[發(fā)明專利]一種苯二氮卓類新型毒品在線固相微萃取高效液相色譜聯(lián)用檢測(cè)方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202210053270.3
• 申請(qǐng)日: 2022-01-18
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN114414691B
• 公開(kāi)（公告）日: 2022-11-08
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王家斌;孫健
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 福州大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N30/02
• 分類號(hào): G01N30/02;G01N30/06;G01N30/54;G01N30/74
• 代理公司: 福州元?jiǎng)?chuàng)專利商標(biāo)代理有限公司 35100
• 代理人: 林文弘;蔡學(xué)俊

1.一種苯二氮卓類新型毒品在線固相微萃取高效液相色譜聯(lián)用檢測(cè)方法，其特征在于：所述的檢測(cè)方法是以共價(jià)有機(jī)框架表面功能化整體柱作為固相微萃取整體柱，結(jié)合管內(nèi)固相微萃取-高效液相色譜在線聯(lián)用系統(tǒng)，建立的苯二氮卓類新型毒品的在線固相微萃取高效液相色譜聯(lián)用檢測(cè)方法；

所述的共價(jià)有機(jī)框架表面功能化整體柱是以聚（甲基丙烯酸縮水甘油酯-co-乙二醇二甲基丙烯酸酯）整體柱作為基質(zhì)整體柱，使用堿性對(duì)苯二胺溶液作為功能化試劑對(duì)其表面進(jìn)行聚對(duì)苯二胺纖維功能化；再將亞胺型共價(jià)有機(jī)框架的反應(yīng)液與乙酸水溶液的混合液注滿整體柱，以聚對(duì)苯二胺纖維作為結(jié)合位點(diǎn)，在整體柱表面原位生成共價(jià)有機(jī)框架微球，制得共價(jià)有機(jī)框架表面功能化整體柱；

所述的苯二氮卓類新型毒品包括硝西泮，艾司唑侖，奧沙西泮，三唑侖，地西泮和氟硝西泮；

所述的共價(jià)有機(jī)框架表面功能化固相微萃取整體柱的制備方法包括以下步驟：

1）聚（甲基丙烯酸縮水甘油酯-co-乙二醇二甲基丙烯酸酯）基質(zhì)整體柱的制備：先將長(zhǎng)度為33毫米，內(nèi)徑為2.1毫米的不銹鋼空柱用甲醇沖洗20分鐘，放入60℃烘箱烘干待用；基質(zhì)整體柱的制備填料由300 mg甲基丙烯酸縮水甘油酯、100 mg乙二醇二甲基丙烯酸酯、480mg 1,4-丁二醇、120 mg N,N-二甲基甲酰胺與1.2 mg偶氮二異丁腈組成，用旋渦混合器混勻后，超聲15分鐘；用注射器將配好的填料注入前述的不銹鋼柱中，放入60℃水浴反應(yīng)24小時(shí)；反應(yīng)結(jié)束后，以甲醇為流動(dòng)相，用液相色譜泵沖洗不銹鋼柱約1小時(shí)，以去除床層內(nèi)殘留的致孔劑、未反應(yīng)的單體以及反應(yīng)生成的一些低聚物，即得到聚（甲基丙烯酸縮水甘油酯-co-乙二醇二甲基丙烯酸酯）基質(zhì)整體柱；

2）聚對(duì)苯二胺纖維表面功能化：取2.1628 g對(duì)苯二胺與0.4 g氫氧化鈉加入20 mL甲醇，用漩渦混合器震蕩均勻，超聲20分鐘，得到1 mol/L堿性對(duì)苯二胺甲醇溶液，并將該溶液通過(guò)微量注射泵注入聚（甲基丙烯酸縮水甘油酯-co-乙二醇二甲基丙烯酸酯）基質(zhì)整體柱中，注滿密封后，常溫反應(yīng)24小時(shí)；反應(yīng)結(jié)束后，先以甲醇為流動(dòng)相，用液相色譜泵沖洗不銹鋼柱1小時(shí)，再將流動(dòng)相換成乙腈沖洗1小時(shí)，即完成基質(zhì)整體柱的聚對(duì)苯二胺纖維表面功能化；

3）共價(jià)有機(jī)框架表面功能化固相萃取整體柱的制備：取14.06 mg的1,3,5-三(4-氨苯基)苯與11.17 mg的2,5-二乙烯基-1,4-苯二甲醛，加入至5mL乙腈配置成共價(jià)有機(jī)框架反應(yīng)液；再將共價(jià)有機(jī)框架反應(yīng)液、12 mol/L乙酸水溶液與完成表面功能化的基質(zhì)整體柱分別放入冰箱在4℃下預(yù)冷2小時(shí)，接著取1.0 mL共價(jià)有機(jī)框架反應(yīng)液，加入60 μL 12 mol/L乙酸水溶液，震蕩混勻，用微量注射泵將其注入完成表面功能化的基質(zhì)整體柱中，注滿密封后，放入60℃水浴反應(yīng)；1小時(shí)后將柱子取出自然冷卻10分鐘，按前述的方法從反方向再次注入共價(jià)有機(jī)框架反應(yīng)液與乙酸水溶液的混合液，注滿密封后，再次放入60℃水浴反應(yīng)；重復(fù)上述操作3次；最后一次注入完畢后，將不銹鋼柱置于60℃水浴中反應(yīng)12小時(shí)，使其充分反應(yīng)；反應(yīng)結(jié)束后，以乙腈為流動(dòng)相，用液相色譜泵沖洗不銹鋼柱2小時(shí)，即得到共價(jià)有機(jī)框架表面功能化整體柱；

所述的管內(nèi)固相微萃取-高效液相色譜聯(lián)用系統(tǒng)由六通閥V1、六通閥V2、液相色譜輸液泵A、液相色譜輸液泵B、0 .5 mL定量環(huán)、共價(jià)有機(jī)框架表面功能化固相微萃取整體柱、C18色譜分析柱、二極管陣列檢測(cè)器組成；

所述的在線固相微萃取高效液相色譜聯(lián)用檢測(cè)具體操作步驟如下：

平衡：首先，六通閥V1和V2都在LOAD位置；裝載液通過(guò)泵A平衡共價(jià)有機(jī)骨架表面功能化固相微萃取整體柱，流速為0.05 mL/min；流動(dòng)相通過(guò)泵B直接經(jīng)分析柱以獲得色譜分離需要的穩(wěn)定基線，流速為1.0 mL/min；同時(shí)，通過(guò)進(jìn)樣針將樣品溶液注滿定量環(huán)；

在線富集萃取：當(dāng)六通閥V1調(diào)至INJECT位置，固相微萃取開(kāi)始，定量環(huán)中的樣品經(jīng)由裝載液帶入固相微萃取整體柱，經(jīng)過(guò)10分鐘，六通閥V1調(diào)回LOAD位置，裝載液繼續(xù)沖洗固相微萃取整體柱90 秒以消除殘留的樣品溶液，降低其干擾；

在線洗脫：先將泵B流動(dòng)相流速調(diào)整為0.1 mL/min，再將六通閥V2調(diào)節(jié)至INJECT位置，利用流動(dòng)相將固相微萃取整體柱上富集的分析對(duì)象洗脫到分析柱前端，洗脫時(shí)間為150秒；

檢測(cè)：洗脫完成時(shí)，將六通閥V2調(diào)節(jié)LOAD位置；同時(shí)設(shè)置泵B流動(dòng)相流速為1.0 mL/min，通過(guò)分析柱將洗脫下來(lái)的分析對(duì)象進(jìn)行分離，再利用檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)；

所述的裝載液組成為：按體積分?jǐn)?shù)比計(jì)，乙腈/水=90%/10%；所述的流動(dòng)相組成為：按體積分?jǐn)?shù)比計(jì)，乙腈/1%三氟乙酸水溶液=60%/40%；所述的分析柱為C18分析柱；檢測(cè)波長(zhǎng)：229nm；柱溫：40℃。