[發明專利]一種基于心肌視黃醇代謝紊亂的成年小鼠心衰模型的構建方法

有效

• 申請號: 202210066945.8
• 申請日: 2022-01-20
• 公開（公告）號: CN114451357B
• 公開（公告）日: 2023-06-16
• 發明（設計）人: 蔡衛斌;吳燕笛
• 申請（專利權）人: 中山大學
• 主分類號: A01K67/027
• 分類號: A01K67/027
• 代理公司: 廣州粵高專利商標代理有限公司 44102
• 代理人: 孫鳳俠

本發明提供了一種基于心肌視黃醇代謝紊亂的成年小鼠心衰模型的構建方法，該方法首先使RDH10supgt;fl/fl/supgt;小鼠與MYH6?iCre小鼠交配，得到同時帶有RDH10supgt;fl/fl/supgt;基因和MHY6?iCre基因的F2代小鼠；再在F2代小鼠5～6周齡時，對其心肌細胞中RDH10基因進行特異性敲除，持續飼養至左心室射血分數小于60％，即得到所述基于心肌視黃醇代謝紊亂的成年小鼠心衰模型。該模型的構建為進一步研究心肌視黃醇代謝紊亂與心力衰竭的關系增加了可操作性和便利性，為基于心肌視黃醇代謝紊亂的心臟疾病提供了復制和研究的工具，對心臟疾病相關研究具有相當的必要性。

技術領域

本發明屬于醫藥技術領域。更具體地，涉及一種基于心肌視黃醇代謝紊亂的成年小鼠心衰模型的構建方法。

背景技術

心力衰竭是各類心血管疾病的終末階段，心力衰竭患者會出現呼吸困難、疲勞、運動耐力差和液體潴留等多種癥狀，嚴重影響患者的生活質量。并且，心力衰竭發病隱匿且致死率極高，確診后的患者五年內存活率甚至低于多種惡性腫瘤。因此，尋找心力衰竭的早期診斷指標及治療方法，開展針對其發病機制的基礎研究尤為重要。

應用疾病動物模型模擬人類疾病，是尋找人類疾病潛在分子機制和治療靶點的主要方式。現有的心衰動物模型根據其造模方式及發病機制的不同，可分為以冠狀動脈結扎法和堵塞法為主構建的缺血性心肌病心衰模型、以主動脈狹窄法和鹽負荷法為主構建的壓力負荷型心衰模型、以動靜脈瘺法和心臟瓣膜關閉不全法構建的容量前負荷型心衰模型、利用心肌損害藥物構建的藥源性心衰模型和以特定基因修飾構建的基因修飾心衰模型。雖然這些動物模型的構建已為心力衰竭相關疾病的防治研究提供了極大的幫助，但日益升高的患病率和死亡率表明現有對心力衰竭的研究仍不充分。

近期，Ni?Yang等指出心衰患者的心肌中普遍存在著以視黃酸含量顯著降低為主要特征的視黃醇代謝紊亂現象(Yang?Ni,Parker?Lauren,Yu?Jianshi,Jones?Jace?W,LiuTing,Papanicolaou?Kyriakos?N,Talbot?C?Conover,Margulies?Kenneth?B,O'RourkeBrian,Kane?Maureen,Foster?D?Brian.Cardiac?retinoic?acid?levels?decline?inheart?failure.[J].JCI?insight,2021:)，但心肌視黃醇代謝紊亂與心力衰竭之間的關系尚不清楚，因此亟需構建合適的動物模型以供研究。

發明內容

本發明針對現有技術的不足，旨在提供一種基于心肌視黃醇代謝紊亂的成年小鼠心衰模型的構建方法，為進一步研究心肌視黃醇代謝紊亂與心力衰竭的關系增加可操作性和便利性，為基于心肌視黃醇代謝紊亂的心臟疾病提供復制和研究的工具。

本發明的首要目的是提供RDH10基因心肌特異性敲除在構建基于心肌視黃醇代謝紊亂的成年小鼠心衰模型中的應用。

本發明的另一目的是提供一種基于心肌視黃醇代謝紊亂的成年小鼠心衰模型的構建方法。

本發明上述目的通過以下技術方案實現：

本發明通過向5周齡的同時帶有RDH10^fl/fl基因和MHY6-iCre基因的小鼠腹腔注射他莫昔芬，受他莫昔芬激活的icre蛋白會對小鼠心肌中RDH10基因進行特異性誘導敲除，可使小鼠在誘導完成后第15周就自發出現了心肌視黃醇代謝紊亂和心力衰竭的現象，成功構建得到基于心肌視黃醇代謝紊亂的成年小鼠心衰模型，說明RDH10基因心肌特異性敲除在構建基于心肌視黃醇代謝紊亂的成年小鼠心衰模型中發揮著至關重要的作用。因此，RDH10基因心肌特異性敲除在構建基于心肌視黃醇代謝紊亂的成年小鼠心衰模型中的應用應在本發明的保護范圍之內。