[發(fā)明專利]一種尿液樣本的前處理方法、保存方法、自動(dòng)化處理系統(tǒng)及檢測方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202210050595.6
• 申請日: 2022-01-17
• 公開（公告）號: CN114354333A
• 公開（公告）日: 2022-04-15
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 成曉亮;余靜;周岳;張偉;鄭可嘉
• 申請（專利權(quán)）人: 江蘇品生醫(yī)療科技集團(tuán)有限公司
• 主分類號: G01N1/40
• 分類號: G01N1/40;G01N1/42;G01N1/28;G01N30/02;G01N30/06;G01N30/08;G01N30/34;G01N30/72;G01N35/10
• 代理公司: 北京超凡宏宇專利代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 11463
• 代理人: 張金銘

1.一種尿液樣本的保存方法，其特征在于，其包括：將經(jīng)過蛋白裂解后的尿液樣本進(jìn)行還原烷基化處理，然后進(jìn)行蛋白富集；

所述蛋白富集是采用PVDF過濾板對還原烷基化處理后的樣本進(jìn)行蛋白富集；

所述蛋白裂解采用的裂解液與待裂解的尿液樣本的混合體積比為1:0.1～9。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的尿液樣本的保存方法，其特征在于，所述裂解液選自如下物質(zhì)中的至少一種：尿素、硫脲、鹽酸胍、三(羥甲基)氨基甲烷-鹽酸、苯甲基磺酰氟、十二烷基硫酸鈉、脫氧膽酸鈉和3-[3-(膽酰胺丙基)二甲基銨基]-1-丙磺酸鹽；

優(yōu)選地，所述裂解液選自尿素，且所述尿素在所述待裂解的尿液樣本中的終濃度為1M-5M；

優(yōu)選地，所述蛋白裂解液采用的稀釋液選自如下物質(zhì)中的至少一種：碳酸氫銨、三羥甲基氨基甲烷鹽酸鹽溶液、磷酸鹽溶液。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的尿液樣本的保存方法，其特征在于，所述蛋白富集前，還包括對所述PVDF過濾板進(jìn)行活化，活化后用所述裂解液進(jìn)行平衡，然后將所述還原烷基化處理后的樣本轉(zhuǎn)移至平衡后的PVDF過濾板上進(jìn)行蛋白富集；

優(yōu)選地，所述活化采用的活化劑為醇類物質(zhì)。

4.一種尿液樣本的前處理方法，其特征在于，其包括：將經(jīng)過蛋白裂解后的尿液樣本進(jìn)行還原烷基化處理，然后進(jìn)行蛋白富集，富集后再進(jìn)行酶解，濃縮凍干；

所述蛋白富集是采用PVDF過濾板對還原烷基化處理后的樣本進(jìn)行蛋白富集；

所述蛋白裂解采用的裂解液與待裂解的尿液樣本的混合體積比為1:0.1～9。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的尿液樣本的前處理方法，其特征在于，所述酶解后還包括收集PVDF過濾板中的濾液；

優(yōu)選地，所述酶解采用酶為胰蛋白酶和賴氨酸酶；

優(yōu)選地，所述酶解時(shí)間為1-18h；

優(yōu)選地，所述蛋白富集包括：將還原烷基化處理后的樣本加入PVDF過濾板，離心后，用洗脫液清洗離心獲得的樣本。

6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的尿液樣本的前處理方法，其特征在于，所述裂解液選自如下物質(zhì)中的至少一種：尿素、硫脲、鹽酸胍、三(羥甲基)氨基甲烷-鹽酸、苯甲基磺酰氟、十二烷基硫酸鈉、脫氧膽酸鈉和3-[3-(膽酰胺丙基)二甲基銨基]-1-丙磺酸鹽；

優(yōu)選地，所述裂解液選自尿素，且所述尿素在所述待裂解的尿液樣本中的終濃度為1M-5M。

7.一種尿液樣本的自動(dòng)化處理系統(tǒng)，其特征在于，其包括尿液樣本儲(chǔ)存單元、處理液供應(yīng)單元、PVDF過濾板供應(yīng)單元、吸樣單元、蛋白收集單元和酶儲(chǔ)存單元，且所述尿液樣本儲(chǔ)存單元、處理液供應(yīng)單元、PVDF過濾板供應(yīng)單元、吸樣單元、蛋白收集單元和酶儲(chǔ)存單元均電連接于控制終端實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化控制。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的尿液樣本的自動(dòng)化處理系統(tǒng)，其特征在于，所述處理系統(tǒng)還包括裂解反應(yīng)容器供應(yīng)單元、搖床、濃縮儀和PCR板；

所述處理液供應(yīng)單元包括裂解液供應(yīng)單元、還原劑供應(yīng)單元、烷基化試劑供應(yīng)單元、終止烷基化反應(yīng)試劑供應(yīng)單元、活化劑供應(yīng)單元、洗脫液供應(yīng)單元和復(fù)溶溶劑供應(yīng)單元。