biāo)準(zhǔn)品；

內(nèi)標(biāo)A：肌酐﹑纈氨酸、煙酸、胸腺密啶、戊二酸、L-苯基丙胺酸、N-乙酰對(duì)氨基酚、馬尿酸八種物質(zhì)的氛標(biāo)同位素內(nèi)標(biāo)；

內(nèi)標(biāo)B：十五烷酸的氬標(biāo)同位素內(nèi)標(biāo)；