[發明專利]用于畜禽β-興奮劑檢測的檢測卡以及檢測β-興奮劑的方法

在審

• 申請號: 202210048566.6
• 申請日: 2022-01-17
• 公開（公告）號: CN114544944A
• 公開（公告）日: 2022-05-27
• 發明（設計）人: 閆立婷;王宗秀;付素姣
• 申請（專利權）人: 北京雁棲月盛齋清真食品有限公司
• 主分類號: G01N33/558
• 分類號: G01N33/558;G01N33/548;G01N33/58
• 代理公司: 北京潤捷智誠知識產權代理事務所(普通合伙) 11831
• 代理人: 安利霞

本發明提供了一種用于畜禽β?興奮劑檢測的檢測卡以及檢測β?興奮劑的方法。所提供的檢測卡包括樣品墊、結合墊、反應膜、吸水墊和底板，所述底板上依次粘貼有樣品墊、結合墊、反應膜和吸水墊，所述結合墊上含有膠體金標記的抗體，所述膠體金標記的抗體具有SEQ ID NO:1、2和3所示的HCDR序列，以及SEQ ID NO:4、5和6所示的LCDR序列；所述反應膜為硝酸纖維素膜，所述硝酸纖維素膜上具有檢測線(T)和質控線(C)，所述檢測線包被有β?興奮劑藥物半抗原?載體蛋白偶聯物，所述質控線包被有羊抗鼠抗抗體。應用檢測卡可以實現β?興奮劑的低檢測限檢測。

技術領域

本發明屬于生物技術檢測領域，具體而言，本發明涉及一種用于畜禽β-興奮劑檢測的檢測卡以及檢測β-興奮劑的方法。

背景技術

β-興奮劑對人的危害很大，主要表現為在：急性中毒時出現心悸，面頸、四肢肌肉顫動，手指震顫，足有沉感甚至不能站立，頭痛、頭暈、惡心、嘔吐、乏力，臉部潮紅，皮膚過敏性紅色丘疹。原有高血壓、冠心病、甲狀腺功能亢進者上述癥狀更易發生，對哺乳動物的危害與此相似。耐受性弱且有應激因素長時間存在時甚至可以發生猝死。飼喂β-興奮劑的畜禽，在長途販運途中經常有發生急性心力衰竭，導致猝死的情況。如，克倫特羅，性質穩定，要加熱至172℃才會分解，所以普通烹調方法根本無法破壞它的結構。有研究表明，如果長期食用，還會導致染色體畸變的可能，會誘發惡性腫瘤。

針對β-興奮劑檢測可以采用一體化快速檢測卡進行檢測。此方法對于工廠化生產中具有方便、快速、靈敏的特點，適用于工業化大量樣品檢測，提高產業化。然而對于該方法的檢測還需要進一步改進。

發明內容

本發明的目的是提供了一種能夠一體化檢測β-興奮劑的方法，所提供的方法能夠全面客觀的檢測出大部分的興奮劑成分。同時，此檢測通用豬、牛、羊等畜禽，非單一某一種畜禽。

具體而言，本發明提供了如下技術方案：

本發明的第一方面提供了一種用于畜禽β-興奮劑檢測的檢測卡，包括：

樣品墊、結合墊、反應膜、吸水墊和底板，所述底板上依次粘貼有樣品墊、結合墊、反應膜和吸水墊，

所述結合墊上含有膠體金標記的抗體，所述膠體金標記的抗體具有SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3所示的HCDR序列，和SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示的LCDR序列；

所述反應膜為硝酸纖維素膜，所述硝酸纖維素膜上檢測線(T)和質控線(C)，所述檢測線包被有β-興奮劑藥物半抗原-載體蛋白偶聯物，所述質控線包被有羊抗鼠抗抗體。

進一步地，所述β-興奮劑藥物半抗原-載體蛋白偶聯物通過β-興奮劑藥物半抗原與載體蛋白偶聯獲得。

進一步地，所述載體蛋白選自牛血清白蛋白、卵清蛋白、人血清白蛋白中的至少一種。

本發明的第二方面提供了一種利用檢測卡檢測畜禽β-興奮劑的方法，所述檢測卡為本發明第一方面所述的檢測卡，所述方法包括：

將樣本加入到本發明第一方面所述的檢測卡的樣品吸收墊上進行檢測的步驟。

進一步地，當樣本中待測物質含量高于檢測限時，測試區不顯色，結果為陽性；

當樣本中待測物質含量低于檢測限或者不含有β-興奮劑時，測試區顯色，結果為陰性。

進一步地，所述方法對于克倫特羅(Cle)的檢出限為3ng/g(3ppb)；

所述方法對于萊克多巴胺(Ract)的檢出限為3ng/g(3ppb)；

所述方法對于沙丁胺醇(Sal)的檢出限為5ng/g(5ppb)。

本發明所取得的有益效果為：