[發明專利]生物微區實時溫度檢測方法

在審

• 申請號: 202210064175.3
• 申請日: 2019-05-21
• 公開（公告）號: CN114485983A
• 公開（公告）日: 2022-05-13
• 發明（設計）人: 魏言春;權莉;王益民;潘長江;劉瑩;雍建芳
• 申請（專利權）人: 淮陰工學院
• 主分類號: G01K11/20
• 分類號: G01K11/20;G01K13/20;C09K11/85;C09K11/02;A61K49/00
• 代理公司: 淮安市科文知識產權事務所 32223
• 代理人: 廖娜;李鋒

1.一種生物微區實時溫度檢測方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）將上轉換納米探針與待測樣品按照質量體積比為1mg：1ml混合均勻，共同孵育6 h后，用PBS清洗后，使用波長為808 nm的近紅外激光照射；所述近紅外激光的功率密度小于或等于100 mW/cm²；

（2）近紅外激光對待測樣品內的所述上轉換納米探針進行聚焦掃描激發，使其產生520nm和545 nm的可見光；

（3）根據產生的520 nm和545 nm的可見光的強度信息，計算出520 nm和545 nm的兩路光強比率，并通過所述光強比率的數值和所述上轉換納米探針的比率-溫度標準曲線比較獲得各聚焦掃描點的微區溫度數據；

其中的上轉換納米探針的化學式為NaYF₄：Yb/Er/Nd@IR806@DSPE-PEG；其中，上轉換納米粒子NaYF₄：Yb/Er/Nd中的Y、Yb、Er和Nd元素的摩爾比為78：20：1：1。

2.根據權利要求1所述的生物微區實時溫度檢測方法，其特征在于：所述上轉換納米探針的合成方法包括以下步驟：

S1：合成上轉換納米粒子NaYF₄：Yb/Er/Nd；

S2：將所述上轉換納米粒子NaYF₄：Yb/Er/Nd與IR806染料在CHCl₃中混合，超聲1小時后離心，棄上清后重懸于水溶液中，并加入DSPE-PEG超聲30分鐘，離心棄上清并用生理PBS重懸后，得所述上轉換納米探針。

3.根據權利要求2所述的生物微區實時溫度檢測方法，其特征在于：在所述S1中，通過以下步驟合成所述上轉換納米粒子NaYF₄：Yb/Er/Nd：

將NaOH水溶液、乙醇和油酸在室溫下充分混合至澄清后，將Y、Yb、Er和Nd元素的乙酸鹽按照Y、Yb、Er和Nd元素的摩爾比為78：20：1：1加入上述澄清液并攪拌均勻；接著加入NaF乙醇溶液后，190℃水熱反應24 h，離心獲得所述上轉換納米粒子NaYF₄：Yb/Er/Nd。

4.根據權利要求3所述的生物微區實時溫度檢測方法，其特征在于：所述NaOH水溶液、乙醇和油酸的體積比為3：8：20。

5.根據權利要求2所述的生物微區實時溫度檢測方法，其特征在于：在所述S2中，所述上轉換納米粒子NaYF₄：Yb/Er/Nd與所述IR806染料在CHCl₃中的質量比為4000：1。

6. 根據權利要求1至5中任一項所述的生物微區實時溫度檢測方法，其特征在于：所述上轉換納米探針能夠被808 nm近紅外激光同時直接激發和間接能量共振轉移激發發出520nm和545nm的可見光。