[發明專利]一種改善大腦認知記憶和神經炎癥的復合脂質體及其制備方法

有效

• 申請號: 202210071455.7
• 申請日: 2022-01-21
• 公開（公告）號: CN114470236B
• 公開（公告）日: 2023-09-08
• 發明（設計）人: 劉夫國;徐文浛;馬德雪;王玉堂;劉學波
• 申請（專利權）人: 西北農林科技大學
• 主分類號: A61K47/69
• 分類號: A61K47/69;A61K47/61;A61K47/64;A61K31/353;A61P25/28;A61P25/00;A61P29/00;A61P39/06;A61K31/12
• 代理公司: 北京東方盛凡知識產權代理有限公司 11562
• 代理人: 程小芳

本發明公開了一種改善大腦認知記憶和神經炎癥的復合脂質體及其制備方法，屬于脂質體制備技術領域。制備了能夠同時負載疏水性物質姜黃素和親水性物質表沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCG)的脂質體，并在此基礎上，利用乳鐵蛋白對其進行表面修飾，通過靜電相互作用采用透明質酸進一步穩定體系。本發明方法所得的復合脂質體具有良好的穩定性和自由基清除效率，可以顯著抑制脂多糖誘導的認知功能障礙，用于改善大腦認知記憶和神經炎癥。

技術領域

本發明涉及脂質體制備技術領域，特別是涉及一種改善大腦認知記憶和神經炎癥的復合脂質體及其制備方法。

背景技術

隨著人類生活方式的改變，神經系統疾病已成為人類健康的威脅。神經炎癥是觸發和維持與許多神經疾病相關的神經退行性過程的關鍵病理事件。研究表明，食品中的天然成分在緩解神經系統疾病方面已發揮出很大潛力。

姜黃素是提取自姜黃根莖的疏水多酚，具有抗氧化和抗炎等生物學活性和藥理活性，能夠通過抑制NF-κB與淀粉樣斑塊結合，從而減少阿爾茨海默病的發生和發展。表沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCG)是一種水溶性多酚，具有良好的抗氧化活性，可清除體內自由基。姜黃素和EGCG均表現出對鐵誘導的毒性的抵抗作用，在健康促進方面已顯示出協同作用，但是姜黃素和EGCG具有較低的穩定性和較高的藥代動力學差異，從而削弱了其功效。

發明內容

為提高不同極性多酚姜黃素和EGCG的生物利用度及生物活性，本發明使用乳鐵蛋白和透明質酸修飾脂質體，并對姜黃素和EGCG進行共包埋。本發明制備的脂質體具有抗氧化能力強的特點，能夠改善細胞線粒體功能障礙，降低細胞內ROS的產生，緩解突觸功能障礙與神經元損傷，抑制小膠質細胞的激活，改善脂多糖誘導的神經炎癥及其相關的認知功能障礙。

為實現上述目的，本發明提供了如下方案：

本發明提供一種改善大腦認知記憶和神經炎癥的復合脂質體，包括載藥脂質體和外層修飾乳鐵蛋白和透明質酸的復合脂質體，所述載藥脂質體為共包埋有姜黃素和表沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCG)的脂質體。

本發明提供所述改善大腦認知記憶和神經炎癥的復合脂質體的制備方法，包括如下步驟：

將磷脂、膽固醇、吐溫80和姜黃素溶解在混合溶劑中，充分溶解后轉移到圓底燒瓶中，利用旋轉蒸發儀將溶劑蒸干，向上述樣品中加入EGCG水溶液，旋蒸后使用超聲細胞破碎儀使體系分散，得到均勻分散的脂質體溶液，過濾，使用氮氣封裝，將乳鐵蛋白溶液、透明質酸溶液依次逐滴添加到脂質體溶液中，攪拌，使其充分反應，獲得復合脂質體。

進一步地，所述制備方法具體包括如下步驟：

步驟1:采用薄膜超聲法，將磷脂(優選蛋黃磷脂)、膽固醇、吐溫80和姜黃素溶解在有機溶劑氯仿和乙醇的混合溶液(二者體積比2:1)中。

步驟2:將步驟1所得的混合溶液轉移到圓底燒瓶中，利用旋轉蒸發儀將溶劑蒸發干，將樣品放到真空干燥箱中過夜，將有機試劑徹底蒸發掉。

步驟3:向步驟2所得樣品中加入EGCG水溶液，旋蒸水合樣品。

步驟4:將步驟3所得溶液放置在超聲細胞破碎儀中使體系分散，得到均勻分散的脂質體溶液。

步驟5:使用濾膜(0.22μm)過濾，除去未包封的多酚(姜黃素和EGCG)，整個過程避光處理，最后用氮氣封裝。

步驟6:稱取乳鐵蛋白溶液溶解于蒸餾水中，超聲處理使乳鐵蛋白充分溶解，得到乳鐵蛋白溶液。

步驟7:將步驟6所得的乳鐵蛋白溶液逐滴添加到脂質體溶液中，置于磁力攪拌器中攪拌，使其充分反應。

步驟8:稱取透明質酸溶液溶解于蒸餾水中，完全溶解。