[發(fā)明專利]一種大體積全自動核酸提取方法及裝置

在審

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• 申請日: 2022-01-21
• 公開（公告）號: CN114410427A
• 公開（公告）日: 2022-04-29
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 吳彬;傅國;胡李均
• 申請（專利權(quán)）人: 湖南博朔生物科技有限公司
• 主分類號: C12M1/00
• 分類號: C12M1/00;C12N15/10
• 代理公司: 長沙市和協(xié)專利代理事務(wù)所(普通合伙) 43115
• 代理人: 曹文娟

本發(fā)明提供一種大體積全自動核酸提取方法及裝置，屬于試劑檢測設(shè)備技術(shù)領(lǐng)域。所述核酸提取方法為將試劑、耗材裝載在指定位置；移液機械臂自動取Tips頭，依次從樣本區(qū)和試劑區(qū)轉(zhuǎn)移樣本和試劑到深孔板；核酸提取裝置完成混合、裂解、提取、純化；移液機械臂將試劑區(qū)的PCR反應(yīng)體系構(gòu)建試劑轉(zhuǎn)移至反應(yīng)構(gòu)建系統(tǒng)區(qū)八聯(lián)管內(nèi)，并將深孔板內(nèi)的純化后的核酸轉(zhuǎn)移至八聯(lián)管中；收集處理廢棄物。本發(fā)明提供用于全自動高通量大體積的核酸提取裝置和方法，采用移液工作站和磁棒套相結(jié)合優(yōu)化分工方法和結(jié)構(gòu)布局完成全自動高通量的大體積核酸提取，其過程自動化程度高、通量大、效率快，且針對多樣本混檢核酸丟失少，保證檢測靈敏度。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于試劑檢測設(shè)備技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種大體積全自動核酸提取方法及裝置。

背景技術(shù)

目前臨床上分子診斷新技術(shù)主要包括核酸檢測和基因檢測。他們均需要從各種樣本中提取核酸DNA/RNA，核酸檢測是檢查樣本中病毒DNA/RNA，受到現(xiàn)有商業(yè)化提取裝置限定，通常檢測樣本體積較低，不超過200ul，因此限定了檢測方式的擴展及限制了檢測的靈敏度。基因檢測是檢查樣本中DNA/RNA從而進行大數(shù)據(jù)分析比對，通常基因檢測要求樣本量體積較大，且提取過程反應(yīng)溶液容置體積要求較大，同樣受現(xiàn)有商業(yè)化影響，目前自動化程度較低。

比如，新型冠狀病毒COVID-19病毒是由蛋白包裹的單鏈正義RNA病毒，新冠病毒的遺傳物質(zhì)RNA是病毒存在的直接證據(jù)，熒光定量PCR核酸檢測技術(shù)通過特異性的檢測病毒RNA被用于疾病的鑒別診斷，目前在用的新冠病毒熒光定量PCR核酸檢測方法需要從樣本中提取RNA作為PCR的模板，在高危險、快傳染的特性下，大批量快速篩查是遏制病毒擴散的重要手段，但現(xiàn)有RNA提取技術(shù)和裝置是RNA模板快速提取過程中的主要瓶頸，另外，受限于現(xiàn)有的提取方法，包括提取樣本體積不夠大，尤其含量低拷貝核酸的樣本，RNA獲得率較低，導(dǎo)致無法準確進行鑒別診斷。

現(xiàn)有技術(shù)中，多采用磁珠法進行核酸提取，高通量自動化方案可適用的樣本量體積通常較低(50-200ul)，而樣本量體積高的核酸提取自動化程度低，通常先由人工完成大體積的處理。針對大體積需求(比如：基因檢測、生物樣本庫的核酸提取、多個樣本混檢)的核酸檢測自動化，現(xiàn)有技術(shù)無法滿足。從多個樣本混檢的角度(新冠疫情普篩檢查需求)，高通量自動化提取受到現(xiàn)有技術(shù)樣本體積較低的影響，多樣本相互稀釋，目標核酸濃度降低，從而降低了靈敏度。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明通過提供一種大體積全自動核酸提取方法及裝置，以解決現(xiàn)有大體積核酸提取自動化程度低的技術(shù)問題。

為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明的技術(shù)解決方案是：

一種大體積全自動核酸提取方法，包括以下步驟：

S1：將試劑、耗材裝載在指定位置；將樣本放置在樣本區(qū)的樣本管載架，樣本管載架在裝載時，利用掃描裝置掃描樣本信息，感應(yīng)裝置感應(yīng)樣本管載架的存在和位置；

S2：利用移液裝置在Tips頭區(qū)自動取Tips頭，將Tips頭移動到樣本區(qū)感應(yīng)樣本管載架中的樣本管，探測樣本管位置以及樣本管內(nèi)的液量；

S3：移液裝置根據(jù)樣本數(shù)量，自動計算選擇移液泵運行數(shù)量，然后移液泵將樣本轉(zhuǎn)移至核酸提取區(qū)的深孔板內(nèi)；

S4：完成樣本轉(zhuǎn)移后，移液裝置轉(zhuǎn)移裂解液至深孔板；

S5：核酸提取裝置自動將裝載深孔板的底板移動至核酸提取裝置的機械臂正下方，核酸提取裝置中機械臂對深孔板中的溶液振蕩混勻；

S6：振蕩混勻后，深孔板載架上的加熱裝置開啟對深孔板內(nèi)的液體進行加熱，以完成裂解；

S7：裂解完成后，核酸提取裝置自動將底板以及深孔板推出，移液裝置通過移液泵分別將磁珠溶液、提取試劑至不同的深孔板對應(yīng)列；