[發明專利]溫膽湯中總黃酮含量的測定方法

在審

• 申請號: 202210048852.2
• 申請日: 2022-01-17
• 公開（公告）號: CN114544525A
• 公開（公告）日: 2022-05-27
• 發明（設計）人: 徐宏喜;張紅梅;楊思雨;李洋;李寅慶
• 申請（專利權）人: 神威藥業集團有限公司;京津冀聯創藥物研究（北京）有限公司;河北神威藥業有限公司
• 主分類號: G01N21/31
• 分類號: G01N21/31;G01N21/78
• 代理公司: 北京匯智英財專利代理事務所(普通合伙) 11301
• 代理人: 趙大寧

本發明提供一種溫膽湯中總黃酮含量的測定方法，屬于藥物檢測技術領域，所述測定方法為首先取柚皮苷配制對照品溶液，濃度為C_對，再經紫外?可見分光光度法測定吸光度，得對照品吸光度A_對；再取重量為m_溫的溫膽湯加至69～71wt％乙醇中溶解，經超聲提取，濾過，得體積為V_試的供試品溶液，然后經紫外?可見分光光度法測定吸光度，得供試品溶液吸光度A_試，最后計算得所述溫膽湯中總黃酮含量。本研究通過直接測定法測定溫膽湯中總黃酮的含量，操作簡單，重復性好，并且確定了最優的溫膽湯總黃酮提取工藝。大類成分的研究可從整體角度反應溫膽湯的基準樣品，為后續的研究提供基礎。

技術領域

本發明涉及總黃酮的含量測定，尤其涉及一種溫膽湯中總黃酮含量的測定方法。

背景技術

溫膽湯在國家中醫藥管理局頒布的《古代經典名方目錄》中確定為第一批可進行復方制劑簡化的經典名方。《備急千金要方》中關于溫膽湯的記載為“半夏，竹茹，枳實各二兩、橘皮三兩、甘草一兩、生姜四兩，上六味咀，以水八升煮取二升，分三服”，主要用于治療神經系統、內分泌系統、消化系統、心血管系統等疾病。

目前關于溫膽湯及其加減方的報道，大多集中在臨床應用及藥理作用方面，對于質量控制方面的研究較少，主要集中在指紋圖譜的研究及代表成分的含量測定，對于評價溫膽湯的質量提供了一定的方法，但是對于基準樣品無法整體了解，目前對于溫膽湯的大類成分研究只見有關于多糖類成分的報道，經過前期研究以及文獻報道，溫膽湯中黃酮類成分最為豐富，是治療高血壓、動脈粥樣硬化的主要活性成分。

目前，雖有關于總黃酮的含量測定方法，但不同的藥品中的總黃酮含量測定方法也有所不同，比如對于趕黃草的總黃酮含量測定方法是以蘆丁為對照，以NaNO₂-Al(NO₃)₃-NaOH法在波長510nm處，進行總黃酮含量測定；對于黃岑藥材中的總黃酮含量測定方法是以黃岑苷為對照，以AlCl₃法在330nm處，進行總黃酮含量測定；對于蜜橘紅中總黃酮的含量測定方法是以橙皮苷為對照品，以直接測定法在波長283nm處，進行總黃酮含量測定。可以看出，對于不同的藥品，總黃酮的含量測定方法明顯不同。而溫膽湯中總黃酮含量的測定，對于溫膽湯的進一步研究和開發具有很好的參考價值，但溫膽湯中總黃酮含量測定過程中也會受其所含其它物質影響，因此，有必要對溫膽湯中總黃酮含量的測定方法進行研究。

發明內容

針對上述問題，本發明提供一種溫膽湯中總黃酮含量的測定方法。

為實現上述目的，本發明所采用的技術方案為：

一種溫膽湯中總黃酮含量的測定方法，其特征在于，所述測定方法包括以下步驟：

取柚皮苷加至69～71wt％乙醇中溶解，配制對照品溶液，濃度為C_對，再經紫外-可見分光光度法測定吸光度，得對照品吸光度A_對；

取重量為m_溫的溫膽湯加至69～71wt％乙醇中溶解，經超聲提取，濾過，得體積為V_試的供試品溶液；

其中，供試品溶液中總黃酮的濃度范圍需在20.22～80.88μg/mL之間；

量取供試品溶液經紫外-可見分光光度法測定吸光度，得供試品溶液吸光度A_試；

根據C_試＝(A_試×C_對)/A_對，計算供試品溶液的總黃酮濃度C_試；

再根據溫膽湯與供試品溶液的重量體積比，利用溫膽湯中總黃酮含量＝(C_對×V_試)/m_溫，計算得溫膽湯中總黃酮含量；