[發明專利]一種植物油中黃曲霉毒素B1的拉曼快速檢測方法

在審

• 申請號: 202210068243.3
• 申請日: 2022-01-20
• 公開（公告）號: CN114594081A
• 公開（公告）日: 2022-06-07
• 發明（設計）人: 李園;張馳中;馬海建;趙志慧;于永愛;陳娟
• 申請（專利權）人: 上海安譜實驗科技股份有限公司;上海如海光電科技有限公司
• 主分類號: G01N21/65
• 分類號: G01N21/65
• 代理公司: 上?？坡蓪＠硎聞账?特殊普通合伙) 31290
• 代理人: 金碎平

本發明公開了一種植物油中黃曲霉毒素B1的拉曼快速檢測方法，包括：S1)植物油處理：稱取適量植物油待檢樣品，加入一定量提取液和凈化填料，渦旋或超聲振蕩后離心，取上清液待用；S2)液液萃取：在上清液中加入有機試劑，進行液液萃取，靜置分層后取有機相層備用；S3)富集：取有機相層液體1?3mL于瓶中進行氮氣吹干，加入復溶液復溶；S4)拉曼檢測：取上述富集后的液體與納米金屬粒子、輔助增強試劑混合均勻后進行檢測。本發明通過簡單前處理結合金屬納米粒子的表面增強拉曼散射效應，滿足黃曲霉毒素B1在植物油中簡單、快速、廉價、高靈敏度等方面的檢測需求。

技術領域

本發明涉及一種植物油檢測方法，尤其涉及一種植物油中黃曲霉毒素B1的拉曼快速檢測方法。

背景技術

我國是植物油生產和消費大國，食用油是居民日常消費必需品之一，為人體提供必需的脂肪酸及亞油酸等人體所需營養物質，在人們飲食體系中占有重要位置。植物油種類非常豐富，常見的食用植物油主要有大豆油、玉米油、菜籽油、花生油、油茶籽油、芝麻油等。近年來居民對油品質量愈發關注，國家對居民食用油質量安全問題也高度重視，其中由于食用植物油的原料和加工屬性，極易受到黃曲霉毒素的污染。天然食物中以黃曲霉毒素B1(Aflatoxin B1，AFB1)最為多見，黃曲霉毒素B1是二氫呋喃氧雜萘鄰酮的衍生物，含有一個雙呋喃環和一個氧雜萘鄰酮(香豆素)。黃曲霉毒素B1是已知的化學物質中致癌性最強的一種，黃曲霉毒素B1對人類具有強烈的毒性，黃曲霉毒素B1的急性毒性是氰化鉀的10倍，砒霜的68倍，且黃曲霉毒素耐熱性強，280℃才可分解，故一般烹調加工溫度下難以破壞，國家質檢總局規定黃曲霉毒素B1是大部分食品的必檢項目之一。依次提供一種簡單、高效、準確、快速的黃曲霉毒素B1檢測方法對植物油質量安全監管問題有著重要意義。

目前，常用的檢測方法是膠體金法、薄層層析法、酶聯免疫法、高效液相色譜法，液質聯用等，但這些方法存在各種不足，膠體金法靈敏度較低；薄層層析法對檢測的規范和熟練度要求較高，準確度較差；酶聯免疫吸附測定法檢測時，易出現假陽性誤判，需要采用高效液相色譜法或氣相色譜-質譜法進行確證；高效液相色譜法方法簡單，檢測限低，但免疫親和柱價格昂貴，成本較高，對儀器設備、操作人員的要求較高，耗時較長，在檢測過程中往往是作為確認檢驗方法。

在中國專利文獻CN 107462564B中公開了一種基于銀超晶體的黃曲霉毒素B1快速免標記檢測方法，該方法采用超大孔介孔二氧化硅模板負載銀結合多元校正方法建立黃曲霉毒素B1測試模型，但未介紹植物油樣本中黃曲霉毒素B1具體分離、提取方法。該方法所用增強基底合成方法復雜、步驟繁瑣且該模型建立需要一定計算機專業背景，普通分析測試人員不易通過該方法得到準確的黃曲霉毒素B1信號。

在中國專利文獻CN106928397A中和中國專利文獻CN106442465A中公布了兩種黃曲霉毒素B1拉曼檢測方法，這兩種方法均存在所用SERS基底合成難度大、樣品凈化、富集方法表述不清問題，不適合海關口岸現場執法使用。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是提供一種植物油中黃曲霉毒素B1的拉曼快速檢測方法，能夠現場采集植物油樣本，并通過簡單前處理結合金屬納米粒子的表面增強拉曼散射效應，來滿足黃曲霉毒素B1在植物油中簡單、快速、廉價、高靈敏度等方面的檢測需求。

本發明為解決上述技術問題而采用的技術方案是提供一種植物油中黃曲霉毒素B1的拉曼快速檢測方法，包括如下步驟：S1)植物油處理：稱取適量植物油待檢樣品，加入一定量提取液和凈化填料，渦旋或超聲振蕩后離心，取上清液待用；S2)液液萃?。涸谏锨逡褐屑尤胗袡C試劑，進行液液萃取，靜置分層后取有機相層備用；S3)富集：取有機相層液體1-3mL于瓶中進行氮氣吹干，加入復溶液復溶；S4)拉曼檢測：取上述富集后的液體與納米金屬粒子、輔助增強試劑混合均勻后進行檢測。

進一步地，所述步驟S1中提取液為甲醇、乙醇和乙腈中一種。

進一步地，所述步驟S1中提取液的質量百分濃度為70％-90％。